一例薩福克羔羊慢性銅中毒的臨床診斷

文│蔡洪波（遼寧省建平縣八家農(nóng)場動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所）

● 養(yǎng)殖顧問

一例薩?？烁嵫蚵糟~中毒的臨床診斷

文│蔡洪波（遼寧省建平縣八家農(nóng)場動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所）

為了促進(jìn)生長，遼寧省朝陽市某種羊場給薩福克羔羊飼喂了“551”仔豬全價(jià)飼料，從而出現(xiàn)一起以貧血和血尿?yàn)橹饕卣鞯募膊　＝?jīng)病史調(diào)查、臨床癥狀觀察、病理學(xué)檢查、實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)、人工飼喂試驗(yàn)和實(shí)施藥物防治，最終確診為羔羊慢性銅中毒。

一、材料與方法

1.試驗(yàn)羊。朝陽市某種羊場自然發(fā)病的薩?？烁嵫?。

2.方法。

（1）病史調(diào)查。

（2）臨床癥狀觀察。對就診的兩只患病羔羊進(jìn)行檢查，調(diào)查了解其余14只病羔羊。

（3）剖檢病理學(xué)檢查。共剖檢5只病死羔羊，眼觀病變。無菌采集病死羔羊的肝、腎病變部制作組織切片，切片用95%乙醇固定，石蠟包埋，用HE染色，高倍光學(xué)顯微鏡鏡檢。

（4）實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。對59號病羔羊發(fā)病后頸靜脈采血，進(jìn)行血紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，測血紅蛋白量。

血清銅測定應(yīng)用原子吸收法，對59號病羔羊和5只采食高銅飼料臨床健康羔羊的血清銅進(jìn)行測定。

附紅細(xì)胞體和羊焦蟲檢查，取剛剛死亡的病羔羊淋巴結(jié)和血液涂片，95%乙醇固定，分別用瑞氏和姬姆薩進(jìn)行染色1小時(shí)，水洗干燥后鏡檢，沒有發(fā)現(xiàn)附紅細(xì)胞體和焦蟲。

（5）人工飼喂豬顆粒料對比試驗(yàn)。用551仔豬顆粒料（含銅量為200毫克/千克）分別給場外4只普通羔羊（35日齡左右）飼喂，飼喂到90天、110天、140天，一只不喂作對照。

（6）臨床診斷。羔羊出現(xiàn)典型銅中毒的臨床癥狀，如貧血、黃疸、血紅蛋白尿等；血清銅含量略有升高，AST、ALT等肝損傷特異性酶活性升高；人工飼喂豬顆粒料對比試驗(yàn)，得出結(jié)論與該場病例極其相似；附紅細(xì)胞體、焦蟲蟲體檢查均為陰性，可判斷為羔羊慢性銅中毒。

（7）治療原則及方法。經(jīng)過分析確定酮中毒的根源是飼喂“551”仔豬全價(jià)飼料，所以立即停止投喂豬用顆粒料，全場外購羔羊用顆粒料，或者自配全價(jià)精料。在飼喂羔羊時(shí)，添加鉬酸銨，每天每只按100毫克量計(jì)算，制成溶液噴灑在飼料上和玉米秸稈上，或者添加在飲水中，羔羊自由采食飲水。

解毒方法：對全群羔羊一律用硫酸亞鐵1克、氧化鎂1.5克和清水50毫升溶解后1次內(nèi)服，4小時(shí)1次，連服2次，中和或氧化銅以起到解毒作用；對全群每只羔羊肌肉注射強(qiáng)力解毒敏注射液10毫升，每日1次，連用3天；對臨床癥狀明顯的病羔羊，為了使血漿中游離銅迅速與白蛋白結(jié)合，促進(jìn)銅排出體外，應(yīng)用三硫鉬酸鈉注射液（含鉬0.05毫克/千克）稀釋到5%葡萄糖溶液中，100～200毫升溶液緩慢靜脈滴注，每日1次，連用3天。

對癥治療：為增強(qiáng)肝臟的解毒功能，二巰丁二鈉1克加生理鹽水100毫升，靜脈注射，每日1次，連用4天，間隔4天，再應(yīng)用1個(gè)療程。用10%葡萄糖注射液250毫升、三磷酸腺苷二鈉注射液（ATP）60毫克、輔酶A（CoA）300單位混合靜脈注射。同時(shí)應(yīng)用中藥，配方為黃芪（炙）6克、黨參3克、焦白術(shù)5克、當(dāng)歸6克、白芍6克、陳皮5克、茵陳5克、龍膽3克、梔子2克、甘草8克，水煎3次至310毫升服用，每只羊每天5～8毫升，連用5天。出現(xiàn)酸中毒應(yīng)用5%碳酸氫鈉100～250毫升視病情增減。對于體溫升高病羊，應(yīng)用青霉素4000單位/千克計(jì)算用量，加入復(fù)方氯化鈉注射液100毫升，另外添加維生素C 10毫升、維生素B1 10毫升混合靜脈滴注。為了調(diào)解機(jī)體代謝，適當(dāng)肌注地塞米松5毫升。對貧血嚴(yán)重的羔羊，應(yīng)用牲畜生血素肌肉注射。

表1 2例病羔羊體溫、脈搏及呼吸數(shù)的變化

二、結(jié)果與分析

1.病史調(diào)查結(jié)果。該場是2012年新建的種羊場，位于朝陽市建平縣，場周圍是大面積的鹽堿地，附近無廠礦，約5千米內(nèi)無居民居住，場內(nèi)飼養(yǎng)管理較好，各種設(shè)施完善，圈舍衛(wèi)生清潔，經(jīng)常消毒。同年11月份從澳大利亞新引入薩?？朔N羊100只，其中成年種公羊15只，成年種母羊85只。

2014年5～7月共產(chǎn)羔羊110只，斷乳成活98只。該場為了節(jié)省開支，加快羔羊發(fā)育，全場羔羊補(bǔ)飼精料，選用價(jià)格比較低（與羔羊顆粒比價(jià)）的仔豬全價(jià)飼料“551”，每天在舍內(nèi)自由采食，白天在場周圍草地上放牧運(yùn)動(dòng)，平均每天每只羔羊采食約0.5～0.8千克仔豬全價(jià)飼料。開始羔羊長勢快，發(fā)育良好，采食到60天左右，體壯羊只開始表現(xiàn)腹瀉、尿成深黃色。到2014年10月26日，開始有兩只非常優(yōu)良的羔羊突然發(fā)病，精神沉郁，四肢無力，伴有呼吸困難，口腔、眼黏膜淡色黃染，食欲減退，飲欲增加，尿液呈暗紅色。當(dāng)?shù)孬F醫(yī)診斷為因補(bǔ)飼食鹽過量發(fā)生中毒所致，應(yīng)用強(qiáng)心補(bǔ)液、利尿、止血、消炎等藥物治療，并在舍內(nèi)增設(shè)飲水槽等措施，到11月3日羔羊發(fā)病死亡逐漸增多。11月4日上午，養(yǎng)殖戶送來2只發(fā)病羔羊到錦州醫(yī)科大學(xué)附屬獸醫(yī)院就診。經(jīng)調(diào)查了解，自2014年10月26日至11月20日，先后有16只羔羊發(fā)病，發(fā)病率為14.3%；死亡9只，病死率為56.3%。除零星發(fā)病外，其發(fā)病特點(diǎn)是日齡長、膘情好、體格大的羔羊先發(fā)病，而日齡短、膘情差、體格小的羔羊則后發(fā)病。

2.臨床檢查結(jié)果。對最先發(fā)病的兩只羔羊檢查體溫、脈搏及呼吸數(shù)的變化，見表1。

這兩只患病羔羊臨床表現(xiàn)精神沉郁，尤以59號羔羊更為明顯，可視黏膜蒼白、黃染，俯臥站立虛弱，走路搖晃，呼吸頻數(shù)，觸診背部、臀部肌肉有痛感。食欲廢絕，口渴，飲水增加，反芻停止，瘤胃蠕動(dòng)音極弱。尿液呈暗紅色，后轉(zhuǎn)黑褐色。聽診心跳加快，有雜音。

表2 59號病羔羊血常規(guī)檢查結(jié)果

表3 59號病羔羊和5只采食高銅飼料臨床健康羔羊的血清銅測定結(jié)果

經(jīng)臨床檢查了解，其余發(fā)病14只羔羊，癥狀表現(xiàn)與上述2只羔羊基本相似。體溫達(dá)40.0～40.3℃、心律120次/分鐘以上、呼吸36次/分鐘以上，精神不振，食欲減損。一旦出現(xiàn)血尿，體溫很快降至正常體溫，脈搏弱而快，呼吸微弱而急促，精神高度沉郁，食欲廢絕，過度口渴，并伴有血紅蛋白尿、貧血和黃疸等，羔羊病程1～3天，因衰竭致死。

3.剖檢病理學(xué)檢查結(jié)果。

（1）剖檢病變。解剖5只病死羊，皮膚外觀貧血，眼結(jié)膜、口腔黏膜蒼白；血液稀薄似水；腹腔有淡黃色積液（4只）。機(jī)體漿膜均呈黃色（5只）；大動(dòng)脈血呈黑褐色（5只），心包積液黃色（3只），心外膜點(diǎn)狀出血（3只），心肌似煮肉樣、易碎（2只）；5只病羊肝臟腫大，質(zhì)地脆，呈黃褐色（似銅錢狀），切面外觀模糊，膽囊腫大、膽汁充盈濃稠深綠色；脾臟似泥，暗黑色，腫脹邊緣鈍圓；腎臟腫大（5只），外觀呈黑綠色，表面凸凹不平；膀胱積尿呈黑褐色，靜置無沉淀物出現(xiàn)。

（2）病理切片觀察結(jié)果。肝小葉結(jié)構(gòu)不清，肝小葉渾濁，肝細(xì)胞呈彌漫狀壞死，見有殘存的肝細(xì)胞核濃縮，胞漿伊紅濃染；腎小管上皮細(xì)胞變性壞死，許多腎小管結(jié)構(gòu)混亂。

根據(jù)眼觀和顯微鏡下的病理變化初步確診為羔羊患有慢性中毒性疾病。

4.實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)結(jié)果。

（1）病羊血液常規(guī)檢查結(jié)果。通過對59號病羔羊治療前、后分別從頸靜脈采血，進(jìn)行血紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，測血紅蛋白量，血液常規(guī)檢查，結(jié)果見表2。

由表2可見，59號病羔羊，發(fā)病后血紅蛋白量和紅細(xì)胞數(shù)均大幅度降低，可分別由正常的90～150克/升和9×1012～15×1012/升下降到30克/升和2.6×1012/升，指示該羔羊嚴(yán)重貧血。治療后略有回升，但依然極度貧血。

（2）血清銅測定結(jié)果。應(yīng)用原子吸收法，對59號病羔羊和5只采食高銅飼料臨床健康羔羊的血清銅進(jìn)行測定，結(jié)果見表3。結(jié)論是5只患病羔羊和該場正在采食高銅飼料臨床假性健康羔羊，血銅含量均較正常值高，即由正常的18.06微摩爾/升上升到23.86微摩爾/升，其中臨床發(fā)病羔羊與采食高銅飼料臨床健康羔羊血銅含量差異不顯著（P＞ 0.05），而采食高銅飼料臨床健康羔羊與非發(fā)病牧場的健康羊血銅含量差異顯著（P＜0.05）。

需要說明的是59號病羔羊血銅測定是在治療后第8天采血檢查的，采食高銅飼料臨床健康羔羊血銅測定和肝功能檢查都是在停喂高銅飼料后第8天采血檢查的。

（3）附紅細(xì)胞體和羊焦蟲檢查結(jié)果。血液中未見附紅細(xì)胞體和焦蟲蟲體。

5.人工飼喂試驗(yàn)結(jié)果。飼喂豬顆粒料的3只羔羊全部發(fā)病死亡，臨床癥狀和病理變化與該場自然病死羔羊相似。對照羔羊發(fā)育健康良好。

三、討論

1.羊?qū)︺~的吸收及其中毒機(jī)理。銅是動(dòng)物體內(nèi)必需的微量元素之一，參與動(dòng)物的造血、骨骼發(fā)育、血管彈性、被毛生長和繁殖等功能，是必不可少的物質(zhì)。然而，過量攝入的銅會(huì)對動(dòng)物產(chǎn)生毒害作用。羊?qū)︺~需求量和其毒性的耐受力遠(yuǎn)比豬差。豬的耐受力是羊的十幾倍，羊喂豬料極易中毒。同時(shí)大劑量的攝取銅會(huì)影響鉬、硫、鈣、鋅等元素的吸收，反之能解銅中毒。高濃度銅在血漿中可以直接與紅細(xì)胞表面蛋白質(zhì)作用，引起紅細(xì)胞膜變形、溶血。

銅與金屬硫蛋白（MT）結(jié)合為細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的銅提供了一個(gè)暫時(shí)的儲存場所，也阻止了銅形成自由的金屬離子。銅未與MT結(jié)合時(shí)能生成羥自由基。因?yàn)镸T對這些自由基呈高反應(yīng)性，所以它的增加被認(rèn)為是對銅誘導(dǎo)細(xì)胞毒性起到保護(hù)作用。由于綿羊沒有發(fā)達(dá)的控制銅吸收機(jī)制，所以肝銅蓄積比其他動(dòng)物容易發(fā)生，且時(shí)間較長，數(shù)周甚至一年都不表現(xiàn)出臨床癥狀，隨后肝銅蓄積達(dá)到極限突然釋放入血，表現(xiàn)出毒性。長期攝入不必要的銅，將會(huì)促使慢性銅中毒（CCP）的發(fā)生。當(dāng)肝臟不能貯存過量的銅或不能保持其所貯存的銅時(shí)，CCP的發(fā)生就有所增加。

肝臟是體內(nèi)貯存銅的主要器官，動(dòng)物長期攝入過量銅，吸收后在肝臟大量貯存而發(fā)生慢性中毒，大量銅可集聚在肝細(xì)胞核、線粒體及細(xì)胞漿內(nèi)，使亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)損傷。在溶血危象發(fā)生前幾周出現(xiàn)肝功能異常，天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、精氨酸酶等活性升高，當(dāng)肝內(nèi)銅積累到一定程度，在某些誘因作用下，肝細(xì)胞內(nèi)銅迅速釋放入血，血漿銅濃度大幅升高，導(dǎo)致紅細(xì)胞變性，溶血，羊只體況迅速惡化并死亡。腎臟是銅貯存和排泄的器官，溶血危象出現(xiàn)后，產(chǎn)生腎小管壞死和腎功能衰竭。

2.銅慢性中毒的診斷及治療。主要診斷依據(jù)是肝銅、腎銅和血銅水平升高，綿羊肝銅>500毫克/千克，腎銅>80～100毫克/千克（干重）；血清AST、SDH等酶活性在溶血危象發(fā)作前6周即明顯升高；羊飼草的含銅量超過10毫克/千克，而鉬含量低于1毫克/千克時(shí)就會(huì)中毒。通過該病例分析，仔豬551飼料中銅的含量明顯高于羊的正常攝入量，在飼料中又沒有添加相應(yīng)的鉬、鋅、硫等元素來抑制銅的吸收及中和銅的中毒，所以造成很大經(jīng)濟(jì)損失。經(jīng)過采用中藥補(bǔ)氣養(yǎng)血護(hù)肝組方，結(jié)合補(bǔ)充鉬等方法取得明顯治療功效。

四、結(jié)論

該場羔羊銅中毒的發(fā)生，是由于管理者不了解羊只對銅的吸收和貯存、轉(zhuǎn)化的作用機(jī)理，對于科學(xué)養(yǎng)羊知識掌握不足造成。應(yīng)該加強(qiáng)飼養(yǎng)者的養(yǎng)殖理論知識的學(xué)習(xí)，避免類似情況再次發(fā)生，造成不必要的經(jīng)濟(jì)損失。