復(fù)合益生菌發(fā)酵棉源飼料對(duì)新疆阿瓦提羔羊生長(zhǎng)性能及血清抗氧化指標(biāo)的影響

艾克拜爾·依明，賽福丁·阿不拉，陳 凱，艾米娜什·哈力別克，李 昊，尼加提·吾布力

（新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院，烏魯木齊 830052）

近年來(lái)，牧場(chǎng)飼養(yǎng)成本的限制，羊由放牧向舍飼養(yǎng)轉(zhuǎn)變，飼養(yǎng)方式日趨集約化和規(guī)?；?。目前舍飼養(yǎng)殖所采用的技術(shù)管理措施，不僅改變了羊長(zhǎng)期以來(lái)的生存環(huán)境，而且降低了羊抵抗氧化應(yīng)激和疾病的能力[1]。動(dòng)物高的生長(zhǎng)速度和營(yíng)養(yǎng)需求及高代謝率是自由基增加、氧化應(yīng)激和免疫功能下降的主要原因[2]。正常情況下，機(jī)體產(chǎn)生的自由基會(huì)在抗氧化系統(tǒng)的清除下處于相對(duì)平衡的狀態(tài)，但當(dāng)自由基的產(chǎn)生速率超過(guò)機(jī)體的清除能力時(shí)，機(jī)體抗氧化系統(tǒng)的平衡就會(huì)被破壞[3]。舍飼飼養(yǎng)方式下，由于集約化程度較高，羔羊的生長(zhǎng)代謝相對(duì)旺盛，容易產(chǎn)生大量不能及時(shí)清除的自由基而造成氧化應(yīng)激，引起脂質(zhì)和蛋白質(zhì)的損傷，破壞機(jī)體的平衡[4]。圈舍環(huán)境質(zhì)量差、飼養(yǎng)密度大等因素會(huì)引起羔羊氧化應(yīng)激，降低羔羊的生長(zhǎng)發(fā)育，破壞機(jī)體的免疫屏障[5]。雖然使用抗生素可以降低疾病的發(fā)生率，但副作用非常大，因此益生菌發(fā)酵飼料作為抗生素的替代品來(lái)提高動(dòng)物抗氧化及免疫功能已成為當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。黃靈等研究報(bào)道，虎龍斑基礎(chǔ)飼料中添加芽孢桿菌和光合細(xì)菌可使總抗氧化能力（TAOC）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過(guò)氧化氨酶（GSH-Px）活性顯著提高（P＜0.01），丙二醛（MDA）水平顯著降低（P＜0.05）[6]。徐俊杰試驗(yàn)結(jié)果表明，益生菌能夠顯著提高仔豬的抗氧化性能和腸道免疫功能[7]。本試驗(yàn)主要通過(guò)研究復(fù)合益生菌發(fā)酵棉源飼料對(duì)羔羊生長(zhǎng)性能和血清抗氧化能力的影響，初步探討復(fù)合益生菌發(fā)酵棉源飼料對(duì)育肥羔羊機(jī)體健康的影響，為推廣復(fù)合益生菌發(fā)酵棉源飼料提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

復(fù)合益生菌由新疆艾維拉農(nóng)業(yè)科技發(fā)展有限公司提供，發(fā)酵樣為新疆阿克蘇阿瓦提縣拜什艾日克鎮(zhèn)代熱亞博依村農(nóng)民家的棉花秸稈、棉籽殼、棉籽餅等棉源飼料。

1.3 發(fā)酵底物

棉花秸稈、棉籽殼或棉籽餅70%，麩皮15%，麥稈10%，玉米4%，紅糖0.4%，尿素0.2%，鹽0.1%，每種原料分別設(shè)1%、2%和3% 3 個(gè)復(fù)合益生菌添加水平，料水比1：0.6，將復(fù)合益生菌液按添加量接種到發(fā)酵底物，攪拌均勻后裝入發(fā)酵袋嚴(yán)格厭氧，溫度在30～35 ℃，發(fā)酵21 d。

1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

在新疆阿克蘇阿瓦提縣拜什艾日克鎮(zhèn)代熱亞博依村農(nóng)民家選擇羔羊進(jìn)行試驗(yàn)。選擇健康和發(fā)育良好的5 月齡阿瓦提縣雜交羔羊24 只，體重25.58±1.2 kg，隨機(jī)分成4組，分別為對(duì)照組和試驗(yàn)組，每組6只，試驗(yàn)組每種原料分別設(shè)1%、2%和3%3個(gè)復(fù)合益生菌添加水平，分為1%發(fā)酵組、2%發(fā)酵組、3%發(fā)酵組。試驗(yàn)期為60 d，預(yù)試期7 d。

1.5 飼養(yǎng)管理

采用圈養(yǎng)，試驗(yàn)期間每天飼喂2 次，自由采食，自由飲水。傳統(tǒng)方式飼喂對(duì)照組，經(jīng)過(guò)復(fù)合益生菌發(fā)酵棉源飼料飼喂實(shí)驗(yàn)組，即發(fā)酵后的棉花秸稈和棉籽殼為粗飼料，發(fā)酵后的棉籽餅為精飼料。發(fā)酵后的棉花秸稈、棉籽殼、棉籽餅飼喂羊的比例分別為1：1：0.53。

1.6 血清采集

復(fù)合益生菌發(fā)酵飼料飼喂的第15、30、45、60 天，對(duì)24 只羔羊進(jìn)行頸靜脈采血5～10 mL，標(biāo)記好，以3 500 r·min-1離心15 min，取血清3～5 mL放入離心管內(nèi)-20 ℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.7 指標(biāo)測(cè)定

1.7.1 生長(zhǎng)性能指標(biāo)的測(cè)定

在試驗(yàn)期間，提前斷料，分別于試驗(yàn)開(kāi)始與試驗(yàn)結(jié)束進(jìn)行稱重，記錄試驗(yàn)期間的育肥羔羊的增重情況。

1.7.2 血清抗氧化指標(biāo)的測(cè)定

主要包括GSH-Px、MDA、總超氧化物歧化酶（T-SOD）、T-AOC、CAT，采用比色法，試劑盒由武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司提供，測(cè)定儀器為UV1900 紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)（上海菁華科技儀器有限責(zé)任公司）。

1.8 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 處理，采用SPSS19.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，用One-way AVOVA 比較各組間的差異顯，采用Duncan's法進(jìn)行多重比較，試驗(yàn)結(jié)果用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 復(fù)合益生菌發(fā)酵棉源飼料對(duì)羔羊生長(zhǎng)性能的影響

復(fù)合益生菌發(fā)酵棉源飼料對(duì)羔羊生長(zhǎng)性能的影響見(jiàn)表1。異不顯著（P＞0.05）。

試驗(yàn)結(jié)果從表1 可看出，飼喂第60 天，2%發(fā)酵組與對(duì)照組之間有差異顯著（P＜0.05），與對(duì)照組相比，3%和1%發(fā)酵組羔羊體重雖有提高，但差

2.2 復(fù)合益生菌發(fā)酵棉源飼料對(duì)羔羊血清抗氧化能力的影響

復(fù)合益生菌發(fā)酵棉源飼料對(duì)羔羊血清抗氧化指標(biāo)MDA、T-AOC、CAT、T-SOD、GSH-Px 能力的影響見(jiàn)表2。

表1 復(fù)合益生菌發(fā)酵飼料對(duì)羔羊生長(zhǎng)性能的影響kg

表2 復(fù)合益生菌發(fā)酵棉源飼料對(duì)育肥羔羊血清抗氧化指標(biāo)的影響

由表2 可知，2%、3%發(fā)酵組與對(duì)照組相比血清中MDA 含量差異顯著（P＜0.05）；3%發(fā)酵組與對(duì)照組相比血清中T-AOC活力差異顯（P＜0.05），1%和2%發(fā)酵組與對(duì)照組相比血清中T-AOC 活力均有提高，但差異不顯著（P＞0.05）。2%發(fā)酵組與對(duì)照組相比血清中CAT活力差異極顯著（P＜0.01）；3個(gè)發(fā)酵組與對(duì)照組相比血清中的T-AOC差異不顯著（P＞0.05）；2%發(fā)酵組與對(duì)照組相比血清中GSH-Px活力差異顯著（P＜0.05），1%發(fā)酵組與對(duì)照組相比血清中GSHPx活力均有提高，但差異不顯著（P＞0.05）。

3 討 論

3.1 復(fù)合益生菌發(fā)酵棉源飼料對(duì)羔羊生長(zhǎng)性能的影響

棉源飼料來(lái)源豐富，產(chǎn)量高，成本低，含有多種營(yíng)養(yǎng)成分。棉源飼料經(jīng)過(guò)復(fù)合益生菌發(fā)酵后，可以提高飼料在動(dòng)物體內(nèi)的利用率，從而提高動(dòng)物的生長(zhǎng)性能。王婷研究結(jié)果表明，塔賓曲霉、巨大芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌作為復(fù)合菌劑用于發(fā)酵麥稈，可以提高綿羊的生產(chǎn)性能[8]。高飛用EM 菌發(fā)酵玉米秸稈、未發(fā)酵玉米秸稈、青玉米秸稈分別飼喂陜北白絨山羊，飼喂發(fā)酵玉米秸稈組日增重顯著高于其他組[9]。上述試驗(yàn)結(jié)果表明，通過(guò)發(fā)酵可以改變飼料中的粗飼料水平，可促進(jìn)反芻動(dòng)物唾液分泌與反芻，改變瘤胃微生物菌群并提高飼料利用效率[10]。劉瑞麗等研究報(bào)道，飼料經(jīng)過(guò)復(fù)合益生菌發(fā)酵之后，其對(duì)肥育豬的日增重均有增加趨勢(shì)，且超過(guò)了常規(guī)的玉米豆型日糧對(duì)照組[11]。本試驗(yàn)結(jié)果表明，飼喂第60 天，2%發(fā)酵組與對(duì)照組之間差異顯著（P＜0.05），與對(duì)照組相比，3%和1%發(fā)酵組羔羊體重均有提高，但差異不顯著（P＞0.05）；此外，經(jīng)過(guò)復(fù)合益生菌發(fā)酵的棉源飼料具有成本低、生產(chǎn)價(jià)值高、發(fā)酵工藝簡(jiǎn)易等優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)可以有效利用本地豐富的飼料資源，解決本地草畜不平衡的問(wèn)題。棉源飼料經(jīng)過(guò)復(fù)合益生菌發(fā)酵后質(zhì)地變得柔軟，并具有芳香味，可以提高飼料的適口性，增加羔羊的采食量。

3.2 復(fù)合益生菌發(fā)酵棉源飼料對(duì)羔羊血清抗氧化能力的影響

MDA 是反映細(xì)胞膜過(guò)氧化作用強(qiáng)弱的一個(gè)指標(biāo)，也是細(xì)胞膜脂質(zhì)過(guò)氧化終產(chǎn)物，其含量越高，表明機(jī)體受到的氧化損傷越強(qiáng)，可間接反映動(dòng)物細(xì)胞的損傷程度以及動(dòng)物機(jī)體的抗逆性，從而反映動(dòng)物機(jī)體的抗氧化能力。T-AOC 能體現(xiàn)機(jī)體抗氧化能力總水平的一項(xiàng)指標(biāo)，其含量與細(xì)胞的抗氧化能力呈正相關(guān)，能直接作用在自由基上或自由基的前體物上來(lái)阻止氧化應(yīng)激的形成[12]。抗氧化能力被認(rèn)為是血液和體液中所有抗氧化劑的累積效應(yīng)[13]。CAT 是生物防御系統(tǒng)中的關(guān)鍵酶之一，可以清除體內(nèi)過(guò)氧化氫，保護(hù)細(xì)胞免受H2O2侵害[14]。T-SOD 是生物體主要的酶抗氧化劑，是細(xì)胞避免氧化損傷的重要屏障，也是清除O2-的第一道防線[15]。GSH-Px 是一類抗氧化酶，通過(guò)還原谷胱甘肽（GSH）來(lái)還原過(guò)氧化氫物。

付曉政等研究表明，高劑量益生菌組血清過(guò)氧化氫酶水平則極顯著高于對(duì)照組（P＜0.01），丙二醛含量極顯著低于對(duì)照組（P＜0.01）[16]。田浪等研究表明，不同劑量的復(fù)合益生菌使黃羽肉雞血清中的T-AOC、T-SOD、CAT 的含量水平顯著提高（P＜0.05），其中，中劑量組和高劑量組的T-AOC、TSOD同時(shí)顯著高于低劑量組（P＜0.05），但兩組間差異不顯著[17]。徐秀景等研究報(bào)道，乳酸菌發(fā)酵飼糧顯著提高了生長(zhǎng)育肥豬血清的T-SOD、CAT、GSHPx 和T-AOC 能力，顯著降低血清MDA 含量（P＜0.05）[18]。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，棉源飼料經(jīng)過(guò)復(fù)合益生菌發(fā)酵后能夠顯著提高3%發(fā)酵組羔羊血清T-AOC 能力，2%發(fā)酵組羔羊血清CAT 活力和GSH-Px 活力。本試驗(yàn)結(jié)果跟前人研究結(jié)果一致。棉源飼料經(jīng)過(guò)復(fù)合益生菌發(fā)酵后能夠提高反芻動(dòng)物機(jī)體的抗氧化能力。

4 結(jié) 論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)合益生菌發(fā)酵棉源飼料能夠提高育肥羔羊生長(zhǎng)性能及對(duì)血清中的MDA、TAOC、CAT、T-SOD、GSH-Px 等抗氧化指標(biāo)有一定的促進(jìn)作用，提高育肥羔羊的抗氧化功能?？傮w來(lái)說(shuō)，2%復(fù)合益生菌發(fā)酵棉源飼料對(duì)育肥羔羊體重和抗氧化能力促進(jìn)作用最佳。