感染性疾病患者血液中紅細(xì)胞DARC 表達(dá)特點(diǎn)及與WBC 等實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的相關(guān)性

張靜，王素玲，金哲

（河南科技大學(xué)第一附屬醫(yī)院提血隊(duì)，河南 洛陽471000）

感染性疾病主要是人體通過不同途徑感染致病微生物（如真菌、細(xì)菌、支原體、衣原體、螺旋體、寄生蟲和立克次體等）后引起的疾病[1]，病種范圍廣，危害大。 血液中多數(shù)免疫復(fù)合物利用紅細(xì)胞的粘附作用轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮系統(tǒng)而后被吞噬細(xì)胞清除或被T 細(xì)胞殺滅，在血液免疫中，紅細(xì)胞免疫占主要作用[2-4]。 紅細(xì)胞免疫中補(bǔ)體受體1 和達(dá)菲抗原趨化因子比較重要，前者具有免疫粘附作用。 紅細(xì)胞膜上DARC 受體是能在體外誘導(dǎo)表達(dá)的固有免疫分子, 達(dá)菲抗原趨化因子受體和白細(xì)胞介素-8 呈高表達(dá)狀態(tài),但白細(xì)胞介素-10 并無明顯表達(dá)[5,6]。為探究感染性疾病患者血液中紅細(xì)胞達(dá)菲抗原趨化因子受體表達(dá)與WBC 等實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的相關(guān)性，本研究對我院收治感染性疾病患者進(jìn)行血液數(shù)據(jù)研究，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016 年2 月-2017 年8 月在我院接受治療的感染性疾病患者作為觀察對象。納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴年齡≥18 周歲；⑵經(jīng)實(shí)驗(yàn)室等檢查確診為感染性疾病者；⑶無其他系統(tǒng)嚴(yán)重疾??；排除標(biāo)準(zhǔn)： ⑴臨床資料不全者； ⑵合并免疫功能障礙者。 根據(jù)納入排除標(biāo)準(zhǔn)共納入病例數(shù)80 例，其中男45 例，女35 例，年齡38~67 歲，平均50.38±3.76歲；對照組納入排除標(biāo)準(zhǔn)：年齡≥18 周歲；無感染性疾?。粺o嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病者，共納入80 例，其中男40 例，女40 例，年齡40~69 歲，平均50.41±4.08歲。 兩組研究對象年齡、性別等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。 本項(xiàng)研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)評審?fù)ㄟ^，且所有患者均知情同意。

1.2 方法 感染性疾病患者空腹取靜脈血10ml，抗凝并離心，從 紅細(xì)胞層中吸取紅細(xì)胞100pl，并利用0.01mol/L PBS 稀釋, 分為同性實(shí)驗(yàn)管和對照管兩組進(jìn)行分子測定, 加入相應(yīng)試劑后避光反應(yīng)40min,并加入800pl PBS，搖勻，紅細(xì)胞懸液進(jìn)行離心，棄上清，沉淀加PBS 后重懸紅細(xì)胞，避光進(jìn)行上機(jī)測試。

1.3 評價(jià)指標(biāo) 觀察兩組紅細(xì)胞DARC 表達(dá)情況、WBC、中性粒細(xì)胞比值、細(xì)胞因子水平的差異，并分析感染性疾病患者血液中紅細(xì)胞DARC 表達(dá)情況與WBC、中性粒細(xì)胞比值、細(xì)胞因子水平的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 數(shù)據(jù)錄入后， 采用SPSS 11.5 軟件進(jìn)行分析。 計(jì)數(shù)和計(jì)量資料分別采用例和均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。 兩組紅細(xì)胞DARC 表達(dá)情況、WBC、中性粒細(xì)胞比值、細(xì)胞因子水平的比較采用t 檢驗(yàn)進(jìn)行分析，采用Pearson 相關(guān)分析法分析感染性疾病患者血液中紅細(xì)胞DARC 表達(dá)情況與WBC、中性粒細(xì)胞比值、細(xì)胞因子水平的相關(guān)性。 P<0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組紅細(xì)胞DARC、WBC、 中性粒細(xì)胞比值的比較 觀察組患者的紅細(xì)胞DARC 表達(dá)水平和LY低 于 對 照 組 （t=6.658、7.718，P<0.001），NEU 和WBC 水 平 高 于 對 照 組 （t=-17.376、-20.873，P<0.001）。 見表1。

表1 兩組紅細(xì)胞DARC、WBC、中性粒細(xì)胞比值的比較

2.2 兩組細(xì)胞因子水平的比較 觀察組患者的IL-6、IL-8、hs-CRP 和TNF-α 水平高于對照組 （t=-46.197、-37.567、-17.550、-28.535，P<0.001）。 見表2。

表2 兩組細(xì)胞因子水平的比較

2.3 感染性疾病患者紅細(xì)胞DARC 與WBC、 中性粒細(xì)胞比值、細(xì)胞因子的相關(guān)性 感染性疾病患者的紅細(xì)胞DARC 表達(dá)水平與LY 水平正相關(guān) （r=0.498、P=0.012）， 與NEU、WBC、IL-6、IL-8、hs-CRP 和TNF-α 水平負(fù)相關(guān) （r=-0.532、-0.517、-0.497、 -0.455、 -0.507、 -0.468，P =0.001、0.035、0.009、0.016、0.003、0.027）。 見表3。

3 討論

感染性疾病是指由真菌、細(xì)菌、支原體、衣原體等致病微生物利用不同途徑進(jìn)入人體后感染誘發(fā)的疾病[7]，病種廣泛，危害性高。 病原微生物侵入生物體后繁殖并大量釋放有害因子,隨著血液循環(huán)至全身，誘發(fā)全身性炎癥反應(yīng)綜合征，破壞機(jī)體臟器功能。 孫乃紅等[8]研究發(fā)現(xiàn)，感染性疾病產(chǎn)生后，血小板產(chǎn)生量減少，且消耗增加。 血小板減少是主要的感染因素，機(jī)體血小板減少后越易感染。 本研究認(rèn)為肺炎是最為常見的感染性疾病[9]，其次為敗血癥。 感染性疾病患者常見的臨床癥狀有低鈣、貧血、心肌損傷、呼吸衰竭、低血糖癥以及顱內(nèi)出血等[10]。表皮葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌以及溶血性葡萄球菌是感染性疾病的常見致病菌。

表3 感染性疾病患者紅細(xì)胞DARC 表達(dá)與WBC、中性粒細(xì)胞比值、細(xì)胞因子的相關(guān)性

TNF-α 和IL-8 均為重要的炎癥細(xì)胞因子。IL-8 是來源于巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞、皮膚成纖維細(xì)胞、 骨肉瘤細(xì)胞以及T 細(xì)胞的多源性細(xì)胞因子[11]，其中單核細(xì)胞含量最為豐富。 TNF-α 是能夠直接誘發(fā)腫瘤細(xì)胞死亡,僅來源于單核巨噬細(xì)胞的炎癥介質(zhì)[12]。 兩者均能影響單核巨噬細(xì)胞功能的變化。巨噬細(xì)胞是具有吞噬異物功能的非特異性免疫炎癥細(xì)胞，是機(jī)體較為重要的炎癥效應(yīng)細(xì)胞，且是能分泌眾多炎癥因子(如IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α 和IFN 等)的分泌細(xì)胞。

紅細(xì)胞上含有廣譜趨化因子受體,即達(dá)菲趨化因子受體,可通過Fy6 單體熒光免疫流式細(xì)胞儀測定法[13]，在針對全血進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)檢測中，癌細(xì)胞可激活DARC 產(chǎn)生病變。 DARC 分布廣泛，多數(shù)分布于紅細(xì)胞，少數(shù)存在于粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞，是IL-8的受體。 IL-8 受到細(xì)胞激活的免疫反應(yīng)刺激后被大量釋放，DARC 可大量吸附IL-8,封閉Fy6 受體，使其抗體不能與DACR 相應(yīng)接受點(diǎn)結(jié)合,因此紅細(xì)胞的Fy6 平均熒光強(qiáng)度顯著降低,由此說明紅細(xì)胞調(diào)控白細(xì)胞免疫反應(yīng)作用明顯,能調(diào)控白細(xì)胞生成并分泌IL-8。

本研究根據(jù)各組血細(xì)胞分組激活實(shí)驗(yàn)分析，觀察組患者的紅細(xì)胞DARC 熒光表達(dá)水平低于對照組，中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞高于對照組，提示紅細(xì)胞DACR 受體與Fy6 結(jié)合較少,且觀察組患者的IL-6、IL-8、hs-CRP 和TNF-α 水平均高于對照組，說明DACR 是由淋巴細(xì)胞和粒細(xì)胞產(chǎn)生的感染性疾病相關(guān)因子，也與吳蔚等[14-16]研究認(rèn)為感染性疾病IL-8 和IL-6含量上升而Fy6 表達(dá)數(shù)量降低結(jié)果相符。 因此本研究認(rèn)為紅細(xì)胞DARC 含量可作為是否產(chǎn)生感染性疾病的重要測評指標(biāo),患者的中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞含量升高,而DARC 含量降低的情況下，為感染性疾病的可能性較大。 本研究的創(chuàng)新性在于對感染性疾病患者進(jìn)行總體性數(shù)據(jù)分析， 得出感染性患者感染類型不同，但相關(guān)作用因子差異較小。

綜上所述,本研究針對感染性疾病患者進(jìn)行血液紅細(xì)胞DACR 表達(dá)水平測定和血液常規(guī)檢查，判定其與炎癥因子結(jié)合能力相關(guān),可作為臨床診斷感染性疾病的重要指標(biāo)。