牛病毒性腹瀉病在規(guī)?；翀?chǎng)中凈化的探索

文/劉彩娟 任 亮 王永信 付文國(guó) 胡格吉勒 高滿慧

（黑龍江克東和平原生態(tài)牧業(yè)有限公司）

牛病毒性腹瀉/黏膜?。˙VDM D）是由牛病毒性腹瀉病毒（BVDV）引發(fā)的一種牛的傳染病。BVDV可以引起各階段牛群或其他反芻動(dòng)物病毒性腹瀉，急、慢性黏膜病，持續(xù)性感染，免疫耐受、免疫抑制，繁殖障礙及母畜流產(chǎn)、死胎和畸形等。我國(guó)有研究調(diào)查表明，超過(guò)46．7%的牧場(chǎng)存在BVDV抗原陽(yáng)性牛，其中2．2%的牛只為持續(xù)性感染牛（PI）[1]。我國(guó)牧場(chǎng)BVDV感染程度遠(yuǎn)高于大多數(shù)其他亞洲國(guó)家，感染率也高于歐美國(guó)家，給畜牧業(yè)造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失[2]。國(guó)內(nèi)外有關(guān)BVDV在奶牛上的研究已取得了初步成績(jī)，我國(guó)在該領(lǐng)域的研究多集中在病原特性和實(shí)驗(yàn)室診斷方法以及BVDV對(duì)生產(chǎn)效益產(chǎn)生的影響等方面，但在實(shí)際生產(chǎn)中凈化方案的可行性尚不清楚。因此，本文旨在通過(guò)研究規(guī)模化牧場(chǎng)在不同階段牛群的篩查結(jié)果，探討B(tài)VDV凈化方案的合理性，為防控和凈化該病提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1．1 試驗(yàn)動(dòng)物

試驗(yàn)共進(jìn)行4 個(gè)階段的篩查。第一階段是對(duì)泌乳牛群進(jìn)行篩查，第二階段是對(duì)滿3 月齡犢牛進(jìn)行篩查，第三階段是對(duì)8 月齡以上牛群進(jìn)行篩查，第四階段是對(duì)新生犢牛進(jìn)行篩查。

1．2 樣品采集

采集目標(biāo)凈化牧場(chǎng)牛群的牛耳組織、切口組織和血清等樣品。泌乳牛和3 月齡犢牛采集血清樣品進(jìn)行檢測(cè)，其他類型牛群采集牛耳組織樣品進(jìn)行檢測(cè)。若篩查出抗原陽(yáng)性的牛只，則立即進(jìn)行隔離，待15天后再次采樣，并與第1次結(jié)果進(jìn)行復(fù)核；兩次結(jié)果均為陽(yáng)性者，則進(jìn)行淘汰處理。

1．3 試劑

BVDV抗原檢測(cè)試劑盒：北京市IDEXX元亨生物科技有限公司。

1．4 儀器設(shè)備

酶標(biāo)儀：ELX808，美國(guó)寶特公司生產(chǎn)；電熱恒溫培養(yǎng)箱：DHP-9082，上海一恒科技有限公司生產(chǎn)。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2．1目標(biāo)凈化牧場(chǎng)泌乳牛群篩查結(jié)果

本凈化程序所使用的檢測(cè)樣品均為血清樣品，初檢和復(fù)檢時(shí)間間隔至少15 天。A、B、C、D為目標(biāo)凈化牧場(chǎng)，未進(jìn)行BVDV疫苗免疫，有國(guó)外引種經(jīng)歷。由表1可以看出，在進(jìn)行泌乳牛群篩查時(shí)，除D牧場(chǎng)外，其他牧場(chǎng)均有不同程度的檢出，但陽(yáng)性率均低于0．10%，其中B牧場(chǎng)檢出陽(yáng)性牛頭數(shù)較高，陽(yáng)性率達(dá)到0．08%。

表1 目標(biāo)凈化牧場(chǎng)泌乳牛群篩查檢測(cè)結(jié)果

表2 目標(biāo)凈化牧場(chǎng)滿3 月齡牛群篩查結(jié)果

表3 目標(biāo)凈化牧場(chǎng)8 月齡以上牛群篩查結(jié)果

2．2 目標(biāo)凈化牧場(chǎng)滿 3 月齡牛群篩查結(jié)果

由表2可以得出，在進(jìn)行滿3 月齡牛群篩查時(shí)，除D牧場(chǎng)外，其他牧場(chǎng)均有不同程度的檢出，但是陽(yáng)性率均低于0．30%。其中，2013年B牧場(chǎng)檢出陽(yáng)性牛頭數(shù)較高，檢出6 頭，陽(yáng)性率達(dá)到0．24%；而A牧場(chǎng)檢出陽(yáng)性率在0．30%。隨后，各牧場(chǎng)滿3 月齡陽(yáng)性檢出率在逐漸降低，其中C牧場(chǎng)的陽(yáng)性檢出率在2016年達(dá)到0．00%。

2．3 目標(biāo)凈化牧場(chǎng) 8 月齡以上牛群篩查結(jié)果

表3顯示，在進(jìn)行8 月齡以上牛群篩查時(shí)，2017—2019年B牧場(chǎng)雖有陽(yáng)性檢出，但檢出率呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，在2017年，A牧場(chǎng)陽(yáng)性率達(dá)到0．01%，隨后陽(yáng)性檢出率逐漸降低到0．00%，而C、D牧場(chǎng)的陽(yáng)性檢出率一直穩(wěn)定在0．00%。

2．4 目標(biāo)凈化牧場(chǎng)新生犢牛的檢測(cè)結(jié)果

由表4可以看出，A、B牧場(chǎng)新生犢牛陽(yáng)性檢出率均呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，其中A組陽(yáng)性檢出率下降相對(duì)明顯，而C、D組均維持在0．00%狀態(tài)。

3 討論

BVDV會(huì)影響奶牛生產(chǎn)性能，增加奶牛感染其他多種疾病風(fēng)險(xiǎn)，導(dǎo)致奶牛過(guò)早淘汰，以及造成經(jīng)濟(jì)損失[3]。奶牛感染BVDV主要分為3 種不同形式。一是 PI牛，該類牛只在其母親早期懷孕（30～120天）時(shí)感染，其終身帶有大量的病毒[4]。二是暫時(shí)性感染牛只（TI牛），該類牛只在出生后被感染，帶有少量病毒，在15 天后即可消除[5]。三是特洛伊母牛（TR牛），其胎兒為PI牛[6]。

表4 目標(biāo)凈化牧場(chǎng)新生犢牛檢測(cè)結(jié)果

BVDV在牛群中的傳播主要是以PI牛為重要的傳染源，因此，淘汰PI牛是控制BVDV感染及傳播的首要任務(wù)。被感染母牛可以通過(guò)母嬰傳播將病毒傳染給胎兒，或者傳播給有直接接觸的其他懷孕母牛，因此，篩查出牛群的PI牛，并將其清除，可以有效防止垂直傳播，同時(shí)切斷水平傳播途徑，減少與其他懷孕母牛接觸的幾率，防止發(fā)生水平傳播使懷孕母牛感染，進(jìn)而發(fā)展為垂直傳播。從本試驗(yàn)第一階段、第二階段的泌乳牛群和滿3 月齡犢牛的篩查結(jié)果也驗(yàn)證了這點(diǎn)。若牧場(chǎng)存在不同程度的感染風(fēng)險(xiǎn)，牛群內(nèi)存在傳播，也必然會(huì)對(duì)犢牛造成影響。而對(duì)于已清除干凈的凈化牧場(chǎng)，其群體內(nèi)不存在傳播風(fēng)險(xiǎn)，出生的犢牛不會(huì)被感染。對(duì)牛群進(jìn)行抗原篩查，篩選出所有抗原呈陽(yáng)性的牛只，并予以淘汰，可以徹底清除BVDV的傳染源，可以使存在感染情況的牧場(chǎng)也逐漸得到凈化，但是需要持續(xù)維持。如若在“篩查+淘汰”后較長(zhǎng)一段時(shí)間內(nèi)，如5年，檢測(cè)不出抗原陽(yáng)性牛，則說(shuō)明該“篩查+淘汰”方案成功，否則應(yīng)繼續(xù)進(jìn)行篩查和淘汰，直至徹底清除為止。同時(shí)還需要配合實(shí)施嚴(yán)格的生物安全管理和防疫制度，才能徹底凈化BVDV。根據(jù)本文方案對(duì)新生犢牛進(jìn)行不斷檢測(cè)和8 月齡以上牛群的持續(xù)監(jiān)控，已經(jīng)初見成效，大部分牧場(chǎng)雖已達(dá)到預(yù)期的凈化目標(biāo)，但還需繼續(xù)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。此外，個(gè)別牧場(chǎng)仍存在PI牛風(fēng)險(xiǎn)，需要繼續(xù)執(zhí)行篩查-淘汰方案。新生犢牛在檢出陽(yáng)性時(shí)，需要追溯其母親和姐妹進(jìn)行個(gè)體BVDV抗原檢測(cè)[7]。在凈化BVDV的過(guò)程中，還需要加強(qiáng)BVDV的免疫?！懊庖?淘汰”方案的核心是使用疫苗進(jìn)行高強(qiáng)度免疫，同時(shí)配合血清抗原檢測(cè)，免疫后一段時(shí)間進(jìn)行血清或者耳組織抗原檢測(cè)，若發(fā)現(xiàn)抗原呈陽(yáng)性個(gè)體則立即清除，執(zhí)行嚴(yán)格的生物安全控制和防疫制度，可以逐步實(shí)現(xiàn)BVDV凈化。血清的抗體檢測(cè)、評(píng)估需要在免疫前進(jìn)行，這是因?yàn)樽⑸湟呙绾髸?huì)產(chǎn)生抗體干擾檢測(cè)結(jié)果。

進(jìn)行BVDV凈化，還需要提高養(yǎng)殖者對(duì)該病的認(rèn)知程度。有調(diào)查顯示，即使在養(yǎng)牛業(yè)非常發(fā)達(dá)的澳大利亞，也有30．0%的養(yǎng)殖者對(duì)該病一無(wú)所知[8]，而我國(guó)的認(rèn)知率更低。從北歐國(guó)家開展非免疫凈化工作的經(jīng)驗(yàn)看，利益相關(guān)者特別是養(yǎng)殖者對(duì)BVDV的認(rèn)知程度，是決定工作能否取得成功的關(guān)鍵因素。這是因?yàn)閷?duì)于非免疫牧場(chǎng)，除嚴(yán)格的生物安全措施外，沒有設(shè)置第二道防線控制BVDV的傳播[9]。

4 小結(jié)

不同牧場(chǎng)可以根據(jù)自身實(shí)際和資金支持情況，采取“篩查+淘汰”或“免疫+淘汰”方案。但是無(wú)論何種方式，均需要普及BVDMD的有關(guān)知識(shí)，提高牧場(chǎng)管理者的生物安全預(yù)防意識(shí)，嚴(yán)格按照流程進(jìn)行篩查和轉(zhuǎn)群防疫。