一品紅的組織培養(yǎng)技術研究

●楊涼花（陜西省安康市農業(yè)科學研究所院陜西安康725021）

一品紅為大戟科大戟屬常綠或半常綠植物，原產地墨西哥[1]。目前市場上還有一品白、一品粉等品種。由于一品紅的花期正值元旦和春節(jié)期間，而且開花時苞片甚為鮮艷，很適合節(jié)日的氣氛，因此在我國市場需求量較大。一品紅繁殖大多采用扦插的方法，因材料受限，無法滿足廣大的市場需求，而通過組織培養(yǎng)獲取種苗的方法已逐漸被采用，可進行大批量生產繁殖，進行工廠化育苗。

1 材料與方法

1.1 外植體的選擇

選取當地市場上一品紅品種‘喜慶紅’健壯植株的頂芽或側芽。

1.2 培養(yǎng)條件

用25℃恒溫培養(yǎng)。光照時間為12h/d，光照度為1 600Lx。

培養(yǎng)基滅菌前pH為6.0，蔗糖濃度為30g/L，瓊脂濃度為7g/L。

2 結果與分析

2.1 外植體的消毒

將采集的外植體剪除大葉片，置入燒杯中，用洗衣粉水搖動洗滌30min后再用自來水反復沖洗1h，送入無菌接種間，在超凈工作臺上先用75%的酒精浸泡20s后立即取出，用無菌水沖洗2～3次，再用0.1%的升汞滅菌5～7min，消毒時要不斷攪動，使材料與消毒液充分接觸，消毒過程中注意觀察外植體顏色的變化，消毒時間過長則外植體表面發(fā)黑，死亡率較高，時間過短則消毒不徹底，污染率較高[2]，最后再用無菌水沖洗4～5次，置入鋪有無菌濾紙的培養(yǎng)皿中，吸干表面水分，用解剖刀切去基部受損的組織，再切成1cm左右的帶芽莖段，備用。

2.2 培養(yǎng)方法

2.2.1 誘導分化增殖培養(yǎng)將經過無菌處理的外植體分別接種到各培養(yǎng)基中，見表1，每瓶接種6～8株。經過16～24d的培養(yǎng)以后，所有培養(yǎng)基中的外植體都開始萌動生長。培養(yǎng)基1中的外植體約24d開始分化，少數產生叢生芽，大部分沒有變化；培養(yǎng)基2中的外植體約22d后開始從基部生出比較密的叢生芽，但芽很小，誘導率在30%；在培養(yǎng)基3中，隨著NAA含量的提高，一部分誘導出苗，并且開始生根，但是苗較細；在培養(yǎng)基4中，由于外植體的培養(yǎng)時間較前面培養(yǎng)基中的外植體培養(yǎng)時間短，因此誘導率在70%左右，生成的小苗相對健壯；培養(yǎng)基5中的外植體約18d產生愈傷組織，分化率較高，伴有少量不定芽生成；培養(yǎng)基6中的外植體約16d開始分化，誘導分化率最高，達75%，且有白色不定根形成。觀察結果表明，增殖率與6-BA和NAA的含量有關，6-BA含量在1.0～2.0的范圍內，增殖系數隨著含量的增高而增加，但是在生產繁殖上，不能只要求增殖率，還要注重苗的長勢[3]。由觀察結果可知，培養(yǎng)基誘導分化效果最佳，即MS+1.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA是一品紅最適宜的初代培養(yǎng)基。

在誘導分化培養(yǎng)基上培養(yǎng)約25d以后，待誘導分化出的小苗長至4～6cm時，從培養(yǎng)瓶中取出，剪成帶芽的小段，再分別轉接到培養(yǎng)基MS+1.5mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA上繼續(xù)培養(yǎng)，每瓶接種5～6個，經過35d培養(yǎng)以后，繁殖體逐漸展開伸長，增殖倍數達到5倍以上。每隔40d左右分瓶轉接，進行繼代增殖培養(yǎng)，從而擴大培養(yǎng)規(guī)模，建立快速繁殖體系，見表1。

表1 6種培養(yǎng)基誘導分化效果對比

2.2.2 生根培養(yǎng)將進行繼代培養(yǎng)的繁殖體放在增殖培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)，大約25d以后，將已經長成的2～3cm高的幼苗分別轉接到表2中的生根培養(yǎng)基中進行生根培養(yǎng)，每瓶接種5～7株。培養(yǎng)約10d以后各植株陸續(xù)開始生根，將觀察結果進行統(tǒng)計得知，在培養(yǎng)基a中生根約需要18d，在培養(yǎng)基b中生根需要15d左右，在培養(yǎng)基c中生根需要12d，在培養(yǎng)基d中10d左右就開始生根。由結果可知，當NAA濃度增加到0.4mg/L時，雖然生根的天數縮短，但是生根數量少而且有須根。結果表明，一品紅生根的最佳培養(yǎng)基為1/2MS+0.3mg/LNAA[4-5]。

表2 4種培養(yǎng)基生根效果對比

3 移栽

生根的組培苗待根長至2～3cm時，選取生長健壯的瓶苗，從培養(yǎng)室中取出進行一段時間的煉苗，移栽至蛭石、腐葉土和細沙土按1:1:1比例配制而成的基質苗床中，在22～25℃條件下培養(yǎng)2～3周后上盆，在自然環(huán)境條件下培養(yǎng)，期間注意保溫、保濕并通風，噴施1～2次滅菌靈，成活率在85%以上。

4 小結和討論

通過組織培養(yǎng)方法獲得了‘喜慶紅’組培苗，經對溫度、水分及光照等進行人工調控管理，最終成功培育出盆栽植株。組織培養(yǎng)育苗與扦插苗相比較，有株型整齊均勻、植株健壯等優(yōu)點，是解決種苗需求較好的途徑。