蔬菜中有機(jī)磷農(nóng)藥含量測定（氣相色譜法）的測量不確定度的評定

吳飛

摘 要：GB 23200.116-2019《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中90種有機(jī)磷類農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜法》已經(jīng)于2019年8月15日公布，2020年2月15日開始實(shí)施。有關(guān)檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)在資質(zhì)擴(kuò)項(xiàng)中，已經(jīng)或者即將擴(kuò)項(xiàng)。本文以該標(biāo)準(zhǔn)為例，分析了在有機(jī)磷殘留檢測過程中各不確定度分量來源，并對每一個(gè)不確定度分量進(jìn)行分析和評定，確定各相關(guān)的不確定度分量對最終檢測結(jié)果的總不確定度的影響。

關(guān)鍵詞：農(nóng)藥含量測定;氣相色譜法;不確定度

1 材料與方法

1.1 樣品及試樣制備

工作人員在該縣農(nóng)貿(mào)市場一交易量較大的批發(fā)攤位購買3 kg菠菜作為待檢樣品。樣品經(jīng)過登記后，在該實(shí)驗(yàn)室的內(nèi)部流轉(zhuǎn)編號為2020WJNP004，樣品取樣部位按GB2763-2019的規(guī)定執(zhí)行。取樣后全部處理，取后的樣品切碎，充分混勻，用四分法取樣或直接放入組織搗碎機(jī)中搗成勻漿，放入聚乙烯瓶中。

1.2 試劑等耗材

乙腈（色譜級），丙酮（色譜級），氯化鈉（優(yōu)級純）。甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)品：GBW（E）082602，100 μg/mL，相對不確定度4%（k=2），定值于2019年8月，有效期到2020年8月。100 mL比色管、0.22 μm濾頭、一次性注射器（5 mL）等若干。

1.3 檢驗(yàn)依據(jù)

GB 23200.116-2019《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中90種有機(jī)磷類農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜法》。

1.4 樣品提取

準(zhǔn)確稱取20 g粉碎好的試樣于100 mL平底離心管中，加入提取液40.00 mL，用均質(zhì)機(jī)15 000 r/min高速均質(zhì)2 min后，用定性濾紙濾入100 mL比色管中（比色管內(nèi)裝有7 g事先干燥至恒重的氯化鈉），蓋上塞子，劇烈振蕩2 min，在室溫下靜置30 min，使提取液與水層充分分層。準(zhǔn)確吸取10.00 mL上清液于100 mL燒杯中，80 ℃水浴中氮吹蒸發(fā)近干，加入2 mL丙酮溶解殘余物，蓋上鋁箔，備用。用丙酮分次洗入5.00 mL比色管中，定容后渦旋30 s，過0.22 μm有機(jī)相濾頭，待上機(jī)檢測。

1.5 儀器條件及結(jié)果計(jì)算方法

儀器：島津氣相色譜儀（GC2010Plus， FPD檢測器，配磷濾光片）。

儀器檢測條件設(shè)置：進(jìn)樣口：250 ℃;檢測器：300 ℃;柱溫箱：150 ℃（2 min）210℃（15 min），不分流進(jìn)樣;進(jìn)樣量1.0 μL。

丙酮稀釋成質(zhì)量濃度為0.005、0.01、0.05、0.1 mg/L和1 mg/L的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，參考色譜條件測定。以農(nóng)藥質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)、色譜的峰面積積分值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，以外標(biāo)法定量。同等條件下，將樣品注入色譜儀，將從工作站讀出的結(jié)果代入公式（1），計(jì)算樣品中甲拌磷的含量。

X=cy×V1×V3/m×V2（1）

式（1）中，X：樣品中甲拌磷含量（mg/kg）;cy：待測液中甲拌磷含量（μg/mL）;Vl：加入提取液總體積（mL）;V2：吸取的用于分析的提取液體積（mL）;V3：最終定容體積（mL）;m：稱取的樣品質(zhì)量（g）。

2 不確定度的分量來源、評定、合成

2.1 樣品均勻性引入的不確定度

樣品經(jīng)過高速均質(zhì)機(jī)均質(zhì)，因此由樣品均勻性引入的不確定度在此可忽略不計(jì)。

2.2 樣品稱量引入的不確定度

稱樣所用天平（Ⅱ級）經(jīng)檢定合格，最小分度值為0.01 g，準(zhǔn)確稱量m=25.01 g。該檢定證書給出：該天平在25 g時(shí)最大允許誤差為±0.01 g，則可以得出由天平稱量所引入的不確定度u（m）為（按照不確定度B類評定，采用均勻分布計(jì)算）：u（m）=0.05/=0.028 77g;則樣品稱量引入的不確定度urel=u（m）/m=0.115 5%。

2.3 標(biāo)物引入的不確定度

甲拌磷標(biāo)液濃度為100 μg/mL[GBW（E）082602，CAS：298-02-2]，購買于壇墨質(zhì)檢科技股份有限公司，證書給定的相對不確定度為4.0%（k=2），則標(biāo)準(zhǔn)品純度引入的不確定度為：urel2=4.0%/2=2.0%。

移取甲拌磷標(biāo)準(zhǔn)品單標(biāo)溶液0.1 mL

于10 mL容量瓶中，用丙酮定容。移液槍為艾本德（20～200）μL，其檢定證書給出100 μL時(shí)的最大允許誤差范圍為±1.5%，按均勻分布計(jì)算（B類評定），則：移液槍引入的相對不確定度urel（V110）=1.5%/=0.886 0%。

10 mL容量瓶（A級）示值誤差為±0.02 mL，按均勻分布計(jì)算（B類評定），則：10mL容量瓶定容所引入的相對不確定度為urel（V210）=（0.02/）/V10=0.115 5%。

則定容分散性引入的不確定度的測定：urel（V310）=0.1206%。

則標(biāo)物上機(jī)液引入的不確定度：

2.4 標(biāo)準(zhǔn)液測定峰面積引入的不確定度

儀器精密度很高，所以儀器穩(wěn)定性即測定值分散性是構(gòu)成峰面積測量不確定度的主要貢獻(xiàn)，儀器進(jìn)樣量及儀器示值誤差這里不必考慮。

標(biāo)準(zhǔn)液濃度Cb=0.947 968 μg/mL，則標(biāo)準(zhǔn)液測定峰面積引入的不確定度（A類評定）：

μg/mL

標(biāo)準(zhǔn)液測定峰面積引入的相對不確定度

2.5 相對不確定度的合成

通過上述分析，在有機(jī)磷農(nóng)藥檢測過程中，影響檢測結(jié)果的不確定度主要有樣品稱量、標(biāo)物、標(biāo)物上機(jī)液的制備以及標(biāo)準(zhǔn)液的測定，詳見表1。

2.6 測量結(jié)果的擴(kuò)展不確定度

取包含因子k=2，則擴(kuò)展不確定度：

urel=k×urel（X）=2.19%×2=4.38%

X=0.30 mg/kg，U=urel×X=0.013 mg/kg

樣品中的甲拌磷含量：X=（0.30±0.013）mg/kg（k=2）。

3 結(jié)論

（1）通過分析過程可以看出，按照標(biāo)準(zhǔn)給定的測量方法實(shí)際操作，本實(shí)驗(yàn)不確定度的主要來源是標(biāo)準(zhǔn)品。

（2）可以通過選用更高精度的標(biāo)準(zhǔn)品來降低不確定度，從而降低測量結(jié)果的不確定度，提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度。

（3）本次實(shí)驗(yàn)通過菠菜中甲拌磷殘留量檢測不確定度分析，合理簡化了評定氣相色譜法檢測蔬菜水果中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的測量不確定度的過程。本方法可作為用GB 23200.116-2019《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 植物源性食品中90種有機(jī)磷類農(nóng)藥及其代謝物殘留量的測定 氣相色譜法》或氣相色譜方法測定蔬菜水果中其它有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量的測量不確定度評定模板，供檢測同行參考。