應用超高效液相色譜－串聯(lián)質(zhì)譜法快速準確地測定食品中三氯蔗糖含量

姜云

一、實驗部分

1.儀器與試劑。Acquity UPLC-Quattro Premier XETM質(zhì)譜聯(lián)用儀；電子天平；高速冷凍離心機為Sigma3-18K型SIR漩渦混合器；HLB固相萃取小柱（3mL/60mg）等。主要的試劑包括甲醇、三氯蔗糖對照物質(zhì)等。

2.標準溶液的配制。精確稱取三氯蔗糖對照品10mg，用甲醇溶解并定容至10mL；配置1.0g/L的標準儲備液，通過甲醇-水（體積比45∶55）逐步進行稀釋，確保濃度符合標準工作液要求。

3.樣品前處理。（1）均勻適量地稱取酒類樣品，準確加入甲醇-水15mL，旋渦混合1min，超聲提取15min，冷凍離心設置成10000r/min，離心10min，利用有機濾膜（0.22μm）過濾上清液，然后利用儀器進行測定。（2）均勻適量地稱取乳飲料、乳制品以及果蔬汁等樣品，加入超純水15mL，旋渦混合1min，超聲提取15min，冷凍離心設置成10000r/min，離心10min，將上清液全部取出，過Oasis HLB小柱，并通過超純水（3mL）淋洗上樣，將淋洗液全部棄除，通過真空條件進行2min的HLB柱抽干。洗脫環(huán)節(jié)選擇甲醇4.5mL，在洗脫液中加入超純水5.5mL，混勻后通過有機濾膜（0.22μm）進行過濾，然后利用儀器進行測定。（3）均勻適量地稱取冰淇淋、面包、炒貨、堅果類樣品，加入超純水15mL，旋渦混合1min，超聲提取15min，加入濃度為0.5mol/L的氧化鈉溶液1mL，漩渦混勻后加入濃度為0.42mol/L的硫酸鋅溶液1.5mL，充分混勻后加入濃度為0.5mol/L的氫氧化鈉溶液1.5mL，漩渦混勻，放置靜置。冷凍離心設置成10000r/min，離心10min，將上清液全部取出，通過甲醇進行稀釋，使其達到試驗樣品中甲醇和水的體積比45∶55，選擇有機濾膜（0.22μm）過濾之后進行儀器測試。

二、結果與討論

1.方法的線性范圍與檢出限。通過空白樣品提取并配制五個不同濃度的標準工作液，在優(yōu)化條件下進行測定，進樣量5μL，獲取質(zhì)量色譜圖，以基質(zhì)匹配標準工作液中三氯蔗糖的質(zhì)量濃度（X，μg/L）為橫坐標，以定量離子對的峰面積（Y）為縱坐標繪制標準曲線，回歸方程Y=1897.7X-2.22，r=0.9998。結果發(fā)現(xiàn)，線性關系較好的范圍是0.2mg/L-20mg/L。依據(jù)定量離子對和定性離子對的峰面積比值，將0.4mg/kg的三氯蔗糖加入到空白樣品后，信噪比S/N為20.15，所以定量下限便以此濃度進行設定。通過這種方法測定食品內(nèi)三氯蔗糖含量，具有較高的靈敏度。

2.方法的回收率與精密度。選擇沒有目標分析物的樣品，開展加標回收率及精密度試驗。將各種濃度的標準物質(zhì)加入樣品后，放置0.5h，讓樣品均勻吸收標準物質(zhì)，利用此法開展提取、凈化以及測定，回收率和精密度結果見表1。從表1可見，在0.4mg/kg、4mg/kg、10mg/kg的加標水平下，回收率為85%-98%，相對標準偏差處于1.7%-5.0%。試驗表明，該方法具有非常穩(wěn)定的回收率，完全可以進行實際樣品測定。