老年2型糖尿病患者血清維生素D與T細(xì)胞亞群水平及胰島素抵抗的關(guān)系

呂齊歡 周 劍 康冬梅

我國(guó)老年人群2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)的發(fā)病率和患病率逐年增加，而這些人群中維生素D(vitamin D，VitD)缺乏可達(dá)60%～90%[1]。VitD是一種脂溶性類固醇激素前體，以1，25二羥維生素D為活性形式調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)和分化。血清中檢測(cè)的大部分為25羥維生素D3[25 hydroxyvitamin D3,25(OH)D3]，其作為人體內(nèi)VitD 的主要形式，可通過對(duì)于該產(chǎn)物的檢測(cè)反映總VitD的情況。有研究[2]表明，25(OH)D3可作用于T、B淋巴細(xì)胞調(diào)節(jié)細(xì)胞因子和抗體的產(chǎn)生，而T細(xì)胞水平變化和T2DM的發(fā)生有關(guān)[3]。目前，國(guó)內(nèi)關(guān)于VitD對(duì)T2DM患者體T細(xì)胞作用研究報(bào)道較少，本研究旨在比較老年T2DM患者不同血清VitD水平狀態(tài)下T細(xì)胞亞群水平以及T細(xì)胞亞群水平與胰島素抵抗的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 選擇2013年11月至2018年7月中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)附屬第一醫(yī)院老年醫(yī)學(xué)科住院的T2DM患者128例，其中，男性 72例，女性56例；年齡65～85歲，平均(74.48±5.35)歲。按美國(guó)骨質(zhì)疏松學(xué)會(huì)VitD 缺乏程度的分級(jí)，將128例患者分為正常組[25(OH)D3≥30 ng/mL](29例)、不足組[20 ng/mL≤25(OH)D3<30 ng/mL](40例)、缺乏組[10 ng/mL≤25(OH)D3<20 ng/mL](28例)與嚴(yán)重缺乏組[25(OH)D3<10 ng/mL](31例)。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡≥65歲者；②符合1999年WHO糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]者。排除標(biāo)準(zhǔn)：①胃大部、腸切除術(shù)后者；②既往或正在服用活性VitD或口服對(duì)鈣、磷代謝、VitD有影響的藥物者，如鋰制劑、噻嗪類利尿劑、苯巴比妥、二磷酸鹽制劑等；③嚴(yán)重器質(zhì)性內(nèi)分泌疾病，如甲狀腺疾病、甲狀旁腺功能亢進(jìn)等者；④繼發(fā)性高血壓、惡性高血壓者；⑤嚴(yán)重肝、腎功能異常者；⑥心臟瓣膜病、心肌病者；⑦重度貧血、骨髓瘤等影響骨代謝疾病者；⑧急性感染、惡性腫瘤者；⑨腎切除或維持透析患者；⑩長(zhǎng)期臥床、營(yíng)養(yǎng)不良、半年內(nèi)有骨折史、長(zhǎng)期服用激素、免疫抑制劑等藥物者。

1.3 觀察指標(biāo) 收集所有研究對(duì)象的性別、年齡、病程、身高、體質(zhì)量、體質(zhì)指數(shù)(body mass index,BMI)。同時(shí)檢測(cè)空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、空腹胰島素(fasting insulin,FIns)、三酰甘油(triglyceride,TG)、總膽固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白膽固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)、糖化血紅蛋白(glycosylated hemoglobin A1c,HbA1c)、25(OH)D3。穩(wěn)態(tài)模型評(píng)估胰島素抵抗指數(shù)(homeostatic model assessment- insulin resistance，HOMA-IR)=FPG×FIns/22.5。采用流式細(xì)胞儀FACSCalibur和軟件CellQuest進(jìn)行三色或四色熒光參數(shù)獲取及分析T細(xì)胞亞群水平。

2 結(jié)果

2.1 4組患者臨床指標(biāo)比較 4組患者的年齡、BMI、病程、HbA1c 、FPG、FIns、TG、TCH、HDL-C、LDL-C進(jìn)行比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。4組患者的lgHOMA-IR進(jìn)行比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 4組患者臨床指標(biāo)比較

2.2 4組患者外周血CD3+T、CD4+T 、CD8+T 細(xì)胞亞群水平和CD4+T/CD8+T比值比較 4組患者CD4+T細(xì)胞亞群水平比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。各組CD3+T、CD8+T細(xì)胞亞群水平和CD4+/CD8+比值比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。嚴(yán)重缺乏組CD3+T、CD8+T細(xì)胞亞群水平高于缺乏組、不足組和正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。缺乏組CD3+T 、CD8+T細(xì)胞亞群水平高于不足組和正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。正常組CD3+T 、CD8+T細(xì)胞亞群水平最低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。嚴(yán)重缺乏組CD4+T/CD8+T比值低于缺乏組、不足組和正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。缺乏組CD4+T/CD8+T比值低于不足組和正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。正常組CD4+T/CD8+T比值最高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

表2 4組患者外周血CD3+T、CD4+T 、CD8+T 和CD4+T/CD8+T亞群水平比較

2.3 25(OH)D3與各指標(biāo)的相關(guān)性分析 lgHOMA-IR、CD3+T細(xì)胞亞群水平、CD8+T細(xì)胞計(jì)數(shù)與25(OH)D3呈負(fù)相關(guān)(r=-0.756、-0.687、-0.546，P<0.001)。CD4+T/CD8+T比值與25(OH)D3呈正相關(guān)(r=0.751，P<0.001)。

2.4 胰島素抵抗的影響因素分析 以lgHOMA-IR為因變量，以年齡、BMI、病程、HbA1c 、25(OH)D3、TG、TCH、HDL-C、LDL-C、CD4+T、CD8+T為自變量進(jìn)行多元線性回歸分析，模型篩選采用逐步法，分析各因素對(duì)胰島素抵抗的影響?；貧w方程為YlgHOMA-IR=0.480XCD8+T+0.605XBMI-27.875(R2=15.103，P=0.006)。見表3。

表3 胰島素抵抗影響因素的多元線性回歸分析

3 討論

VitD缺乏已經(jīng)成為一個(gè)全球性的公共健康問題，在老年人群中，這種現(xiàn)象更加普遍[5]。研究[6]表明VitD缺乏是許多自身免疫性疾病、移植排斥等自身免疫相關(guān)病理的危險(xiǎn)因素，但越來(lái)越多研究[7-8]表明，VitD 缺乏與許多老年相關(guān)性疾病，如骨質(zhì)疏松、T2DM、癌癥、冠心病等均相關(guān)。

本研究結(jié)果顯示，在老年T2DM人群中，各組間FPG、FIns、HbA1c無(wú)顯著變化，而隨著血清25(OH)D3濃度的降低，HOMA-R逐漸升高，相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)：血清VtiD水平與HOMA-IR存在負(fù)相關(guān)，提示VitD對(duì)胰島β細(xì)胞具有保護(hù)作用，可以預(yù)防糖尿病的發(fā)生，而VitD缺乏則增加了糖尿病發(fā)生及血糖難控制的風(fēng)險(xiǎn)，這在既往[9-10]研究中也得到了證實(shí)。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在老年T2DM人群中，隨著VitD減少，外周血CD3+T、CD8+T細(xì)胞水平逐漸升高，CD4+T/CD8+T比值逐漸下降，CD4+T細(xì)胞水平未見明顯變化，與Mao等[11]研究一致。在老年T2DM人群中，血清VitD缺乏對(duì)外周血CD4+T、CD8+T細(xì)胞水平的影響不一樣。原因可能是：CD8+T細(xì)胞表面的VitD受體密度相對(duì)更高，同時(shí)VitD可以對(duì)CD8+T細(xì)胞的基因表達(dá)起到抑制作用[12]，而在CD4+T細(xì)胞中VitD沒有這一作用。VitD對(duì)CD4+T細(xì)胞的作用不是通過影響該類細(xì)胞水平引起，而是通過促進(jìn)CD4+T細(xì)胞從輔助性T細(xì)胞1向T細(xì)胞2分化，這種現(xiàn)象在體外研究[13]中已被證實(shí)。

多元線性回歸分析發(fā)現(xiàn)，CD8+T水平升高可以加重胰島素抵抗。其機(jī)制可能是CD8+T細(xì)胞可以分泌更多的干擾素-γ而直接加重胰島素抵抗[14]，還可以通過分泌單核細(xì)胞趨化蛋白-1、單核細(xì)胞趨化蛋白-3干擾巨噬細(xì)胞的分化、組織內(nèi)遷移而加重胰島素抵抗。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著血清VitD水平降低胰島素抵抗加重，但CD4+T細(xì)胞水平未見明顯變化，這與既往研究[15]不一致。分析原因可能是：CD4+T可以分化為不同亞型Th1、Th2、Th9、Th17等，不同亞型CD4+T細(xì)胞分泌IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10等多種細(xì)胞因子，各種細(xì)胞因子之間的比值，如IL-2/IL-4、IL-2/IL-10、IFN-γ/IL-4等對(duì)T2DM患者胰島素抵抗程度的影響不一樣[16]，因此，判斷CD4+T細(xì)胞水平對(duì)胰島素抵抗的影響時(shí)需要檢測(cè)其不同亞型及其分泌的多種細(xì)胞因子。

綜上所述，隨著血25(OH)D3的降低，HOMA-IR、CD3+T、CD8+T細(xì)胞水平升高，lgHOMA-IR、CD3+T、CD8+T細(xì)胞水平與VitD呈負(fù)相關(guān)， CD8+T細(xì)胞水平升高可以加重胰島素抵抗。老年T2DM患者血清VitD對(duì)胰島素抵抗的影響可能是通過改變T細(xì)胞亞群變化引起。本研研究樣本量有限，且非前瞻性研究,沒有檢測(cè)細(xì)胞因子，不能更直觀地評(píng)估T細(xì)胞亞群的功能變化,沒有檢測(cè)其他類型有生物活性的VitD，不能更全面的評(píng)估VitD對(duì)細(xì)胞亞群的影響。