超聲異常胎兒產(chǎn)前遺傳學(xué)分析

師園園 劉學(xué)軍 劉慈

摘要：目的 ?通過(guò)515例超聲示胎兒異常產(chǎn)前遺傳學(xué)分析，探討妊娠期胎兒不同種類的結(jié)構(gòu)畸形及其與染色體異常的關(guān)系，為臨床提供更有價(jià)值的遺傳咨詢。方法 ?收集2017年1月～2019年4月因超聲提示胎兒異常于我院行胎兒染色體產(chǎn)前診斷的515例孕婦的臨床資料，均進(jìn)行染色體核型分析和染色體拷貝數(shù)變異檢測(cè)，統(tǒng)計(jì)各類胎兒異常情況及其在超聲異常項(xiàng)目中的核型異常數(shù)、拷貝數(shù)變異數(shù)、染色體異常率。結(jié)果 ?515例胎兒超聲軟指標(biāo)異常362例，占70.29%，其中鼻骨缺失或發(fā)育不良染色體異常率最高，占20.93%。胎兒超聲結(jié)構(gòu)異常153例，占29.71%，其中胎兒多發(fā)畸形染色體異常率最高，占50.00%，其次為心臟畸形，異常率為18.82%。胎兒染色體核型異常42例，檢出率8.16%，其中數(shù)目異常32例，結(jié)構(gòu)異常10例。染色體拷貝數(shù)變異57例，檢出率11.07%。結(jié)論 ?妊娠期超聲提示胎兒各類畸形及胎兒染色體異常率存在較大差異，分布無(wú)規(guī)律，在孕婦咨詢胎兒染色體異常風(fēng)險(xiǎn)率時(shí)，需要綜合考慮超聲所示胎兒結(jié)構(gòu)畸形及軟指標(biāo)的種類和數(shù)量，以提供更有價(jià)值的遺傳咨詢。

關(guān)鍵詞：超聲;胎兒異常;染色體;拷貝數(shù)變異

中圖分類號(hào)：R714.5;R445 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.11.052

文章編號(hào)：1006-1959（2020）11-0161-02

Abstract：Objective ?To study the abnormal prenatal genetic analysis of fetal abnormalities in 515 cases to explore the different types of structural abnormalities of fetuses during pregnancy and their relationship with chromosomal abnormalities， so as to provide more valuable genetic counseling for clinic.Methods ?Collecting clinical data of 515 pregnant women who underwent prenatal diagnosis of fetal chromosomes in our hospital due to ultrasound suggesting fetal abnormalities from January 2017 to April 2019， all got the chromosome karyotype analysis and chromosome copy number variation detection， statistics of various fetal abnormalities and their karyotype abnormalities， copy number variations， and chromosome abnormality rates in ultrasound abnormalities.Results ?Of the 515 cases of fetal ultrasound soft index abnormalities， 362 cases accounted for 70.29%， of which nasal bone loss or dysplasia had the highest rate of chromosome abnormalities， accounting for 20.93%. There were 153 fetal ultrasound structural abnormalities， accounting for 29.71%， of which the fetal multiple malformations had the highest chromosomal abnormality rate， accounting for 50.00%， followed by cardiac malformation， with an abnormal rate of 18.82%. There were 42 cases of fetal karyotype abnormalities， with a detection rate of 8.16%， including 32 cases with abnormalities and 10 cases with abnormal structures. There were 57 cases with chromosomal copy number variation， and the detection rate was 11.07%.Conclusion ?Ultrasound during pregnancy indicates that there are large differences in the rate of fetal malformations and fetal chromosomal abnormalities， and the distribution is irregular. When pregnant women consult the risk rate of fetal chromosomal abnormalities， it is necessary to comprehensively consider the type and number of fetal structural abnormalities and soft indicators shown by ultrasound to provide more valuable genetic counseling.

Key words：Ultrasound;Fetal abnormality;Chromosome;Copy number variation

隨著科學(xué)技術(shù)的快速發(fā)展，超聲檢查的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，其可以檢測(cè)出不同胎兒異常，包括結(jié)構(gòu)異常和微小異常，后者也被稱為超聲軟指標(biāo)[1，2]。胎兒超聲軟指標(biāo)包括胎兒頸后透明帶（NT）、頸后皮褶厚度（NF）、鼻骨缺失或鼻骨發(fā)育不良、側(cè)腦室增寬、后顱窩增寬、心內(nèi)強(qiáng)回聲、腸管強(qiáng)回聲、腎盂增寬、單臍動(dòng)脈、長(zhǎng)骨短、脈絡(luò)叢囊腫等。胎兒超聲異常中部分是由于染色體核型或基因組拷貝數(shù)變異（copy number variations，CNV）造成的[3]，需進(jìn)行胎兒染色體產(chǎn)前診斷，其作為有創(chuàng)性診斷，導(dǎo)致的流產(chǎn)率可達(dá)0.5%～1%[4]。孕婦及家屬更傾向于非侵入性檢查，而超聲具有及時(shí)、迅速、直觀、無(wú)創(chuàng)等特點(diǎn)，當(dāng)超聲提示胎兒不同異常時(shí)胎兒染色體異常率不同。本研究結(jié)合2017年1月～2019年4月我院515例因超聲示胎兒異常而行產(chǎn)前診斷孕婦的臨床資料，探討妊娠期胎兒不同種類的結(jié)構(gòu)畸形及其與染色體異常的關(guān)系，為臨床提供更有價(jià)值的遺傳咨詢

1對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象 ?收集2017年1月～2019年4月河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院515例因超聲提示胎兒異常行胎兒染色體產(chǎn)前診斷孕婦的臨床資料，孕婦年齡20～43歲，平均年齡30歲;孕周19～28周，平均孕周24周。所有孕婦均在知情同意的前提下行超聲引導(dǎo)下羊膜腔穿刺術(shù)，進(jìn)行染色體核型分析和染色體拷貝數(shù)變異檢測(cè)。

1.2方法

1.2.1羊膜腔穿刺術(shù) ?所有孕婦均在超聲引導(dǎo)下經(jīng)腹壁抽取羊水30 ml（20 ml用于羊水細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)胎兒染色體核型，10 ml用于高通量測(cè)序檢測(cè)胎兒染色體拷貝數(shù)變異）。

1.2.2胎兒染色體核型檢測(cè) ?抽取的20 ml羊水分裝到2個(gè)培養(yǎng)瓶中，在37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)7～9 d，制片，染片，上機(jī)。每例計(jì)數(shù)30個(gè)分裂相，分析5個(gè)分裂相。

1.2.3胎兒染色體拷貝數(shù)變異檢測(cè) ?首先用10 ml羊水提取全基因組DNA，基因組DNA濃度>10 ng/Ul。然后構(gòu)建測(cè)序文庫(kù)，純化文庫(kù)DNA濃度不低于25 nM/Ul，然后進(jìn)行測(cè)序檢測(cè)，最后通過(guò)生物信息分析軟件分析所測(cè)數(shù)據(jù)，檢測(cè)出染色體拷貝數(shù)變異。

1.3觀察指標(biāo) ?胎兒超聲異常中分為2大類，胎兒超聲軟指標(biāo)異常：NT、NF、鼻骨缺失或發(fā)育不良、其它超聲軟指標(biāo);胎兒超聲結(jié)構(gòu)異常：心臟結(jié)構(gòu)畸形、神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)畸形、消化系統(tǒng)結(jié)構(gòu)畸形、泌尿系統(tǒng)結(jié)構(gòu)畸形、呼吸系統(tǒng)結(jié)構(gòu)畸形、骨骼結(jié)構(gòu)畸形、唇腭裂、胎兒水腫、多發(fā)畸形。統(tǒng)計(jì)各種超聲異常的病例數(shù)，及在各種超聲異常項(xiàng)目中核型異常數(shù)，拷貝數(shù)變異數(shù)及染色體異常率。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 ?將數(shù)據(jù)錄入Excel中進(jìn)行分析，計(jì)數(shù)資料以（n）進(jìn)行描述。

2結(jié)果

2.1胎兒超聲異常情況 ?515例胎兒超聲異常中，胎兒超聲軟指標(biāo)異常362例，占70.29%。胎兒超聲結(jié)構(gòu)異常153例，占29.71%。

2.2胎兒遺傳學(xué)結(jié)果 ?發(fā)現(xiàn)胎兒染色體核型異常42例，檢出率為8.16%，其中數(shù)目異常32例，結(jié)構(gòu)異常10例。染色體拷貝數(shù)變異檢測(cè)出57例，檢出率為11.07%。超聲軟指標(biāo)中鼻骨缺失或發(fā)育不良染色體異常率最高，占20.93%。胎兒結(jié)構(gòu)異常中，胎兒多發(fā)畸形染色體的異常率最高，占50%，其次為心臟畸形，占18.82%，見(jiàn)表1。

3討論

染色體是基因的載體，胎兒染色體異常，可影響胎兒的發(fā)育，引起胎兒結(jié)構(gòu)的異常及不同程度的智力低下。確診染色體病的“金標(biāo)準(zhǔn)”是羊水培養(yǎng)染色體核型分析，但染色體核型分析具有培養(yǎng)周期長(zhǎng)，不能檢出<5 Mb的染色體片段結(jié)構(gòu)異常的缺陷[5]。基于高通量測(cè)序技術(shù)的拷貝數(shù)變異（CNV）檢測(cè)很大程度上彌補(bǔ)了這一缺陷，但胎兒染色體產(chǎn)前診斷可能會(huì)導(dǎo)致流產(chǎn)[4]。超聲檢查是一種無(wú)創(chuàng)、安全的檢查方法，可重復(fù)性操作，成為篩查胎兒畸形的首要檢測(cè)方法。本研究中515例超聲示胎兒異常中，檢出胎兒染色體核型異常42例，檢出率8.16%，而檢出染色體拷貝數(shù)變異57例，檢出率為11.07%，較單純羊水培養(yǎng)檢出染色體異常率增加了2.91%。有文獻(xiàn)報(bào)道[6]，在超聲結(jié)構(gòu)異常而核型分析正常時(shí)，6%的病例可被檢出致病性拷貝數(shù)變異。因此在孕婦及其家屬同意的條件下，因超聲示胎兒異常行羊穿時(shí)盡量檢測(cè)胎兒染色體核型和拷貝數(shù)變異兩項(xiàng)，以減少染色體異常兒的出生，但如果檢出不明意義的拷貝數(shù)變異，也會(huì)給臨床咨詢帶來(lái)困擾和挑戰(zhàn)。

超聲軟指標(biāo)是指胎兒微小的一過(guò)性、非結(jié)構(gòu)改變性異常，可作為判斷胎兒是否出現(xiàn)染色體異常的一項(xiàng)危險(xiǎn)因素[7]。研究表明[8]，NT增厚、鼻骨缺失與染色體疾病尤其是21-三體綜合征密切相關(guān)。21三體綜合征在臨床上表現(xiàn)為特殊面容、眼裂小、眼距寬、伸舌、鼻梁低平，由英國(guó)醫(yī)生LangdonDown首次提出，故也稱為Down 綜合征，是導(dǎo)致胎兒智力低下最常見(jiàn)染色體異常之一。本研究超聲軟指標(biāo)中鼻骨缺失或發(fā)育不良染色體異常率最高，占20.93%;且胎兒NT染色體異常率為12.35%，胎兒NF染色體異常率為13.33%，而其它超聲軟指標(biāo)染色體異常率為3.93%。因此，聯(lián)合胎兒鼻骨、NT、NF超聲檢測(cè)，當(dāng)任一項(xiàng)異常時(shí)，行產(chǎn)前診斷可以很大程度上減少染色體異常胎兒的出生，提高人口出生質(zhì)量。

另外，本研究胎兒結(jié)構(gòu)異常中，胎兒多發(fā)畸形染色體的異常率最高，占50.00%，其次為心臟畸形，占18.82%;而泌尿系統(tǒng)、骨骼系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)、唇腭裂染色體異常率最低，為0。在心血管畸形中，胎兒染色體異常既有染色體非整倍體異常，又有染色體重排，而在染色體重排中又以DiGeorge綜合征（22q11缺失）最為常見(jiàn)。DiGeorge綜合征是最常見(jiàn)的染色體微缺失綜合征，常規(guī)的染色體核型分析難以檢測(cè)，而基于高通量測(cè)序技術(shù)的拷貝數(shù)變異檢測(cè)則可以檢測(cè)。本文中泌尿系統(tǒng)，骨骼系統(tǒng)，呼吸系統(tǒng)，唇腭裂超聲結(jié)構(gòu)異常胎兒未檢出異常染色體，可能由于標(biāo)本量較少，也可能由于這些超聲結(jié)構(gòu)異常胎兒染色體異常率較低。不同種類的結(jié)構(gòu)畸形，胎兒染色體的異常率不同，且多發(fā)畸形染色體異常率高于單發(fā)畸形。對(duì)于胎兒心臟畸形和多發(fā)畸形應(yīng)高度重視，以免漏診異常胎兒，給家庭和社會(huì)造成負(fù)擔(dān)。在孕婦咨詢胎兒染色體異常風(fēng)險(xiǎn)率時(shí)，需要考慮超聲所示胎兒異常的結(jié)構(gòu)畸形及軟指標(biāo)，盡早發(fā)現(xiàn)染色體異常胎兒，提高人口出生質(zhì)量。

綜上所述，妊娠期超聲提示胎兒各類畸形及胎兒染色體異常率存在較大差異，分布無(wú)規(guī)律，在孕婦咨詢胎兒染色體異常風(fēng)險(xiǎn)率時(shí)，需要綜合考慮超聲所示胎兒結(jié)構(gòu)畸形及軟指標(biāo)的種類和數(shù)量，以提供更有價(jià)值的遺傳咨詢。

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收稿日期：2020-02-20;修回日期：2020-03-12

編輯/成森