鵝細(xì)小病毒病的流行、診斷和預(yù)防

隋欣

摘要：鵝細(xì)小病毒病也稱為代爾塞病、鵝肝炎、小鵝瘟，是雛鵝和雛番鴨的一種高度接觸性、致死性疾病。在歐洲和遠(yuǎn)東的主要養(yǎng)鵝國家都有鵝細(xì)小病毒病的報(bào)道。依據(jù)特征性的臨床過程、發(fā)病日齡、大體病變和組織學(xué)病變，可初診。確診需經(jīng)過實(shí)驗(yàn)性的病毒分離。活苗和油乳劑滅活苗用于預(yù)防該病。

關(guān)鍵詞：鵝;細(xì)小病毒病;流行;臨床表現(xiàn);病理變化;診斷;鑒別;預(yù)防

中圖分類號(hào)：$858.33 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：2095-9737（2020）06-0112-02

1病原

鵝細(xì)小病毒是細(xì)小病毒科的一個(gè)成員，最近被證明與人依賴病毒屬相關(guān)。鵝細(xì)小病毒，除與番鴨細(xì)小病毒具有密切關(guān)系之外，與其他禽類或哺乳動(dòng)物細(xì)小病毒無相似性。原發(fā)感染后，病毒主要在腸壁復(fù)制，在經(jīng)過短暫的病毒血癥后，進(jìn)入心臟、肝臟和其他器官。

2傳播與流行

感染禽經(jīng)糞便排出大量病毒，直接或間接傳播造成發(fā)病。疾病暴發(fā)通常開始于感染種鵝經(jīng)蛋傳播給易感雛鵝。有證據(jù)表明，亞臨床感染的老齡鵝可能是病原攜帶者。在之前無該病的國家或地區(qū)出現(xiàn)鵝細(xì)小病毒病暴發(fā)時(shí)，感染種蛋通常是病毒的來源。血清學(xué)證據(jù)表明，歐洲的多種野鵝都存在有該病毒。尚未發(fā)現(xiàn)其他禽類帶毒者或生物帶毒者。

3臨床表現(xiàn)

根據(jù)日齡的不同，易感雛鵝和雛鴨的臨床癥狀差異較大。1周齡之內(nèi)的禽，病程發(fā)展快，伴隨有厭食，在2～5天內(nèi)出現(xiàn)死亡。孵化室感染的雛禽，死亡率可達(dá)100%。日齡稍大的禽，病程較長，特征是鼻腔和眼有分泌物，出現(xiàn)腹瀉，虛弱。眼瞼和尾脂腺紅腫。急性期幸存的雛禽表現(xiàn)有生長遲緩，羽毛脫落，皮膚發(fā)紅，特別是背部皮膚。由于腹腔積液，雛禽常以企鵝狀姿勢(shì)站立。病毒對(duì)2～4周齡雛禽的致死率可達(dá)10%，但發(fā)病率可能更高。盡管成年禽可產(chǎn)生免疫應(yīng)答，但是不表現(xiàn)任何臨床癥狀。

4病理變化

大體病變有舌頭和口腔覆蓋有纖維蛋白性假膜、肝周炎、心包炎、肺水腫、肝營養(yǎng)不良和卡他性腸炎。急性病例，心臟呈現(xiàn)特征性的心尖變圓，心肌蒼白。顯微病變主要是心肌細(xì)胞的明顯變性，在感染的細(xì)胞核內(nèi)形成考德里A型包涵體。

5診斷

依據(jù)特征性的臨床過程、發(fā)病日齡、大體病變和組織學(xué)病變，可作出初步診斷。確診可使用來自易感鵝和番鴨的細(xì)胞培養(yǎng)物或胚胎進(jìn)行病毒分離。通過電鏡檢查感染的細(xì)胞培養(yǎng)物，使用特異性鵝細(xì)小病毒抗血清進(jìn)行中和試驗(yàn)，都可用來確定細(xì)小病毒的存在。使用免疫熒光和PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）方法，直接檢測(cè)感染禽組織中的抗原或病毒，也可確診該病。用于鵝細(xì)小病毒的血清學(xué)檢測(cè)方法，包括病毒中和試驗(yàn)、瓊脂凝膠沉淀試驗(yàn)和酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定。

現(xiàn)介紹常用的實(shí)驗(yàn)診斷方法一瓊脂免疫擴(kuò)散試驗(yàn)。

檢材的處理。血清：以0.01%的量加入硫柳汞，于4℃保存。鵝卵：吸取卵黃液20mL于鹽水瓶中，加入等量的生理鹽水充分振蕩均勻，再加入20mL氯仿振蕩30min。以3500r/min離心30min。取上清液約20mL裝入透析袋內(nèi)，置40%聚乙二醇中濃縮6～12h至1～2mL，吸出濃縮液。再用等量的生理鹽水清洗透析袋，吸出合并于濃縮液中，控制最終濃縮倍數(shù)為5倍。最后以3500r/min離心30min，取上清液按0.01%量加入硫柳汞，凍結(jié)保存。

瓊脂平板制備。取瓊脂粉1g，加入CaCl20.2g，99mL生理鹽水，1%硫柳汞1mL，水浴煮沸融化。待冷至45～50℃，取瓊脂液5mL，平鋪于水平放置的潔凈載玻片（75mm×25mm）上，靜置凝固后使用。

檢驗(yàn)方法。打孔：用直徑為5mm的金屬打孔器在瓊脂板上打孔，作成7孔1組的梅花圓形孔（外周6孔，中間1孔）。孔徑為5mm，孔間距4mm。用針尖挑出孔中的瓊脂。加樣：中心孔加抗原，外周第1、4孔加標(biāo)準(zhǔn)陽性血清，第2、3、5、6孔分別加被檢血清（或卵黃液）。每孔加滿以不溢出為度。靜置10min，放入濕盒，15～37℃反應(yīng)。于24h進(jìn)行第一次觀察，48h作第二次觀察，72h作最后觀察。

結(jié)果判定。若標(biāo)準(zhǔn)陽性血清孔與抗原孔之間應(yīng)出現(xiàn)一條清晰的白色沉淀線，則試驗(yàn)成立。若沒有沉淀線或沉淀線不明顯，則試驗(yàn)應(yīng)重做。①陰性反應(yīng)：被檢血清孔與抗原孔之間不出現(xiàn)沉淀線，標(biāo)準(zhǔn)陽性血清孔與抗原孔之間的沉淀線直伸延到被檢血清孔邊緣無彎曲者。②可疑反應(yīng)：被檢血清孔與抗原孔之間不形成沉淀線，鄰近的標(biāo)準(zhǔn)陽性血清孔與抗原孔之間的沉淀線末端偏向被檢血清孔的內(nèi)側(cè)彎曲。③陽性反應(yīng)：被檢血清孔與抗原孔之間出現(xiàn)明顯、清晰的白色沉淀線，并與標(biāo)準(zhǔn)陽性血清孔的沉淀線末端相融合。

6鑒別

雖然鵝細(xì)小病毒引起鵝和番鴨發(fā)病，但是番鴨也感染另外一種抗原性相關(guān)的細(xì)小病毒。這種病毒可引起番鴨出現(xiàn)嚴(yán)重的疾病，但不能造成鵝發(fā)病，可使用分子生物學(xué)方法進(jìn)行檢測(cè)和鑒別。鑒別診斷也應(yīng)包括鴨病毒性腸炎，該病可感染各種水禽。鴨病毒性肝炎是雛鴨的一種致死性疾病，但不會(huì)引起鵝和番鴨發(fā)病。鴨疫里默氏桿菌和多殺性巴氏桿菌也可引起雛鵝和番鴨出現(xiàn)高死亡率，但是可通過細(xì)菌分離和鑒定進(jìn)行鑒別。

7預(yù)防

孵化的種蛋必須來源于已確認(rèn)無鵝細(xì)小病毒的鵝群，很多暴發(fā)都是由于將不同來源種蛋同時(shí)孵化引起的。只從確保無鵝細(xì)小病毒病的國家進(jìn)口種蛋。疫病暴發(fā)后存活的鵝不能作為種用?；蠲绾陀腿閯缁蠲缍伎墒褂茫⒁褟V泛應(yīng)用于疾病流行的國家。對(duì)種群進(jìn)行免疫接種，可使其子代獲得高水平的母源抗體。