預(yù)處理及培養(yǎng)方法協(xié)同作用對(duì)新鐵炮百合種子萌發(fā)的影響

吳小媚，袁延平，魏肖如，曹福祥，陳己任，呂長(zhǎng)平，李玉帆

(湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝園林學(xué)院/湖南省中亞熱帶優(yōu)質(zhì)花木繁育與利用工程技術(shù)研究中心，長(zhǎng)沙 410128)

0 引 言

【研究意義】百合是百合科百合屬(Lilium)所有植物的泛稱，為單子葉球根花卉。百合的繁殖方法主要有分球繁殖、鱗片扦插繁殖、珠芽繁殖、種子繁殖和組織培養(yǎng)等[1]。對(duì)于大多數(shù)種類的百合而言，種子繁殖存在著萌發(fā)率低、后代變異性大，同期時(shí)間較長(zhǎng)等問(wèn)題，經(jīng)過(guò)2～3年的栽培時(shí)間才能開花，目前市場(chǎng)上百合的繁殖方法多采用分球繁殖和鱗片扦插等無(wú)性繁殖方法[2]。 新鐵炮百合(Lilium×formolongi)是百合屬中罕見(jiàn)的播種繁殖1年開花的雜交品種，由日本Nishimura于1928年通過(guò)麝香百合和臺(tái)灣百合的反復(fù)雜交培育而來(lái)[3]。其花朵具有向上開放的獨(dú)特花姿，花色潔白且香氣濃郁，耐熱性強(qiáng)，是良好的鮮切花材料。尤其是新鐵炮百合播種繁殖1年開花的特性能夠解決百合種球繁殖中病毒感染和種球退化的問(wèn)題，在我國(guó)華南地區(qū)得到了廣泛的引種栽培，具有廣闊經(jīng)濟(jì)效益前景[4]。研究新鐵炮百合種子萌發(fā)的預(yù)處理方式和培養(yǎng)方法，獲得最短時(shí)間打破休眠、萌發(fā)整齊一致的實(shí)生苗，對(duì)新鐵炮百合花卉生產(chǎn)具有重要意義?！厩叭搜芯窟M(jìn)展】王新穎[5]研究表明，通過(guò)PEG的引發(fā)處理能夠提高新鐵炮百合種子的發(fā)芽能力；郝淵鵬等[6]研究表明,經(jīng)過(guò)低溫浸泡5 d并剝皮處理的種子在無(wú)菌播種條件下發(fā)芽率較為理想；韓秀麗等[7]研究表明,24℃以上的高溫將會(huì)阻礙新鐵炮百合種子的萌發(fā)；可溶性糖作為種子貯藏和萌發(fā)過(guò)程中的主要物質(zhì)基礎(chǔ)及呼吸底物[10]，其在種子萌發(fā)過(guò)程中的變化能充分體現(xiàn)種子的發(fā)芽狀況。超氧化物歧化酶(SOD)可以消除生物體在新陳代謝中產(chǎn)生的有害物質(zhì)，能催化過(guò)氧陰離子發(fā)生歧化反應(yīng)從而清除超氧陰離子自由基而抵御膜脂過(guò)氧化，減少膜傷害[12]?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】尚不明確不同的預(yù)處理及培養(yǎng)方法協(xié)同作用對(duì)種子萌發(fā)有著什么樣的影響，目前關(guān)于新鐵炮百合種子萌發(fā)的研究報(bào)道較少，針對(duì)新鐵炮百合種子萌發(fā)過(guò)程中的生理指標(biāo)的變化亦尚無(wú)研究報(bào)道。 研究預(yù)處理及培養(yǎng)方法協(xié)同作用對(duì)新鐵炮百合種子萌發(fā)的影響。【擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題】以新鐵炮百合雷山1號(hào)種子為材料，采用三因素四水平正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，研究不同預(yù)處理方式、培養(yǎng)溫度以及培養(yǎng)方式對(duì)種子發(fā)芽的影響，為新鐵炮百合實(shí)生苗的規(guī)?；敝成a(chǎn)提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材 料

新鐵炮百合雷山1號(hào)種子。

1.2 方 法

1.2.1 預(yù)處理及培養(yǎng)方法協(xié)同作用正交試驗(yàn)

采用L16(45)正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，設(shè)種子預(yù)處理方式(A)、培養(yǎng)溫度(B)和培養(yǎng)方式(C)三個(gè)因素，每個(gè)因素設(shè)4個(gè)水平。正交試驗(yàn)共16個(gè)處理，每個(gè)處理50粒種子，重復(fù)3次，共用種子2 400粒。表1

表1 試驗(yàn)因子及水平Table 1 The factors and levels

因素A種子預(yù)處理方式設(shè)置4個(gè)水平， 水平A1為4℃浸種7 d，將種子裝在燒杯里加無(wú)菌水浸沒(méi)后置于4℃冰箱7 d；水平A2為GA3(100 mg/kg)處理2 h，GA3經(jīng)NaOH溶解后用蒸餾水配制成100 mg/kg的溶液；水平A3為4℃浸種7 d后再用GA3(100 mg/kg)處理2 h；水平A4為對(duì)照CK，不做任何處理。

因素B為種子培養(yǎng)溫度，設(shè)置了4個(gè)水平，分別為15、18、21和25℃ ，用B1、B2、B3和B4表示。將經(jīng)過(guò)不同預(yù)處理的種子分別放置于各溫度水平的恒溫恒濕光照培養(yǎng)箱中，濕度50%，光照時(shí)間16 h，黑暗8 h。

因素C為種子培養(yǎng)方式。水平C1采用MS培養(yǎng)基無(wú)菌培養(yǎng)，培養(yǎng)基配方為MS+30 g/L蔗糖+6.5 g/L瓊脂，pH 5.8。水平C2為MS+0.01 mg/L NAA培養(yǎng)基無(wú)菌培養(yǎng)，培養(yǎng)基配方為MS+0.01 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6.5 g/L瓊脂，pH 5.8。無(wú)菌培養(yǎng)操作過(guò)程首先將預(yù)處理過(guò)的種子置于自來(lái)水下沖洗2 h，再置于超凈工作臺(tái)中用70%酒精消毒30s，無(wú)菌水沖洗3次，有效氯2%的次氯酸鈉浸泡10 min，無(wú)菌水沖洗4～5次，最后用無(wú)菌濾紙吸干水分后接種于培養(yǎng)基中。水平C3為培養(yǎng)皿培養(yǎng)，培養(yǎng)皿洗凈后鋪上無(wú)菌水打濕的濾紙，播種后每天觀察種子萌發(fā)情況，濾紙干燥時(shí)及時(shí)補(bǔ)充水分。水平C4是土壤培養(yǎng)，以進(jìn)口草炭土為播種基質(zhì)，將種子均勻點(diǎn)播于經(jīng)過(guò)高溫殺菌的土壤表面后覆上一層細(xì)土。

1.2.2 培養(yǎng)溫度對(duì)新鐵炮百合種子萌發(fā)的生理特性影響

種子進(jìn)行4℃ 7 d浸種后，采用培養(yǎng)皿培養(yǎng)的方式，分別置于15、18、21和25℃ 4個(gè)處理梯度的恒溫恒濕光照培養(yǎng)箱中，濕度50%，光照/黑暗：16 h/8 h，每個(gè)處理30粒種子，重復(fù)3次。每天觀察種子的萌發(fā)情況，檢查并保持濾紙濕潤(rùn)，每隔3 d取樣測(cè)定可溶性糖含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。可溶性糖含量測(cè)定采用蒽酮比色法[8]；超氧化物歧化酶(SOD)活性采用氮藍(lán)四唑法測(cè)定[9]。

1.3 數(shù)據(jù)處理

通過(guò)肉眼觀察，記錄每天的種子萌發(fā)數(shù)量，以胚根突破種皮1 mm為萌發(fā)標(biāo)志，連續(xù)5 d沒(méi)有新的種子萌發(fā)記為發(fā)芽結(jié)束。

種子發(fā)芽率(Si)=發(fā)芽種子數(shù)/共檢測(cè)的種子數(shù)×100%.

種子發(fā)芽指數(shù)(Gi)=ΣGt/Dt.

其中Gt為在時(shí)間t的發(fā)芽數(shù)，Dt為發(fā)芽日數(shù)。試驗(yàn)種子發(fā)芽指數(shù)在播種后第9 d測(cè)定。

使用Excel表格結(jié)合DPS軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理統(tǒng)計(jì)分析，采用Duncan新復(fù)極差法進(jìn)行方差分析和多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 預(yù)處理及培養(yǎng)方法協(xié)同作用正交試驗(yàn)

2.1.1 預(yù)處理及培養(yǎng)方法正交試驗(yàn)最高萌發(fā)率處理組合的確定

研究表明,新鐵炮百合雷山1號(hào)種子在不同的處理下種子發(fā)芽率、發(fā)芽指數(shù)存在明顯差異。其中處理11的發(fā)芽率最高，發(fā)芽率98.67%，顯著高于處理8、12、14(P<0.05)，但與其它處理差異不顯著。種子發(fā)芽率最低的是處理12，發(fā)芽率僅46.67%。發(fā)芽指數(shù)是衡量種子發(fā)芽能力及整齊程度的重要指標(biāo)。從發(fā)芽指數(shù)的多重比較結(jié)果看，發(fā)芽指數(shù)最高的為處理11，9 d發(fā)芽指數(shù)達(dá)到4，與處理2、4、9相比差異不顯著，但是顯著高于其它處理(P<0.05)，發(fā)芽指數(shù)最低的為處理13，僅為0.07。 在正交試驗(yàn)中，種子發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)最高的處理均為11號(hào)處理，即種子經(jīng)4℃浸種7 d后GA3(100 mg/kg)處理2 h，于21℃的MS培養(yǎng)基中培養(yǎng)。表1，圖1

2.1.2 影響種子萌發(fā)最重要的因素及最優(yōu)組合的確定

研究表明,培養(yǎng)溫度(B)的種子發(fā)芽率極差在各因素中最大，為29.003，培養(yǎng)溫度對(duì)新鐵炮百合種子萌發(fā)影響最大，其次是種子預(yù)處理方式(A)，培養(yǎng)方式(C)極差最小。表2

表2 種子預(yù)處理及培養(yǎng)方法協(xié)同處理新鐵炮百合種子發(fā)芽率正交設(shè)計(jì)Table 2 The orthogonal design table of synergistic effect of pretreatment and cultural method on Lilium ×fomolongi germination

不同的種子預(yù)處理方法、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)方式對(duì)種子發(fā)芽率的影響存在極顯著差異(P<0.01)。3個(gè)因素對(duì)種子萌發(fā)的影響程度依次為培養(yǎng)溫度(B)>種子預(yù)處理方式(A)>培養(yǎng)方式(C)，與極差分析結(jié)果相同。表3

表3 各試驗(yàn)因子間方差Table 3 Table of variance analysis among test factors

注：(a) 4℃ 7 d浸種后GA3處理2 h于21℃ MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)；(b)4℃ 7 d浸種后于21℃ MS+NAA培養(yǎng)基上培養(yǎng)；(c)4℃ 7 d浸種后于21℃培養(yǎng)皿上培養(yǎng)；(d)4℃ 7 d浸種后于21℃土壤上培養(yǎng)Note:(a)Cultivate in MS medium at 21℃ after soaking seed in 4℃ for 7 days and then treat with GA3for 2hours ;(b)Cultivate in MS+NAA medium at 21℃ after soaking seed in 4℃ for 7 days;(C)Cultivate in culture dish at 21℃ after soaking seed in 4℃ for 7 days;(d)Cultivate in soil at 21℃ after soaking seed in 4℃ for 7 days圖 1 4種不同處理下的種子9 d萌發(fā)Fig. 1 Sees germination under four different treatments in 14 days

2.1.3 不同種子預(yù)處理對(duì)新鐵炮百合種子萌發(fā)的影響

研究表明,其中，4℃浸種7 d的預(yù)處理方式下的種子平均發(fā)芽率和平均發(fā)芽指數(shù)要明顯高于其它預(yù)處理，平均發(fā)芽率達(dá)94.5%，與其它預(yù)處理方式相比差異顯著(P<0.05)。無(wú)論是平均發(fā)芽率還是平均發(fā)芽指數(shù)，CK的值都是最低的，平均發(fā)芽率76.16%，平均發(fā)芽指數(shù)僅0.48，不經(jīng)預(yù)處理的種子活力最低。其中，低溫浸潤(rùn)后經(jīng)GA3處理的種子發(fā)芽率顯著低于低溫浸潤(rùn)，GA3處理并不能促進(jìn)新鐵炮百合種子萌發(fā)。圖2

注：采用Duncan多重比較的方法進(jìn)行差異顯著性分析，同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)Note: Duncan multiple comparison method was used to analyze the significance of differences. Different lowercase letters in the same column indicated significant differences with P< 0.05圖2 不同的種子預(yù)處理方式下新鐵炮百合種子平均發(fā)芽率及平均發(fā)芽指數(shù)變化Fig. 2 Effects of different seed pretreatment on seed germination rate and germination index of Lilium × formolongi

2.1.4 不同培養(yǎng)溫度對(duì)新鐵炮百合種子萌發(fā)的影響

研究表明,培養(yǎng)溫度的差異，對(duì)種子的萌發(fā)率影響甚大。21℃培養(yǎng)條件下的種子平均發(fā)芽率顯著高于18和25℃處理(P<0.05)，達(dá)到了94.17%，比18℃處理要高13個(gè)百分點(diǎn)，比25℃處理高26.34個(gè)百分點(diǎn)。但是21℃處理和15℃處理的平均發(fā)芽率差異不顯著。平均發(fā)芽率最低的培養(yǎng)溫度是25℃，僅為65.16%。21℃處理的平均發(fā)芽指數(shù)最高，和15、18℃對(duì)比差異顯著(P<0.05)，新鐵炮百合雷山1號(hào)種子在21℃培養(yǎng)條件下的發(fā)芽能力及活力明顯優(yōu)于其它溫度處理。 圖3

注：采用Duncan多重比較的方法進(jìn)行差異顯著性分析，同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)Note: Duncan multiple comparison method was used to analyze the significance of differences. Different lowercase letters in the same column indicated significant differences with P< 0.05圖3 不同培養(yǎng)溫度下新鐵炮百合種子平均萌發(fā)率及平均發(fā)芽指數(shù)變化Fig. 3 Effects of different culture temperature on seed germination rate and germination index of Lilium × formolongi

2.1.5 不同培養(yǎng)方式對(duì)新鐵炮百合種子萌發(fā)率的影響

研究表明,土壤培養(yǎng)的平均發(fā)芽率和平均發(fā)芽指數(shù)都要高于其它處理。其平均發(fā)芽率為89%，顯著高于MS+0.01 mg/L NAA無(wú)菌培養(yǎng)和培養(yǎng)皿培養(yǎng)，但是與MS無(wú)菌培養(yǎng)相比差異不顯著(P<0.05)。平均發(fā)芽率最低的為培養(yǎng)皿播種，低達(dá)71.66%，和土壤播種相比，平均發(fā)芽率低了17.34個(gè)百分點(diǎn)。圖4

注：采用Duncan多重比較的方法進(jìn)行差異顯著性分析，同列不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)Note: Duncan multiple comparison method was used to analyze the significance of differences. Different lowercase letters in the same column indicated significant differences with P< 0.05圖4 不同培養(yǎng)方式下新鐵炮百合種子平均萌發(fā)率及平均發(fā)芽指數(shù)變化Fig. 4 Effects of different cultivation methods on seed germination rate and germination index of Lilium × formolongi

2.1.6 種子預(yù)處理及培養(yǎng)方法最佳組合的發(fā)芽試驗(yàn)情況

研究表明,4℃浸種7 d的預(yù)處理，培養(yǎng)溫度21℃，土壤培養(yǎng)條件下的新鐵炮百合種子發(fā)芽率為99.18%，9 d發(fā)芽指數(shù)為4.65 ，大于正交試驗(yàn)中11號(hào)處理(4℃浸種7 d+GA3浸種2 h，培養(yǎng)溫度21℃，MS培養(yǎng)基無(wú)菌培養(yǎng))的發(fā)芽率98.67%和發(fā)芽指數(shù)4.00。圖1，圖4

2.2 不同培養(yǎng)溫度對(duì)新鐵炮百合種子萌發(fā)生理特性的影響

2.2.1 培養(yǎng)溫度對(duì)新鐵炮百合種子可溶性糖含量的影響

研究表明,不同溫度下新鐵炮百合種子內(nèi)可溶性糖含量總體呈先緩慢下降后急速上升再下降的情況。在前9 d，可溶性糖含量基本呈緩慢下降趨勢(shì)，種子在前期的吸漲階段通過(guò)呼吸作用分解合成碳水化合物為生命活動(dòng)提供能量。其中21℃處理的可溶性糖含量變化幅度和速度明顯比其它溫度處理快，分解量也大于其它處理，21℃處理種子活性和對(duì)可溶性糖的分解利用率最高。9到12 d時(shí)，可溶性糖含量升高，此時(shí)種子處于萌發(fā)階段，淀粉等高分子多糖降解為機(jī)體可利用的可溶性糖供種子萌發(fā)所需能量。可溶性糖除了作為有機(jī)物質(zhì)合成的能量來(lái)源，在非適宜生長(zhǎng)溫度等逆境條件下，還可進(jìn)行溶質(zhì)的積累參與滲透調(diào)節(jié)[11]。21℃處理的可溶性糖含量最低，變化幅度總體較其它處理平緩，21℃下的種子對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化和利用率最高，種子健康程度最大。相比之，25℃的種子可溶性糖含量較高，變化異常，種子積累溶質(zhì)作為滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)來(lái)抵抗不良環(huán)境，25℃不適合新鐵炮種子萌發(fā)。圖5

圖5 不同培養(yǎng)溫度下種子可溶性糖含量變化Fig. 5 Changes of soluble sugar content in seeds at different culture temperature

2.2.2 培養(yǎng)溫度對(duì)新鐵炮百合種子SOD活性的影響

研究表明,不同溫度處理下種子內(nèi)SOD活性的變化趨勢(shì)整體一致，都是呈先下降后上升的波浪形走向，并在9和15 d的時(shí)候出現(xiàn)高峰。在前6 d的時(shí)候， 此時(shí)種子在吸漲階段，各溫度處理下種子的SOD活性變化相差不大。 在第9 d的時(shí)候，種子開始露出胚根，所有溫度處理的SOD活性均迎來(lái)第1個(gè)小高峰，其中21℃的SOD活性明顯高于其它處理。在15 d時(shí)，各處理的SOD活性迅速上升達(dá)到高峰，峰值最高為21℃處理，553.33 U/g，與其它處理相比差異顯著。整個(gè)萌發(fā)過(guò)程中，21℃處理的種子SOD活性均明顯高于其它處理，21℃下的種子抗性最強(qiáng)，生長(zhǎng)狀況最好。

25℃處理下的種子SOD活性在整個(gè)萌發(fā)過(guò)程中一直處于最低位置，其SOD活性變化幅度不大，25℃抑制了酶活性，種子抗逆性差。圖6

圖6 不同培養(yǎng)溫度下種子SOD活性變化Fig. 6 Changes of SOD activity in seeds at different culture temperature

3 討 論

新鐵炮百合雷山1號(hào)和大多數(shù)百合種子一樣，整個(gè)發(fā)芽過(guò)程持續(xù)20～30 d[13]。研究發(fā)現(xiàn)，不同預(yù)處理方式下，雷山1號(hào)種子的發(fā)芽率存在明顯的差異，發(fā)芽效果最好的為4℃浸種7 d，表明適當(dāng)?shù)蜏亟?rùn)處理能提高種子的發(fā)芽率，與王新穎等[5]的報(bào)道相吻合。但與何澤明等[14]的研究結(jié)果有一定出入，其認(rèn)為低溫處理對(duì)新鐵炮百合發(fā)芽無(wú)明顯影響。何麗萍等[15]的研究表明，100 mg/L GA3處理對(duì)野生“瀘定百合”種子萌發(fā)具有明顯促進(jìn)作用，可加快種子萌發(fā)并提高種子發(fā)芽率，解雪華[16]的試驗(yàn)也表明GA3浸種6 h能有效縮短大花卷丹和臺(tái)灣百合的萌發(fā)時(shí)間。但試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)100 mg/L GA3處理的種子和CK相比發(fā)芽率并無(wú)明顯增加，且經(jīng)低溫浸潤(rùn)后再加GA3處理和只經(jīng)低溫浸潤(rùn)相比，種子發(fā)芽率明顯降低，GA3處理對(duì)新鐵炮雷山一號(hào)的發(fā)芽沒(méi)有明顯作用甚至一定程度上抑制了種子的萌發(fā)，這與楊煒如等[17]的研究結(jié)果有一定的相似處，其認(rèn)為50 mg/L的赤霉素能抑制岷江百合種子的萌發(fā)。究竟是品種間差異還是激素濃度和浸泡時(shí)間的不同影響種子萌發(fā)，有待進(jìn)一步研究。

通過(guò)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)方式不同對(duì)種子發(fā)芽率有著一定的影響。雷山1號(hào)種子用土壤培養(yǎng)和MS培養(yǎng)基無(wú)菌培養(yǎng)發(fā)芽率較高，接近90%，兩者發(fā)芽率相差不大，土壤培養(yǎng)的發(fā)芽率為89%，MS培養(yǎng)基無(wú)菌培養(yǎng)發(fā)芽率為88.66%。從經(jīng)濟(jì)和時(shí)間成本方面考慮，土壤培養(yǎng)方式發(fā)芽率高操作簡(jiǎn)便省時(shí)，為最佳培養(yǎng)方式。而添加有NAA的MS培養(yǎng)基培養(yǎng)方式，發(fā)芽率為82.66%，激素NAA抑制了種子的萌發(fā)。這與崔祺等[18]的試驗(yàn)結(jié)果不同，其認(rèn)為0.01 mg/L的NAA濃度能促進(jìn)淡黃花百合種子的萌發(fā)。發(fā)芽率最低的是培養(yǎng)皿播種，結(jié)果與郝淵鵬等[6]對(duì)新鐵炮百合朱麗葉的研究有所出入，可能是品種不同所造成的差異。綜合來(lái)看，最優(yōu)的培養(yǎng)方式是土壤培養(yǎng)。

與預(yù)處理方式和培養(yǎng)方式相比，培養(yǎng)溫度是影響新鐵炮百合雷山1號(hào)種子萌發(fā)的最重要的因素，并且21℃培養(yǎng)的種子活力和發(fā)芽率最高，25℃培養(yǎng)的種子活力和發(fā)芽率最低，與韓秀麗等[7]研究結(jié)果接近，新鐵炮百合雷山1號(hào)的最適培養(yǎng)溫度為20、24℃以上的高溫將抑制新鐵炮百合種子的萌發(fā)。

發(fā)芽率僅能反映種子萌發(fā)成幼苗的能力，并不能反映種子的健壯程度和對(duì)不良環(huán)境的抵抗能力[19]。種子萌發(fā)期間所需能量主要來(lái)源于其自身儲(chǔ)藏物質(zhì)例如可溶性糖的轉(zhuǎn)化和利用[11]。種子的吸漲和萌發(fā)過(guò)程伴隨著活性氧的產(chǎn)生和積累[20]，SOD 可以催化超氧化物自由基和氫離子反應(yīng)形成過(guò)氧化氫和分子氧以消除活性氧的危害[21]。通過(guò)對(duì)可溶性糖含量和SOD酶活性的測(cè)定，試驗(yàn)進(jìn)一步從儲(chǔ)藏物質(zhì)轉(zhuǎn)化和抗逆能力的角度研究了溫度對(duì)新鐵炮百合種子萌發(fā)過(guò)程中可溶性糖和SOD活性變化規(guī)律的影響，發(fā)現(xiàn)21℃培養(yǎng)條件下種子對(duì)于可溶性糖的利用和消除活性氧的能力顯著高于其它培養(yǎng)溫度，進(jìn)一步證實(shí)新鐵炮百合品系雷山1號(hào)種子萌發(fā)的適宜溫度為21℃。

4 結(jié) 論

培養(yǎng)方式對(duì)種子萌發(fā)影響最小。培養(yǎng)溫度為影響新鐵炮百合種子萌發(fā)的最重要因素。在4個(gè)預(yù)處理水平中，新鐵炮百合種子經(jīng)4℃浸種7 d的預(yù)處理方式發(fā)芽效果最好。 最優(yōu)培養(yǎng)方式為土壤播種。根據(jù)正交試驗(yàn)探究不同預(yù)處理方式、培養(yǎng)方式、培養(yǎng)溫度對(duì)新鐵炮百合種子萌發(fā)影響是成功的。新鐵炮百合雷山1號(hào)種子萌發(fā)最佳處理組合為預(yù)處理方法4℃浸種7 d，培養(yǎng)溫度21℃，土壤培養(yǎng)。

不同預(yù)處理和培養(yǎng)方法協(xié)同作用，土壤培養(yǎng)為雷山1號(hào)種子萌發(fā)的最佳處理組合，發(fā)芽率99.18%，9 d發(fā)芽指數(shù)4.65；21℃下種子內(nèi)部的可溶性糖消耗最快，SOD活性最強(qiáng)，是雷山1號(hào)的最佳培養(yǎng)溫度。