溫郁金石油醚部位抗抑郁作用藥效學(xué)研究

陳丹楨 陳楊 耜華兵 王薪淇 王英杰 毛潔 韓鳳波

摘 要：應(yīng)用利血平拮抗模型，研究溫郁金石油醚部位抗抑郁藥效，通過強(qiáng)迫游泳等行為學(xué)指標(biāo)以及拮抗利血平實(shí)驗(yàn)結(jié)果，評價(jià)溫郁金各濃度組抗抑郁作用，觀察不同濃度溫郁金石油醚部位對抑郁小鼠的抗抑郁作用。在強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)和懸尾實(shí)驗(yàn)中，中、高濃度的溫郁金均能顯著減少小鼠的不動(dòng)時(shí)間（P<0.05或P<0.01）;在糖水偏好實(shí)驗(yàn)中，溫郁金的中、高濃度顯著地增加糖水偏好值（P<0.01）;在拮抗利血平實(shí)驗(yàn)中，中、高濃度的溫郁金均能顯著地拮抗利血平所誘導(dǎo)的小鼠眼瞼下垂（P<0.01）和運(yùn)動(dòng)不能現(xiàn)象。結(jié)果表明：溫郁金石油醚提取物具有抗抑郁作用，實(shí)驗(yàn)中，石油醚提取物劑量0.338g/kg為抗抑郁最佳劑量。

關(guān)鍵詞：溫郁金;利血平;抗抑郁，藥效學(xué)

Pharmacological? study? on? anti - depression? effect? of? petroleum? ether? extract? of? Radix? Curcumae

Chen? Danzhen， Chen? Yang，Si? Huabing，Wang? Xinqi，Wang? Yingjie，Mao? Jie，Han? Fengbo

（Jilin? Agricultural? Science? and? Technology? University，Academy? of? food? engineering，Jilin? 132101，China）

Abstract：The? antidepressant? effect? of? petroleum? ether? fraction? of? Radix? Curcumae? was? studied? by? reserpine? antagonizing? model，and? the? antidepressant? effect of? each? concentration? group? of? Radix? Curcumae? was? evaluated? by? forced? swimming? and? other? behavioral&nbsp; indexes，to? observe? the? antidepressant? effect? of petroleum? ether? fraction? of? Radix? Curcumae? in? different? concentrations? on? depressed? mice.In? forced? swimming? test? and? tail? suspension? test，middle? and? high concentrations? of? Radix? Curcumae? could? significantly? reduce? the? immobility? time? of? mice（P<0.05或P<0.01），the? mean? and? high? concentrations? of? Radix? Curcumae? significantly? increased? the? sugar-water? Preference（P<0.01），the? moderate? and? high? concentrations? of? Radix? Curcumae? could? significantly antagonize? the? BLEPHAROPTOSIS（P<0.01）and? immobility? induced? by? reserpine.The? results? showed? that? petroleum? ether? extract? of? Radix? Curcumae? had antidepressant? effect.In? the? experiment，0.338g·kg-1? was? the? best? dose.

Key? words：Radix? Curcumae;Reserpine;Depression;Pharmacodynamics

在中醫(yī)理論認(rèn)為抑郁癥屬于“郁證、不寐、臟躁”的范疇，其病理機(jī)制[1]為氣機(jī)失調(diào)，內(nèi)氣積滯，導(dǎo)致肝氣郁結(jié)，心神失養(yǎng)。溫郁金作為“浙八味”之一，在中醫(yī)配方[2]中應(yīng)用已逾千年，具有行氣解郁、清心涼血、利膽退黃的功效，用于疏肝理氣解郁為主要療效的中藥復(fù)方以及中藥，其抗抑郁作用已受到學(xué)者們的關(guān)注。

溫郁金于治療抑郁癥的復(fù)方中出現(xiàn)的頻率較高。趙錚蓉[3]等人等人溫郁金抗抑郁活性部位篩選的研究結(jié)果顯示，抗抑郁作用效果明顯，其中，石油醚和乙酸乙酯萃取后的部分效果顯著。為了深入探究藥效學(xué)關(guān)系，以溫郁金石油醚萃取物研究抗抑郁作用，為尋找、開發(fā)中藥抗抑郁新藥提供思路。

1 材料與儀器

1.1 材料與試劑

溫郁金，姜科植物溫郁金（Curcumawenyujin? Y.? H.? Chen? et C.? Ling）的干燥塊根（寧波藥材公司），懸尾箱（自制），利血平（天津金耀藥業(yè)有限公司），鹽酸氟西汀（蘇州中化藥品工業(yè)有限公司），所有試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（N-1100S? 上海愛朗儀器有限公司）;電子天平（奧豪斯儀器有限公司）等。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物

清潔級昆明（KM）小鼠，20±2g，雌雄各半，共108只，由長春醫(yī)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中心提供。

2 方法與結(jié)果

溫郁金干燥塊根，用95%的乙醇回流提?。弦罕葹?∶10），減壓回收乙醇后得到溫郁金乙醇提取物浸膏，以熱水溶解，石油醚多次萃取，合并萃取液，濃縮，浸膏得率為1.69%，以吐溫-80溶解備用，配制成按生藥量[3]計(jì)：10g/kg（低），20g/kg（中），40g/kg（高）三組濃度備用。取試驗(yàn)小鼠，平衡飲食3d后，按性別體重隨機(jī)分為空白對照組、模型組、陽性對照組、溫郁金低、中、高濃度組，共六組，具體見表1。

分組后，對小鼠按照安排進(jìn)行灌胃給藥，2次/d，按0.2mL/10g灌服，于每天上午8∶00，下午2∶00進(jìn)行，連續(xù)14d。

2.1 強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)

末次給藥1h后，隨機(jī)取各組小鼠六只，置于水深10cm，恒溫（25±1℃）池中，從入水開始計(jì)時(shí)，進(jìn)行6min的強(qiáng)迫游泳，觀察并記錄其后4min的不動(dòng)時(shí)間，不動(dòng)判定標(biāo)準(zhǔn)：小鼠不再主動(dòng)掙扎、不扭動(dòng)，結(jié)果見表2。

由表2可知，溫郁金中濃度組優(yōu)于低、高濃度組，其抗抑郁作用最為顯著。對比空白對照組，溫郁金石油醚提取物各濃度組，陽性對照組的小鼠強(qiáng)迫游泳的時(shí)間均明顯降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01）。與模型組相對比，溫郁金石油醚提取物各濃度組，陽性對照組小鼠強(qiáng)迫游泳時(shí)間均顯著的減少，實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）。

2.2 懸尾實(shí)驗(yàn)

常與強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)聯(lián)合，以“行為組學(xué)”形式[4]共同評價(jià)，各組隨機(jī)另取六只小鼠，末次給藥1h后，距尾尖部2cm處，將小鼠用膠帶系緊，倒掛在密閉的不透光箱子（20cm×20cm×30cm）中，其頭部距箱底約5cm，呈倒掛狀態(tài)，從懸掛開始計(jì)時(shí)6min，觀察并記錄其后4min的不動(dòng)時(shí)間（以小鼠主動(dòng)停止掙扎，懸掛不扭動(dòng)判定為不動(dòng)），結(jié)果見表3。

由表3可知，溫郁金中濃度組優(yōu)于低、高濃度組，其抗抑郁作用最為顯著。對比空白對照組，溫郁金石油醚提取物的各濃度組，陽性對照組的小鼠懸尾時(shí)間均顯著的減少，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05或P<0.01）。與模型組相對比，溫郁金各濃度組，陽性對照組的小鼠懸尾時(shí)間均顯著的減少，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.01）。

2.3 糖水偏好實(shí)驗(yàn)

糖水偏好實(shí)驗(yàn)[5-7]可以反映動(dòng)物內(nèi)源性抑郁癥的中心癥狀，即快感缺失。首先于安靜環(huán)境內(nèi)訓(xùn)練小鼠適應(yīng)糖水性，在每籠中放置2個(gè)相同水瓶，首次一天內(nèi)，2瓶中均裝1%蔗糖水200mL;第2天，將另一瓶換成等重純水。

禁食禁水24h后，放置200mL的1%蔗糖水一瓶和等重純水一瓶，1h后，分別稱重2個(gè)水瓶，以糖水和純水的減失量計(jì)算糖水偏好指數(shù)，糖水偏好指數(shù)%=糖水消耗量/（糖水消耗量+純水消耗量）×100%[8]，結(jié)果見表4。

由表4可知，溫郁金高濃度組優(yōu)于中、低濃度組，其抗抑郁作用最為顯著。對比空白對照組，溫郁金石油醚提取物各濃度組，陽性對照組及模型組小鼠的糖水偏好指數(shù)均顯著的減少，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。與模型組相對比，溫郁金石油醚提取物各濃度組，陽性對照組及空白對照組小鼠糖水偏好指數(shù)均顯著增加，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05或P<0.01）。

2.4 拮抗利血平實(shí)驗(yàn)

以眼瞼下垂、運(yùn)動(dòng)不能進(jìn)行考察。眼瞼下垂觀測：各組取六只小鼠[9]，腹腔注射利血平1h后，將小鼠單個(gè)豎直垂放15s，觀測小鼠眼瞼下垂的程度，按照評分標(biāo)準(zhǔn)打分。

評分標(biāo)準(zhǔn)[10]：眼瞼全部睜開為0分，3/4睜開為1分，1/2睜開為2分，1/4睜開為3分，不睜開為4分。運(yùn)動(dòng)不能觀測：取眼瞼下垂觀測后的小鼠[11]，放入直徑為7.5cm的圓圈內(nèi)，觀察并記錄15s內(nèi)出圈次數(shù)。試驗(yàn)結(jié)果見表5。

由表5可知，溫郁金高濃度組優(yōu)于中、低濃度組，其抗抑郁作用最為顯著。對比空白對照組，溫郁金石油醚提取物各濃度組，陽性對照組及模型組小鼠眼瞼下垂評分均顯著升高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。與模型組相對比，溫郁金石油醚提取物中濃度組和高濃度組，陽性對照組及空白對照組小鼠眼瞼下垂評分均顯著降低，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P<0.05或P<0.01）。與模型組相比較，溫郁金石油醚提取物中、高濃度組可顯著提高小鼠出圈率，其中中濃度組抗抑郁效果最為顯著。

3 結(jié)論與討論

本實(shí)驗(yàn)通過行為絕望實(shí)驗(yàn)的強(qiáng)迫游泳和懸尾實(shí)驗(yàn)，以及糖水偏好實(shí)驗(yàn)、拮抗利血平實(shí)驗(yàn)，研究溫郁金石油醚部位的抗抑郁作用。雖然個(gè)別實(shí)驗(yàn)效果并不明顯，但是強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)、懸尾實(shí)驗(yàn)以及拮抗利血平實(shí)驗(yàn)效果顯著，對于溫郁金抗抑郁最適濃度的研究具有實(shí)驗(yàn)意義。由以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，溫郁金石油醚部位抗抑郁作用比較顯著，且與濃度相關(guān)，中、高濃度溫郁金石油醚提取物抗抑郁作用顯著，考慮到藥物利用率等因素，中濃度組劑量略優(yōu)于高濃度組，即0.338g/kg效果最佳。

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