食品中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)結(jié)果的分析

范霞

摘 要：目的：分析食品中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的檢測(cè)結(jié)果，以及時(shí)發(fā)現(xiàn)食品安全隱患，為食品安全監(jiān)管提供參考依據(jù)。方法：嚴(yán)格按照《2012年食源性致病菌監(jiān)測(cè)工作手冊(cè)》中的單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)濟(jì)寧市2019年1—12月定期采樣的8類常用食品（生鮮豬肉、生鮮牛肉、生鮮羊肉、生鮮雞肉、凍蝦、凍帶魚、涼拌菜與冰激凌）進(jìn)行單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)，分析其陽(yáng)性檢出率。結(jié)果：567份8類常用食品中，檢出單核細(xì)胞增生李斯特氏菌27份，陽(yáng)性檢出率為4.76%，其中包括生鮮豬肉6份（5.94%）、生鮮羊肉5份（6.02%）、生鮮雞肉5份（5.10%）、凍蝦4份（7.69%）、凍帶魚2份（3.28%）以及涼拌菜5份（11.63%），生鮮牛肉與冰激凌均未檢出單核細(xì)胞增生李斯特氏菌。結(jié)論：食品中存在單核細(xì)胞增生李斯特氏菌污染的風(fēng)險(xiǎn)，其中以涼拌菜的污染風(fēng)險(xiǎn)最高，應(yīng)加強(qiáng)該方面的防控，以確保食品安全。

關(guān)鍵詞：食品;單核細(xì)胞增生李斯特氏菌;檢測(cè)

單核細(xì)胞增生李斯特氏菌是一種食品中常見的細(xì)菌，可引起食物中毒，會(huì)導(dǎo)致免疫力低下人群出現(xiàn)胃腸炎、腦膜炎、敗血癥等疾病，孕婦還可能因此流產(chǎn)、死胎，會(huì)嚴(yán)重威脅人們的身體健康，甚至是生命安全，應(yīng)引起高度重視[1]。生鮮豬肉、生鮮牛肉、生鮮羊肉、生鮮雞肉、凍蝦、凍帶魚、涼拌菜與冰激凌是人們?nèi)粘Ｉ钪谐Ｒ姷氖称罚彝ǔＶ糜诘蜏丨h(huán)境下（冰箱）保存，極易滋生單核細(xì)胞增生李斯特氏菌，成為人類感染該病原菌的傳播介質(zhì)[2]。為了分析食品中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)結(jié)果，現(xiàn)就濟(jì)寧市定期采樣的8類常用食品的檢測(cè)過(guò)程與陽(yáng)性檢出率進(jìn)行分析，匯報(bào)如下。

1 資料與方法

1.1 樣本來(lái)源

選取本市2019年1—12月定期采樣的8類常用食品共567份，其中包括生鮮豬肉101份，生鮮牛肉94份，生鮮羊肉83份，生鮮雞肉98份，凍蝦52份，凍帶魚61份，涼拌菜43份以及冰激凌35份。

1.2 方法

1.2.1 樣品采樣

根據(jù)《2012年食源性致病菌監(jiān)測(cè)工作手冊(cè)》的相關(guān)規(guī)定，嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作原則，對(duì)本市2019年1—12月的食品安全風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè)樣品進(jìn)行采樣。每份樣品單獨(dú)包裝，4 h內(nèi)送檢。

1.2.2 培養(yǎng)基

鑒定生化培養(yǎng)基購(gòu)自北京陸橋生物公司，單核細(xì)胞增生李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基購(gòu)自科碼嘉公司（生產(chǎn)批號(hào)：20120116），TSA-YE平板培養(yǎng)基購(gòu)自上海廣銳生物科技有限公司，其他培養(yǎng)基與細(xì)菌系列生化鑒定系統(tǒng)均購(gòu)自青島海博生物技術(shù)有限公司，LB1、LB2增菌液購(gòu)自北京陸橋生物公司。各種培養(yǎng)基均于有效期內(nèi)使用。

1.2.3 儀器與設(shè)備

HPX-9162MBE電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海百典儀器有限公司），Thermo II級(jí)生物安全柜（江蘇迅迪儀器科技有限公司）。

1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)菌株

單核細(xì)胞增生李斯特氏菌CMCC 54002，購(gòu)自上海北諾生物科技有限公司。

1.2.5 檢測(cè)方法

嚴(yán)格按照《2012年食源性致病菌監(jiān)測(cè)工作手冊(cè)》中的單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)程序進(jìn)行檢測(cè)。

增菌：根據(jù)無(wú)菌操作原則，將25 g樣品加入至225 mL LB1增菌液中，30 ℃環(huán)境下培養(yǎng)24 h，之后取0.1 mL加入至10 mL LB2增菌液中，30 ℃環(huán)境下培養(yǎng)24 h。

分離培養(yǎng)：將LB2增菌液接種至單核細(xì)胞增生李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基瓊脂平板上，35 ℃環(huán)境下培養(yǎng)24 h。將可疑菌落（菌落呈藍(lán)色、帶白色輪為正常，其他為可疑菌落）接種至單核細(xì)胞增生李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基上，37 ℃環(huán)境下培養(yǎng)24 h，單核細(xì)胞增生李斯特氏菌形如傘狀或月牙狀，藍(lán)色，有動(dòng)力，產(chǎn)酸，不產(chǎn)氣，周邊有一不透明圈。

初篩：從單核細(xì)胞增生李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基瓊脂平板上篩選出5個(gè)可疑菌落接種于木糖、鼠李糖發(fā)酵管中，置于36 ℃環(huán)境下培養(yǎng)24 h，并于TSA-YE平板上于30 ℃環(huán)境下培養(yǎng)24 h，生化成木糖陰性、鼠李糖發(fā)酵陽(yáng)性。

染色鏡檢：行革蘭氏涂片染色鏡檢，單核細(xì)胞增生李斯特氏菌為革蘭氏陽(yáng)性短桿菌，直或略彎，兩側(cè)鈍圓，多V字型，無(wú)芽胞，偶為球狀、雙球狀。

生化檢驗(yàn)：將TSA-YE平板上的單核細(xì)胞增生李斯特氏菌接種于生化反應(yīng)管中，于36 ℃下培養(yǎng)24 h。

1.3 觀察指標(biāo)

分析8類常用食品的單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)結(jié)果，統(tǒng)計(jì)陽(yáng)性檢出率。

2 結(jié)果

567份8類常用食品中，檢出單核細(xì)胞增生李斯特氏菌27份，陽(yáng)性檢出率為4.76%，其中包括生鮮豬肉6份（5.94%）、生鮮羊肉5份（6.02%）、生鮮雞肉5份（5.10%）、凍蝦4份（7.69%）、凍帶魚2份（3.28%）與涼拌菜5份（11.63%），生鮮牛肉與冰激凌均未檢出單核細(xì)胞增生李斯特氏菌。見表1。

3 討論

近幾年，隨著人們生活水平的提高，食品安全問(wèn)題越來(lái)越受重視。與此同時(shí)，隨著食源性致病菌監(jiān)測(cè)機(jī)制的不斷完善，食源性疾病逐漸成為社會(huì)關(guān)注的公共衛(wèi)生問(wèn)題。單核細(xì)胞增生李斯特氏菌是食源性疾病的主要致病菌之一，可造成人畜同患疾病[3]。該病菌分布廣泛，在諸多食品中均有檢出，且其適應(yīng)能力強(qiáng)，對(duì)低溫、高滲等特殊環(huán)境仍有抵抗力，甚至?xí)谖矬w表層形成生物膜，其威脅性不言而喻[4]。單核細(xì)胞增生李斯特氏菌可從土壤、水、糞便等中分離出，所以對(duì)食品污染的檢測(cè)應(yīng)做到全面性、多環(huán)節(jié)，包括食品加工、運(yùn)送、儲(chǔ)藏與銷售等。

單核細(xì)胞增生李斯特氏菌經(jīng)口感染可引起食物中毒。世界衛(wèi)生組織的報(bào)道數(shù)據(jù)顯示，水產(chǎn)品中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的檢出率是4%～8%，奶與奶制品是5%～10%，家禽約是15%，肉與肉制品高達(dá)30%。由此可見，肉與肉制品的單核細(xì)胞增生李斯特氏菌污染風(fēng)險(xiǎn)明顯高于其他食品，原因主要在于：肉與肉制品在屠宰、運(yùn)送、加工與銷售期間較易出現(xiàn)該菌的污染，食用前的加工處理還會(huì)出現(xiàn)交叉污染。隨著檢測(cè)食品種類的不斷增加，2012年張家界初次在涼拌菜中檢出單核細(xì)胞增生李斯特氏菌，且陽(yáng)性檢出率高達(dá)13%。由此說(shuō)明，單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的污染范圍在不斷擴(kuò)大，應(yīng)引起高度重視，加強(qiáng)食品安全監(jiān)測(cè)力度，并擴(kuò)大檢測(cè)范圍[5]。

本研究對(duì)本市8類常用食品進(jìn)行采樣及單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)，結(jié)果顯示，567份樣品中檢出單核細(xì)胞增生李斯特氏菌27份，陽(yáng)性檢出率為4.76%，低于杜偉靜等[6]報(bào)道的6.42%;樣品類型中，陽(yáng)性檢出率最高的是涼拌菜，為11.63%，與上文張家界報(bào)道數(shù)據(jù)相近，其后依次是凍蝦、生鮮羊肉、生鮮豬肉、生鮮雞肉與凍帶魚;生鮮牛肉與冰激凌均未檢出單核細(xì)胞增生李斯特氏菌。由此可見，單核細(xì)胞增生李斯特氏菌在不同食品中的檢出率存在明顯差異，生鮮肉在屠宰、售賣期間易污染，而水產(chǎn)品中檢出該病菌可能和水質(zhì)、環(huán)境有關(guān)。

分析發(fā)現(xiàn)研究結(jié)果，本市食品中存在著單核細(xì)胞增生李斯特氏菌污染的風(fēng)險(xiǎn)，具有潛在的食物中毒危險(xiǎn)，因此建議相關(guān)部門加強(qiáng)食品安全管理，不斷完善衛(wèi)生操作規(guī)范，加大食品安全抽檢力度，實(shí)施連續(xù)追蹤管理，逐漸形成完善的食品污染控制體系，快速評(píng)測(cè)食品安全風(fēng)險(xiǎn)，以進(jìn)一步提高本市的食品安全水平[7]。食品生產(chǎn)、經(jīng)營(yíng)單位，應(yīng)嚴(yán)格規(guī)范操作標(biāo)準(zhǔn)，加強(qiáng)對(duì)食品原材料加工、儲(chǔ)藏、運(yùn)送與售賣中各個(gè)環(huán)節(jié)的質(zhì)量控制，同時(shí)積極預(yù)防二次污染;制作涼拌菜時(shí)應(yīng)做到操作衛(wèi)生，避免交叉污染[8]。對(duì)于居民，相關(guān)部門應(yīng)做好宣傳工作，以提高其食品安全意識(shí);同時(shí)提醒居民做好家庭中刀具、砧板、餐具的清潔工作，盡可能縮短生鮮食品的儲(chǔ)藏時(shí)間，涼拌菜做到即拌即吃。

綜上所述，食品中存在單核細(xì)胞增生李斯特氏菌污染的風(fēng)險(xiǎn)，其中以涼拌菜的污染風(fēng)險(xiǎn)最高，應(yīng)加強(qiáng)該方面的防控，以確保食品安全。

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