如何檢驗(yàn)環(huán)境水中的微生物

費(fèi)航 徐琴

【中圖分類號(hào)】 R123.1

【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A

【文章編號(hào)】2095-6851（2020）08-067-01

水是生命之源，是一種非常珍貴的自然資源，特別是在人類居住周圍的水之源，水之源的好壞直接關(guān)系著每一個(gè)人的生命健康。在我國大部分地方都存在生活用水被工廠廢水、人類、牲畜糞便污染的情況。這些因數(shù)污染造成的水質(zhì)污染往往存在多種不同種類的微生物，其中主要包含了腐蝕性微生物以及病原性微生物。腐蝕性微生物主要起廢物分解作用對(duì)人體一般無害，但是病原性微生物就會(huì)對(duì)人體造成極大的傷害，一般都會(huì)引起病毒性感染，如常見的霍亂、傷寒、細(xì)菌性痢疾以及傳染性肝炎等流行疾病。因此特別是對(duì)于人類生活中用水以及水源進(jìn)行相關(guān)的微生物檢驗(yàn)是一種必要。要對(duì)水中微生物進(jìn)行檢驗(yàn)主要包含了兩個(gè)項(xiàng)目：細(xì)菌總數(shù)以及大腸菌群的測(cè)定。水中有害細(xì)菌的數(shù)量可以作為判斷水質(zhì)是否被污染的標(biāo)準(zhǔn)，細(xì)菌越多、種類越廣，也就能說明水質(zhì)污染越嚴(yán)重。細(xì)菌總數(shù)的是指一毫升水樣在普通瓊脂培養(yǎng)基上降溫度保持在37攝氏度，經(jīng)過24小時(shí)后的培養(yǎng)得到的平板細(xì)菌的總數(shù)。

1?水質(zhì)微生物及指示菌

水是微生物最適宜生長的壞境，特別是在被污染的水質(zhì)中，由于存在大量的有機(jī)物質(zhì)，使得微生物群在這種壞境中能夠大量繁殖。因此水體是僅次于土壤的第二種微生物天然培養(yǎng)基。水環(huán)境中的微生物主要來源于周圍土壤，以及人類、動(dòng)物的糞便造成的污染帶來。水體中微生物的數(shù)量和種類受各種環(huán)境條件的制約。經(jīng)過研究發(fā)現(xiàn)，水中存在的微生物類型主要是以革蘭氏陰性桿菌占主導(dǎo)。綜合比較多種環(huán)境下的水壞境，可以得出河水及溪水中革蘭氏陽性菌數(shù)量最多，這是由于陸地微生物沖洗污染所造成的。水中能夠引起疾病的病原性微生物一般都不是水中固有的，絕大部分都是由于周圍環(huán)境污染帶來的，其中主要以人和其它溫血?jiǎng)游锏募S便污染。水中經(jīng)?？蓹z測(cè)到的病原性細(xì)菌主要包含了：志賀氏菌、副溶血性弧菌、沙門氏菌、小腸結(jié)炎耶爾森氏菌、大腸桿菌、霍亂弧菌等

目前，世界各國一致認(rèn)為大腸桿菌可以作為水質(zhì)受糞便污染較好的判斷指南。在我國，對(duì)水質(zhì)控制也采用大腸菌群作為指示菌，GB5749-2006《中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) 生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》規(guī)定，生活用水中大腸桿菌的數(shù)量不得超過每升3個(gè)。

2?水質(zhì)微生物檢驗(yàn)方法

GB5749-2006《中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) 生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)法》提供了水質(zhì)中細(xì)菌總數(shù)和總大腸菌群的檢測(cè)方法。

2.1?細(xì)菌總數(shù)的檢測(cè)?國家標(biāo)準(zhǔn)中，細(xì)菌總數(shù)的是指一毫升水樣在普通瓊脂培養(yǎng)基上將溫度保持在37攝氏度，經(jīng)過24小時(shí)后的培養(yǎng)得到的平板細(xì)菌的總數(shù)。對(duì)于生活飲用水，可以直接在飲水處采樣1ml水樣品置入平皿中，在加入營養(yǎng)瓊脂充分震蕩均勻，在37℃條件下培養(yǎng)24小時(shí)，進(jìn)行計(jì)數(shù)。對(duì)水源進(jìn)行測(cè)量，可依據(jù)不同的水源情況做10倍梯度稀釋，針對(duì)性選擇1毫升水樣，品置入平皿中，在加入營養(yǎng)瓊脂充分震蕩均勻，在37℃條件下培養(yǎng)24小時(shí)，進(jìn)行計(jì)數(shù)。按照規(guī)定格式報(bào)告每毫升水中細(xì)菌總數(shù)。

2.2?總大腸菌群的檢測(cè)?國家標(biāo)準(zhǔn)中，大腸桿菌可以作為水質(zhì)受糞便污染較好的判斷指南?？偞竽c菌群指的是一群需氧及兼性厭氧的細(xì)菌群在37℃環(huán)境下經(jīng)過代謝生長使乳糖發(fā)酵，在24h內(nèi)培養(yǎng)得到革蘭氏陰性無芽胞桿菌。樣品中總大腸菌群數(shù)的含量，就是水質(zhì)被污染的程度，并且可以間接地預(yù)示有腸道致病菌存在的可能。依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)可以得到多管發(fā)酵法及濾膜法來檢測(cè)總大腸菌群的數(shù)量。

2.2.1?利用多管發(fā)酵法檢測(cè)總大腸菌群要注意三步?初發(fā)酵試驗(yàn)，平板分離，復(fù)發(fā)酵證實(shí)試驗(yàn)。初發(fā)酵試驗(yàn)，利用乳糖蛋白胨培養(yǎng)液在37℃條件下培養(yǎng)24小時(shí)，記錄產(chǎn)酸產(chǎn)氣量。對(duì)陽性管培養(yǎng)物，接種于品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基或伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基，觀察菌落特征，并進(jìn)行革蘭氏染色和鏡檢。

2.2.2?濾膜法檢測(cè)總大腸菌群，實(shí)際上就是使用微孔濾膜，經(jīng)過過濾一定量的水樣品，可以將水樣品中存在的細(xì)菌攔截在濾膜上，再將攔截有細(xì)菌菌群的濾膜放置于選擇性培養(yǎng)基上（如品紅亞硫酸鈉培養(yǎng)基），將溫度保持在37攝氏度，經(jīng)過24小時(shí)后的培養(yǎng)以及證實(shí)試驗(yàn)后，無需其他在處理可直接計(jì)數(shù)濾膜上生長的典型大腸菌群菌落，并計(jì)算出每升水樣中含有的總大腸菌群數(shù)。

3?說明

3.1?在進(jìn)行菌落總數(shù)測(cè)定實(shí)驗(yàn)中，要靈活選擇適合條件的稀釋度進(jìn)行。對(duì)生活飲水進(jìn)行測(cè)量時(shí)，可以根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定每毫升不得超過100個(gè)這個(gè)條件，可以不做稀釋梯度的處理而是直接吸取1毫升到平板進(jìn)行培養(yǎng)。

3.2?培養(yǎng)時(shí)間?與檢測(cè)食品中存在微生物的試驗(yàn)不同，檢驗(yàn)環(huán)境水中的微生物中的總數(shù)，培養(yǎng)時(shí)間采用24小時(shí)。

3.3?總大腸菌群的測(cè)定方法，在測(cè)定人類飲用水時(shí)應(yīng)該考慮到飲水與水源處的污染可能不同的原因，因此在測(cè)量時(shí)要采用不同的接種量，檢數(shù)表也不相同。

3.4?多倍濃度培養(yǎng)液?主要用于，接種量超過1毫升的情況。如配制3倍濃縮乳糖蛋白胨培養(yǎng)液50mL，加入100mL水后，總體積為150mL，培養(yǎng)液恢復(fù)到正常濃度。

3.5?濾膜法檢測(cè)總大腸菌群?采用這種測(cè)量方法必須滿足大量低濁度水樣，大量水樣濾過濾膜后，水中所含有的所有細(xì)菌均截留在濾膜上。