液相色譜
——串聯(lián)質(zhì)譜法測定番茄10 種農(nóng)藥殘留

（遼寧省檢驗檢測認(rèn)證中心，遼寧 沈陽 110034）

番茄[1]俗稱西紅柿，原產(chǎn)于南美洲，后經(jīng)過引進(jìn)在我國南北方均有栽培。番茄是一種獨具特色的農(nóng)產(chǎn)品，色澤鮮美、營養(yǎng)豐富，含有多種維生素及微量元素，既可生食，也可熟吃，既能當(dāng)蔬菜，又能當(dāng)水果。但近年來，農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留問題越來越嚴(yán)重，番茄也避免不了這個問題。因此，建立一種分析番茄多種農(nóng)藥殘留方法就顯得格外重要。

目前，番茄農(nóng)藥殘留檢測方法有速測法[2]、氣相色譜法[3]、超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法等[4]。通過乙腈提取，QuEChERS方法凈化后，采用液相色譜——串聯(lián)質(zhì)譜方法，對番茄10 種農(nóng)藥殘留進(jìn)行測定。通過加標(biāo)回收和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差得出的結(jié)果表明，該方法快速、簡單，靈敏，可滿足農(nóng)產(chǎn)品日常監(jiān)測檢測工作的需要。

1 試驗部分

1.1 儀器與試驗裝置

Thermo TSQ Quantum Ultra 液質(zhì)聯(lián)用儀（美國Thermo Fisher 公司），配電噴霧離子源（ESI）；K600 型食物調(diào)理機(jī)（德國BRAUN）；天平（德國Sartorius，精確度0.0001g）；AH-20 全自動均質(zhì)器（廈門?？疲籘GL-20B 高速離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器）；LD4-8 離心機(jī) (北京京力)；Transferpette 移液槍（1～10mL、20～200μL、100～1000μL 德 國 普 蘭 德BRAND）；Dispensette 瓶口移液器（2.5～25mL 德國普蘭德BRAND）；WH300 旋渦混合器（上海安亭科學(xué)儀器）。

1.2 試劑與試驗材料

ProElut QuEChERS 產(chǎn)品套裝（北京迪馬科技），規(guī)格：400mg PSA/400mg C18/1200mg MgSO4等；乙腈（色譜純，美國TEDIA 試劑）；甲醇（色譜純，美國TEDIA 試劑）；甲酸（色譜純，美國FLUKA 試劑）。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)：啶蟲脒、嘧菌酯、多菌靈、烯酰嗎啉、甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽、吡蟲啉、甲霜靈、滅幼脲、辛硫磷、蟲酰肼（農(nóng)業(yè)農(nóng)村部環(huán)境監(jiān)測總站）。

2 試驗方法

2.1 樣品采集

抽取當(dāng)季不同地區(qū)的蔬菜大棚、超市、批發(fā)市場等地購買的番茄，每個樣品取3kg。將番茄切塊，取約200g 攪好的樣品，放入聚乙烯瓶中，寫好標(biāo)簽，于-16～-20℃條件下冷凍保存。

2.2 QuEChERS 前處理方法[5]

2.2.1 樣品提取。取已經(jīng)制備好的番茄樣品10.0g 于離心管中，加入20.0mL 的乙腈，在全自動均質(zhì)器上充分混勻1min，取出后加入1200mg MgSO4等鹽類，在離心機(jī)上以5000r/min的轉(zhuǎn)速離心2.0min，取出后靜置，以除去水分。

2.2.2 樣品凈化。吸取靜置后的上清液10.0mL 至帶有N-丙基乙二胺（PSA）和C18 等吸附劑的小柱中，在離心機(jī)上以5000r/min 的轉(zhuǎn)速離心2.0min，以除去雜質(zhì)，取上清液250μL，加入250μL 純凈水，裝入上機(jī)小瓶，充分混勻后待測。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)品的配制

本試驗使用外標(biāo)法，取出已購置的1000mg/L 各標(biāo)準(zhǔn)樣品，用甲醇做為溶劑，先配制成5mg/L 的混標(biāo)儲備液，再將混標(biāo)儲備液分別稀釋成0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L 的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，裝入上機(jī)小瓶，待測。

2.4 上機(jī)測定

2.4.1 色譜條件。色譜柱：Hypersil GOLD-C18 柱（100mm×2.1mm，3μm）；柱溫：30℃；進(jìn)樣量：10μL；流動相0.1%甲酸水溶液和甲醇溶液，梯度洗脫順序（如表1 所示）。

表1 溶劑梯度與流速

圖1 10 種農(nóng)藥的總離子流色譜圖

2.4.2 質(zhì)譜條件。電噴霧離子源，正離子掃描，多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）。電噴霧電壓：4200V、離子源溫度：350℃、霧化器壓力：40psi、碰撞氣流速：8L/min。定性離子對，定量離子對，碰撞能量，裂解電壓[6]（如表2 所示），10 種農(nóng)藥的總離子流色譜圖（如圖1 所示）。

表2 10 種農(nóng)藥的定性離子對，定量離子對，碰撞能量和裂解

3 結(jié)果與分析

3.1 平均回收率與方法精密度

空白樣品分別添加0.01mg/L、0.05mg/L、0.1mg/L 等3 種不同濃度的農(nóng)藥，每組添加做2 個平行樣品，添加回收率已換算成平均值，平均加標(biāo)回收率和方法精密度測定結(jié)果（見表3）。

從表3 可以看出，10 種農(nóng)藥的3 種添加水平回收率在79.3%～95.6%，精密度在2.4%～9.8%，說明此方法的比較可靠，結(jié)果比較準(zhǔn)確，前處理方法和儀器條件都比較成熟。

3.2 結(jié)果分析

本試驗采用番茄加標(biāo)回收試驗的方法，QuEChERS 方法進(jìn)行前處理。從表3 結(jié)果可以看出，添加3 種不同濃度的農(nóng)藥，0.05mg/L 濃度的添加無論回收率還是精密度都顯然比0.01mg/L 與0.1mg/L 濃度的添加要好，結(jié)果更接近100%。由此可以得出結(jié)論，日常檢測過程中，用于該儀器校正的標(biāo)準(zhǔn)品濃度水平可以配制在0.05mg/L。但由于此次試驗結(jié)果都符合GB/T 27404-2008 檢測方法[7]確認(rèn)的技術(shù)要求范圍內(nèi)，所以，在0.01～0.1mg/L 的范圍內(nèi)，本方法都可以使用。

4 結(jié)論

本試驗選擇了具有代表性的蔬菜——番茄，通過先進(jìn)的液相色譜——串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)，結(jié)合我國現(xiàn)在比較普遍應(yīng)用的QuEChERS 前處理方法來測定多種農(nóng)藥的殘留。方法操作簡便，實用度高，而且準(zhǔn)確度好，重現(xiàn)性好，不僅可以滿足現(xiàn)代社會所需要的簡便、迅速、準(zhǔn)確、靈敏的多農(nóng)藥殘留分析要求，而且可以利用現(xiàn)代化檢測手段，為農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)管提供可靠保障。

表3 10 種農(nóng)藥3 種不同濃度的平均加標(biāo)回收率和方法精密度