PCR檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法用于陰道細(xì)菌檢驗(yàn)的臨床研究

陳亥　許夢(mèng)潔　陳楊芳　許鍇

【摘? 要】目的：探究PCR檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法用于陰道細(xì)菌檢驗(yàn)的臨床價(jià)值。方法：選取溫州市人民醫(yī)院收治的48例細(xì)菌性陰道炎患者，均通過(guò)PCR檢驗(yàn)法（PCR組）、細(xì)菌培養(yǎng)法（細(xì)菌培養(yǎng)組）進(jìn)行檢驗(yàn)， 對(duì)比兩組陽(yáng)性檢出率和細(xì)菌檢出率。結(jié)果：陽(yáng)性檢出率比較，PCR組高于細(xì)菌培養(yǎng)組，差異顯著（X²=3.872，P=0.049）。且PCR組加特納菌、棒狀桿菌、腸球菌的細(xì)菌檢出率，均高于細(xì)菌培養(yǎng)組，無(wú)顯著差異（P>0.05）。結(jié)論：在進(jìn)行陰道細(xì)菌檢驗(yàn)時(shí)，PCR檢驗(yàn)法的陽(yáng)性檢出率和細(xì)菌檢出率比細(xì)菌培養(yǎng)法高，值得在臨床應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】細(xì)菌性陰道炎;陰道細(xì)菌檢驗(yàn);PCR檢驗(yàn)法;細(xì)菌培養(yǎng)法

【中圖分類號(hào)】R446;R711????? 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A?????? 【文章編號(hào)】1672-3783（2020）01-0038-02

陰道炎屬女性常見(jiàn)炎性疾病，由陰道細(xì)菌感染所致，發(fā)病率較高，病情嚴(yán)重時(shí)可造成嚴(yán)重后果，如不孕、異位妊娠、慢性盆腔炎等，危害患者身體健康，影響其正常的生活和工作^[1]。因此，必須予以患者有效的診斷方法，為下一步治療奠定好基礎(chǔ)。基于此，本次研究將以溫州市人民影院收治的48例患者為例，均進(jìn)行PCR檢驗(yàn)法和細(xì)菌培養(yǎng)法進(jìn)行陰道細(xì)菌檢驗(yàn)，報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1一般資料

本次研究由溫州市人民醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，選取在2017年1月～2019年2月期間，我院收治的細(xì)菌性陰道炎患者48例，符合臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)?；颊呔橥鈪⑴c本次研究，并簽署研究知情書其基線資料：（1）年齡：最小年齡28歲，最大年齡46歲，平均年齡（35.68±2.25）歲;（2）病程：最短病程4個(gè)月，最長(zhǎng)病程20個(gè)月，平均病程（12.65±3.67）個(gè)月;（3）細(xì)菌類型：加特納菌7例，棒狀桿菌16例，腸球菌25例。

1.2方法

在患者陰道后穹窿部，用無(wú)菌棉簽，采集陰道分泌物，并用生理鹽水貯存。

1.2.1PCR組

行PCR檢驗(yàn)，首先將貯存陰道分泌物的生理鹽水，取出1000μL，放于離心機(jī)中，采用12000r/min，時(shí)間為15min進(jìn)行離心分離。取出上清液制成DNA模板，再放入PCR儀進(jìn)行循環(huán)處理，并分析所具有細(xì)菌類型。

1.2.2細(xì)菌培養(yǎng)組

行細(xì)菌培養(yǎng)法，首先將貯存陰道分泌物的生理鹽水，均勻涂抹在瓊脂培養(yǎng)基上，并放在二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)時(shí)間3d，當(dāng)菌落長(zhǎng)成后，選擇光滑、灰色、半透明、“露滴”型的細(xì)菌，進(jìn)行生化檢驗(yàn)。采用全自動(dòng)微生物鑒定儀，鑒別細(xì)菌的種類。

1.3觀察指標(biāo)

觀察并記錄兩組陽(yáng)性檢出率，以及細(xì)菌檢出率。PCR陽(yáng)性檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)：1mm以內(nèi)的條帶寬度，整齊條帶邊緣，無(wú)藥斑和引物二聚體的背景。細(xì)菌培養(yǎng)法陽(yáng)性診斷標(biāo)準(zhǔn)：長(zhǎng)出典型菌落，經(jīng)生化儀鑒定。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

利用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件，對(duì)計(jì)數(shù)資料進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，X²檢驗(yàn)，率表示，P<0.05，表顯著差異。

2 結(jié)果

PCR組檢出情況：加特納菌7（14.58%）例，棒狀桿菌14（29.17%）例，腸球菌23（47.92%）例。細(xì)菌培養(yǎng)組檢出情況：加特納菌5（10.42%）例，棒狀桿菌12（25.00%）例，腸球菌20（41.67%）例。PCR組陽(yáng)性檢出率為91.67%（44/48），細(xì)菌培養(yǎng)組陽(yáng)性檢出率為77.08%（37/48）。陽(yáng)性檢出率比較，PCR組高于細(xì)菌培養(yǎng)組，差異顯著（X²=3.872，P=0.049）。且PCR組加特納菌、棒狀桿菌、腸球菌的細(xì)菌檢出率，均高于細(xì)菌培養(yǎng)組，無(wú)顯著差異（P>0.05）。

3 討論

在健康女性的陰道內(nèi)，寄生菌群處于相對(duì)平衡狀態(tài)，以維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，若出現(xiàn)失衡狀況，大量死亡維持細(xì)菌平衡的重要細(xì)菌，使病菌迅速繁殖，并消耗大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，導(dǎo)致酸堿平衡紊亂，最終引起細(xì)菌性陰道炎的發(fā)生^[2]。

細(xì)菌培養(yǎng)法是一種檢測(cè)細(xì)菌性陰道炎的方法，操作簡(jiǎn)單，普遍使用率較高，但應(yīng)用中細(xì)菌培養(yǎng)法卻暴露出較多的弊端。如：（1）在操作過(guò)程中，對(duì)實(shí)驗(yàn)室的器皿、無(wú)菌環(huán)境等要求較高，且檢驗(yàn)過(guò)程較為復(fù)雜，易受到外來(lái)因素的影響，造成培養(yǎng)失敗;（2）細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，大都為3d左右，易延誤患者病情;（3）在進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)，易受到認(rèn)為因素的影響，使培養(yǎng)失敗，延長(zhǎng)檢驗(yàn)時(shí)間^[3]。

而PCR檢驗(yàn)法，一種新型的細(xì)菌性陰道炎檢驗(yàn)方法，不僅具備PCR敏感性，還具有DNA雜交的特異性^[4]。且對(duì)環(huán)境要求低、樣本需求量少，還可當(dāng)天得出檢測(cè)結(jié)果，為醫(yī)師提供診斷幫助。PCR具體操作流程為：（1）標(biāo)準(zhǔn)雙鏈DNA在高溫條件下，氫鍵斷裂變?yōu)閱捂淒NA;（2）單鏈DNA降溫并與引物結(jié)合，形成局部雙鏈DNA;（3）在活動(dòng)最佳狀態(tài)下，延伸并形成模板互補(bǔ)的DNA鏈，使引物DNA鏈增長(zhǎng)，突顯DNA雜交特異性，提高PCR敏感性。雖PCR檢驗(yàn)法具有陽(yáng)性檢出率高，操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)時(shí)間短等特點(diǎn)，但也會(huì)存在一定的漏診率^[5]。因此，在檢測(cè)期間更應(yīng)注意：（1）在取樣期間，盡量多選取位置，避免對(duì)診斷結(jié)果帶來(lái)影響。（2）即使操作簡(jiǎn)單，也要注意操作手法，以降低人為因素造成的影響。因此，醫(yī)生需提高自我業(yè)務(wù)能力和專業(yè)素質(zhì)，提升陽(yáng)性檢出率。

在本次研究的結(jié)果顯示，PCR組陽(yáng)性檢出率，顯著高于細(xì)菌培養(yǎng)組，差異顯著（X²=3.872，P=0.049）。表明在檢驗(yàn)陰道細(xì)菌檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)用PCR檢驗(yàn)法比細(xì)菌培養(yǎng)檢驗(yàn)，陽(yáng)性檢出率高，提供臨床診斷幫助，使患者盡早獲得對(duì)癥治療。另外，PCR組細(xì)菌檢出率明顯高于細(xì)菌培養(yǎng)組，進(jìn)一步說(shuō)明PCR檢驗(yàn)法能夠?yàn)榛颊郀?zhēng)取更多的治療時(shí)間，有利于患者恢復(fù)健康。

綜上所述，在陰道細(xì)菌檢驗(yàn)時(shí)，選擇PCR檢驗(yàn)的陽(yáng)性檢出率高，細(xì)菌檢出高，能夠?yàn)榕R床診斷提供幫助，值得推薦應(yīng)用。

參考文獻(xiàn)

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[5]????? 李美珠，李煒煊.PCR法和細(xì)菌培養(yǎng)法用于陰道細(xì)菌檢驗(yàn)的效果對(duì)比[J].臨床檢驗(yàn)雜志（電子版），2019，8（1）：162-163.