腎病綜合征患者血清蛋白電泳各條帶的特點

周琳，周偉麗

浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬邵逸夫醫(yī)院檢驗科 （浙江杭州 310016）

腎病綜合征（nephrotic syndrome，NS）可由多種病因引起，患者腎小球基底膜通透性增加，表現(xiàn)為大量蛋白尿（尿蛋白≥3.5 g/d）、低蛋白血癥（血漿白蛋白≤30 g/L）、高度水腫、高脂血癥[1]。目前，臨床多通過實驗室測定血清、尿液中的蛋白含量診斷該病，而隨著蛋白電泳技術(shù)的發(fā)展，血清蛋白電泳儀分離蛋白的特性被用于NS 的輔助診斷中。本研究采用法國Sebia Capillarys 2 Flex Piercing 全自動高效毛細管電泳儀對149例臨床確診為NS 的患者和32名健康體檢者進行血清蛋白電泳分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬邵逸夫醫(yī)院2017年3月至2019年7月臨床確診為NS 的149例患者作為試驗組，男90例，女59例；年齡23～85歲，平均（54.05±18.39）歲。選取同期醫(yī)院體檢中心的32名健康體檢者作為對照組（未患有肝、腎、心臟疾病），男20名，女12名；年齡24～84歲，平均（54.17±17.99）歲。兩組性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 儀器、試劑及方法

（1）儀器與試劑：法國Sebia Capillarys 2 Flex Piercing 全自動高效毛細管電泳儀配套試劑及質(zhì)控。（2）方法：利用毛細管電泳技術(shù)檢測兩組的血清蛋白圖譜。

1.3 臨床評價

比較兩組血清蛋白電泳各蛋白[白蛋白（albumin，Alb）、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β1-球蛋白、β2-球蛋白、γ 球蛋白]所占的百分比。血清蛋白電泳各蛋白所占百分比的參考范圍：Alb 50%～68%；α1-球蛋白 2%～6%；α2-球蛋白6%～12%；β1-球蛋白4.1%～7.3%；β2-球蛋白1.8%～6.2%；γ 球蛋白10%～20%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

兩組血清蛋白電泳Alb、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β1-球蛋白、β2-球蛋白所占的百分比比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；兩組血清蛋白電泳γ 球蛋白所占的百分比比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表1。

3 討論

普通血清蛋白電泳通?？煞譃锳lb、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β 球蛋白、γ 球蛋白5個區(qū)帶，每個區(qū)帶含有一種或多種蛋白成分。當(dāng)緩沖液中存在鈣離子時，其分辨力較高，常 可 分 辨 出β1、β2區(qū) 帶。法 國Sebia Capillarys 2 FlexPiercing 全自動高效毛細管電泳儀利用這一特性，將蛋白分為Alb、α1-球蛋白、α2-球蛋白、β1-球蛋白、β2-球蛋白、γ 球蛋白6個區(qū)帶。本研究利用這一特點，運用法國Sebia Capillarys 2 Flex Piercing 全自動高效毛細管電泳儀將NS 患者血清分為6個蛋白區(qū)帶，從而更深入地研究其蛋白圖譜，了解蛋白的種類及含量變化。

表1 兩組血清蛋白電泳各蛋白所占的百分比比較（%）

NS患者的臨床表現(xiàn)為“三高一低”，即大量蛋白尿、高脂血癥、高度水腫和低蛋白血癥。通過血清蛋白電泳，本研究發(fā)現(xiàn)NS患者具有特征性圖譜，即Alb明顯下降，α2-球蛋白、β2-球蛋白明顯升高。

Alb 區(qū)帶主要由Alb 組成。Alb 由肝實質(zhì)細胞合成，患NS 時，其合成量雖然可增高至正常的300%以上[1]，但由于腎小球基底膜通透性增加（包括電荷屏障、孔徑屏障的改變）、腎小管上皮細胞重吸收原尿中蛋白的能力下降、血漿蛋白濃度及腎小球濾過率等改變，導(dǎo)致小分子量的Alb 從尿中大量丟失，加之機體其他部位的Alb 降解增加，所以Alb 區(qū)帶總體表現(xiàn)為降低，與以往研究資料報道相似[2-7]。

α1-球蛋白區(qū)帶由α1-抗胰蛋白酶、α1-酸性糖蛋白、高密度脂蛋白、甲胎蛋白組成。其中，主要成分是α1-抗胰蛋白酶，屬于急性時相反應(yīng)蛋白；高密度脂蛋白可降低或不變，是由于高密度脂蛋白的成熟障礙導(dǎo)致，即高密度脂蛋白3增加而高密度脂蛋白2減少[8]；α1-酸性糖蛋白亦屬于急性時相反應(yīng)蛋白，但是含量降低[1]；甲胎蛋白增高多與腫瘤疾病相關(guān)。因此，α1-球蛋白區(qū)帶輕度增高，可能是由于腎臟損傷刺激肝細胞產(chǎn)生α1-抗胰蛋白酶引起。

α2-球蛋白區(qū)帶由觸珠蛋白、α2-巨球蛋白、銅藍蛋白組成。研究報道，α2-球蛋白區(qū)帶升高明顯[3-7]，本研究結(jié)果與其相似。α2-巨球蛋白是α2-球蛋白區(qū)帶的主要成分，由肝實質(zhì)細胞合成，其分子量較大（725 kDa），較難通過腎小球濾過膜，同時，當(dāng)合并低白蛋白血癥時，α2-巨球蛋白通過代償性合成增加來保持血漿膠體滲透壓，所以，α2-巨球蛋白表現(xiàn)為顯著增高[9-10]；觸珠蛋白為急性時相反應(yīng)蛋白，患NS 時，Alb 大量丟失，大分子觸珠蛋白明顯增加，銅藍蛋白往往下降，相關(guān)機制目前尚不清楚[1]。由于觸珠蛋白、α2-巨球蛋白升高含量遠大于銅藍蛋白下降含量，所以，α2-球蛋白區(qū)帶明顯升高。

β1-球蛋白區(qū)帶由轉(zhuǎn)鐵蛋白、低密度脂蛋白、補體C4、補體C3組成。研究報道，患NS 時，腎小球濾過膜通透性增加，血漿蛋白大量丟失，載脂蛋白含量減少，刺激肝臟代償性合成脂蛋白增加，同時外周利用分解脂蛋白減少，導(dǎo)致低密度脂蛋白濃度增高[2，11-12]，從而推測β1-球蛋白區(qū)帶輕度升高是由于低密度脂蛋白升高導(dǎo)致。

β2-球蛋白區(qū)帶由β2-微球蛋白、纖維蛋白原組成。研究報道，NS 患者由于肝臟代償生成纖維蛋白原增多，但又不能從體內(nèi)通過，導(dǎo)致血液中纖維蛋白原濃度升高[2，13]，從而推測β2-球蛋白區(qū)帶明顯升高是由于纖維蛋白原引起。

γ 球蛋白區(qū)帶由免疫球蛋白G、免疫球蛋白A 、免疫球蛋白M 和C 反應(yīng)蛋白組成。有研究報道，NS 患者γ 球蛋白區(qū)帶不變或相對下降[1]。本研究中，NS 患者γ 球蛋白區(qū)帶含量在正常參考范圍內(nèi)，與健康體檢者比較無顯著差異，與龔英峰[5]報道相似。有研究報道，NS 患者γ 球蛋白區(qū)帶含量下降[14]，可能是由于免疫球蛋白含量變化導(dǎo)致，即免疫球蛋白G、免疫球蛋白A 下降含量多于免疫球蛋白M、免疫球蛋白E 升高含量。

綜上所述，利用法國Sebia Capillarys 2 Flex Piercing 全自動高效毛細管電泳儀對NS 患者進行血清蛋白電泳分析，能夠更全面地了解血清蛋白的種類、特征，且可見特征性圖譜（Alb 明顯下降，α2-球蛋白、β2-球蛋白明顯升高），為臨床診斷NS 提供了參考。