奶茶中甜蜜素含量的測定方法探討

王漢青

（南京市溧水區(qū)疾病預防控制中心 江蘇 南京 211200）

甜蜜素是一種食品添加劑，國家對它制定了嚴格的限量使用標準[1]，超量使用會對人體肝臟，腎臟造成傷害[2]，尤其是老年人和兒童比較敏感。奶茶是現(xiàn)在都市比較風糜的飲料，尤其受到年輕人的喜愛，市面上品牌眾多，同一品牌也有各種不同風味。有些不法商家為改善產品口味，降低產品成本，違規(guī)大量添加，損害了消費者的利益。國務院食品安全委員會也對市場的奶茶作了監(jiān)測任務，我中心為了順利完成省里布置的任務，用氣相色譜法[3,4]建立一種快速檢測奶茶中甜蜜素的測定[5，6]方法，滿足工作中的檢測要求。

1.材料與方法

1.1 儀器

7890B氣相色譜儀[附HP-5毛細管柱（30m×0.32mm×0.25mm）、氫火焰離子化檢測器(flame ion-ization detector,FID)]：美國安捷倫科技有限公司；G4513A自動進樣器：美國安捷倫科技有限公司；Vortex-1渦旋混合器：上海滬析實業(yè)有限公司；UP500HE超聲波振蕩器：南京壘君達超聲電子設備有限公司；TDZ5-WS離心機：湖南赫西儀器裝備有限公司；MS105DU電子天平：梅特利-托利多；SC-230冷藏冰箱：青島澳柯瑪股份有限公司

1.2 試劑

1.2.1 甜蜜素標準溶液[GBW(E)082260a,濃度為10.0mg/mL]

1.2.2 氯化鈉（分析純）

1.2.3 亞硝酸鈉（50g/L）（分析純）

1.2.4 硫酸（200g/L）（分析純）

1.2.5 正庚烷（分析純）

1.2.6 亞鐵氰化鉀（150g/L）（分析純）

1.2.7 硫酸鋅（300g/L）（分析純）

1.3 樣品及標準液系列的制備及衍生化

1.3.1 樣品制備：稱取樣品3.00～5.00g于50mL離心管中，加30mL水，超聲提取20min,加2mL亞鐵氰化鉀溶液，混勻，再加入2mL硫酸鋅溶液，混勻，離心（3000r/min）10min,過濾，用水分次洗滌殘渣，收集濾液并定容至50mL，混勻備用。

1.3.2 標液配制：準確移取1.00mg/mL環(huán)己基氨基磺酸標準液0.50mL、1.00mL、2.5mL、5.00mL、10.00mL于50mL容量瓶中，加水定容。配成標準溶液系列濃度為：0.01mg/mL、0.02mg/mL、0.05mg/mL、0.10mg/mL、0.20mg/mL。

1.3.3 衍生化：準確移取標準溶液系列點，制備好的樣品各10.0mL于50mL帶蓋離心管中。離心管置試管架上冰浴中5min后，準確加入5.00mL正庚烷，加入2.5mL亞硝酸鈉溶液，2.5mL硫酸溶液，蓋緊離心管蓋，搖勻，在冰浴中放置30min,期間振搖3次～5次；加入2.5克氯化鈉，蓋上蓋后置旋渦混合器上振動1min,離心（3000r/min）10min，放入1～4℃冰箱靜置20min后分層備用。

1.3色譜條件

1.3.1 柱溫升溫程序：初溫50℃保持4min，10℃/min升溫至90℃保持0.5min，20℃/min升溫至200℃保持3min。

1.3.2 進樣口：溫度230℃；進樣量2uL，分流比1：1。

1.3.3 檢測器：氫火焰離子化檢測器（FID），溫度260℃。

1.3.4 載氣：高純氮氣，流量3mL/min。

1.3.5 氫氣：30mL/min；空氣300mL/min。

2.結果與分析

2.1 標準曲線繪制

分別吸取2μL經衍生化處理的標準系列各濃度溶液上清液，注入氣相色譜儀中，可測得不同濃度被測物的響應值峰面積，以濃度為橫坐標，以環(huán)己醇亞硝酸酯峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，其回規(guī)方程為y=10813.04x+3.325 R=0.99991，見圖1。

2.2 樣品溶液測定

在完全相同的條件下進樣2μL經衍生化處理的試樣待測液上清液，保留時間定性，根據測得峰面積，由標準曲線得到樣液中的組分濃度。試樣上清液響應值若超出線性范圍，應用正庚烷稀釋后再進。平行測定次數(shù)不少于兩次。

2.3 加標實驗

準確稱取奶茶樣品5.00g于50mL離心管中，準確添加環(huán)己基氨基磺酸標準使用液（1.00mg/mL）各1.0mL、2.5mL，得到兩種濃度分別為0.200g/kg、0.500g/kg，各加標濃度平行6份，同時測定樣品本底,結果表。

表 樣品加標回收結果

2.4 回收率和精密度

由表1中可看出在樣品中加入兩個濃度水平的加標樣，每個水平平行測定6次，計算出平均回收率96.5%～102.9%，RSD分別為1.92%和1.33%，符合實驗室質量控制要求。

3.結論

通過多次調整改進色譜條件，即色譜柱溫的升溫程序，進樣量，分流比，載氣流速等，使得環(huán)己醇亞硝酸脂與相近雜峰有了很好的分離度和靈敏度，通過加標實驗驗證，得到本方法有了很好的準確度和精密度，滿足了食品風險監(jiān)測對奶茶中甜蜜素含量測定的方法要求。