SMART300全自動化學(xué)發(fā)光分析儀檢測N-末端腦鈉肽前體（NT-proBNP）的性能評價

張 瑋，黃學(xué)強

（1.寧夏醫(yī)科大學(xué)，寧夏 銀川 750004；2.寧夏紅寺堡區(qū)人民醫(yī)院，寧夏 吳忠 751999）

科斯麥SMART300全自動化學(xué)發(fā)光分析儀將具有高靈敏度的化學(xué)發(fā)光測定技術(shù)與高特異性的免疫反應(yīng)相結(jié)合[1]，通過對化學(xué)發(fā)光免疫反應(yīng)產(chǎn)生的光子進行計數(shù)分析處理，從而對各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等進行檢測分析[1-2]。我們根據(jù)《醫(yī)療機構(gòu)臨床實驗室管理辦法》和《醫(yī)學(xué)實驗室質(zhì)量和能力認可準(zhǔn)則》（ISO15189:2012）的要求，結(jié)合實際工作環(huán)境，對重慶科斯麥SMART300的重復(fù)精密度、期間精密度、正確度、線性范圍（可報告范圍）、參考區(qū)間進行驗證和評價[3-4]。為實驗室自動免疫定量檢測系統(tǒng)的專業(yè)化技術(shù)評價提供必要的實驗數(shù)據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

（1）重慶科斯麥SMART300全自動化學(xué)發(fā)光儀，科大創(chuàng)新SC-3614型普通離心機，N-末端腦鈉肽前體（NTproBNP）檢測試劑盒（武漢明德生物科技股份有限公司），試劑批號A18120101（使用期限至2019年12月），M6U1516、M6U1516復(fù)合質(zhì)控品。

（2）標(biāo)本來源：明德質(zhì)控LEVEL1、LEVEL3水平,明德廠家指定的CaL1、CaL2定標(biāo)液；2018年12月健康體檢者血清標(biāo)本20例（年齡＜70歲）。

1.2 方法

參照美國臨床和實驗室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會（CLSI）的要求，嚴格按照儀器的操作規(guī)程和試劑說明書操作，在室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果允許范圍內(nèi)對標(biāo)本進行檢測[5]。同時，按本實驗室標(biāo)準(zhǔn)操作（SOP）對科斯麥SMART300全自動化學(xué)發(fā)光分析儀進行每日保養(yǎng)，質(zhì)控結(jié)果在可受控、檢測系統(tǒng)處于優(yōu)良的條件下，進行操作。

1.2.1 精密度試驗

1.2.1.1 重復(fù)精密度：在條件穩(wěn)定的情況下，按常規(guī)程序在2 h內(nèi)完成對高低兩個濃度的質(zhì)控

標(biāo)本分別連續(xù)進行10次的重復(fù)檢測，判斷這10個獨立結(jié)果間的一致程度。計算其結(jié)果重復(fù)

精密度的CV值和SD值，得到重復(fù)性精密度。

1.2.1.2 期間精密度：在條件穩(wěn)定的情況下，按常規(guī)程序在2h內(nèi)完成對高低兩個濃度的質(zhì)控

標(biāo)本分別連續(xù)5天對明德質(zhì)控LEVEL1、LEVEL3水平各檢測2次，記錄檢測結(jié)果，判斷這

10個獨立結(jié)果間的一致程度。計算其結(jié)果期間精密度的CV值和SD值，得到重復(fù)性精密度。

1.2.2 正確度驗證評價

儀器測試結(jié)果與接受參考值之間的一致程度，采用定標(biāo)液CaL1、CaL2的標(biāo)本作為驗證標(biāo)本，通過計算實驗室檢測數(shù)據(jù)的偏倚從而評價和驗證實驗室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1.2.3 生物參考區(qū)間驗證

選擇20份體檢合格的健康人作為驗證標(biāo)本，在科斯麥SMART300檢測系統(tǒng)上進行測定，對檢測結(jié)果進行整理分析并與廠家提供的參考區(qū)間進行對比，如果這20份標(biāo)本中不超過2例的觀察值在原始報告的區(qū)間之外，說明廠家提供的參考區(qū)間的實驗報告可接受。本實驗說明書的參考區(qū)間為0-117pg/ml。

1.2.4 線性測量范圍驗證

用于驗證線性范圍的標(biāo)本類型應(yīng)與臨床測試所用的標(biāo)本類型相同或相類似，所有標(biāo)本應(yīng)不含廠家所標(biāo)定的干擾因素（如溶血、黃疸、脂血等）。選取一份低值及高值血清標(biāo)本（盡量靠近試劑說明書的線性高低值），將H 和L樣品按：5L、4L+IH、3L+2H、2L+3H、lL+4H、5H 關(guān)系各自配制混合，形成系列評價樣品，每個濃度重復(fù)測定3次，將所得各濃度均值進行線性回歸分析，得出測量值與預(yù)測值是否呈線性關(guān)系線性關(guān)系。從而保證該濃度范圍檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1.2.5 結(jié)果判斷方式

＜1/4TEa

2 結(jié) 果

2.1 精密度驗證

結(jié)果血清SMART300的LEVEL1低濃度批內(nèi)CV3.28%，期間CV3.61%，LEVEL2高濃度批內(nèi)CV3.03%，期間CV2.63%；各項目實際CV＜1/4自治區(qū)臨檢中心TEa的要求，并且均低于廠家聲明的CV，說明精密度驗證通過。結(jié)果見表1、2。

表1 批內(nèi)精密度驗證結(jié)果

表2 期間精密度驗證結(jié)果

2.2 正確度驗證結(jié)果

檢測的廠家提供的2份樣本，計算實測值的各項目定標(biāo)液CaL1、CaL2的偏倚，與偏倚范圍相比較，來判斷偏倚是否可以接受，≤1/2自治區(qū)臨檢中心允許總誤差（TEa）。結(jié)果在要求范圍內(nèi)，表面準(zhǔn)確度通過，詳見表3。

表3 正確度驗證結(jié)果

2.3 參考區(qū)間驗證

最終我們檢測20個標(biāo)本的檢測結(jié)果均在驗證區(qū)間＜0.5mlU/ml內(nèi)，在廠家聲明的參考區(qū)間之外的結(jié)果均為0，故本實驗室參考區(qū)間驗證通過。詳見表4。

表4 參考區(qū)間驗證結(jié)果

2.4 線性測量范圍驗證

參照線性范圍的要求，驗證結(jié)果的斜率a值在1±0.05范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)R2≥0.995，線性范圍驗證通過。詳見表5。

表5 線性范圍驗證結(jié)果

3 討 論

根據(jù)ISO15189:2012的相關(guān)要求，儀器設(shè)備項目在應(yīng)用于臨床之前，都需要對其檢驗方法和相關(guān)程序進行分析性能驗證，內(nèi)容應(yīng)包括精密度、正確度、線性范圍和參考區(qū)間。我院在2017年引進一臺科斯麥SMART300全自動免疫分析儀，NT-proBNP的開展為臨床醫(yī)生提供了心功能診斷價值、心臟預(yù)后的評估價值、AHFCHFLVD治療等方面發(fā)揮重要價值，由于廠家的性能參數(shù)是在其合適的環(huán)境下測定得到的與我實驗室實際的外部條件存在一定的差異[6,7]，因此，本實驗室在使用科斯麥SMART300 日常檢測前必須要對其分析性能進行驗證和評價。

精密度是指在規(guī)定的條件下，重復(fù)檢測樣本的結(jié)果一致程度，主要評價儀器的重復(fù)性，是檢測系統(tǒng)的基本分析性能指標(biāo)之一。通過檢測結(jié)果分析比對，科斯麥SMART300分析儀檢測 NT-proBNP 批內(nèi)和批間精密度（CV%）均低于廠商要求（10% 和 12%）；說明該儀器檢測的重復(fù)性好。計算實測值的項目定標(biāo)液CaL1、CaL2的偏倚，檢測結(jié)果與靶值的相對偏倚為0.1%～1.02%；線性范圍驗證結(jié)果表明 NT-proBNP 測量值與預(yù)期值的相關(guān)系數(shù)R2≥0.990，該項目所涉及的濃度范圍內(nèi)（0-29450pg/ml）是線性關(guān)系，兩者相關(guān)性很好，復(fù)合臨床預(yù)期要求。收集20例正常健康人血清標(biāo)本及時檢測，要求其年齡，性別等均勻分布，對參考范圍進行驗證，SMART300分析儀測定其NT-proBNP 的數(shù)值都是＜117pg／ml，參考區(qū)間與廠家聲明一致。

綜上所述，本 實驗對科斯麥SMART300全自動免疫分析儀檢測血清NT-proBNP的精密度、正確度、線性范圍和參考區(qū)間進行驗證和評價。各項結(jié)果與廠家聲明的分析性能基本一致。能夠為實驗室自動免疫定量檢測系統(tǒng)的專業(yè)化技術(shù)評價提供實驗數(shù)據(jù)。