復(fù)方麝香注射液聯(lián)合神經(jīng)節(jié)苷脂對(duì)彌散性軸索損傷大鼠神經(jīng)元凋亡的影響

宋國(guó)智 張學(xué)強(qiáng) 王霞 常成 陳建軍

摘要? 目的：探討復(fù)方麝香注射液聯(lián)合神經(jīng)節(jié)苷脂對(duì)彌散性軸索損傷（DAI）大鼠神經(jīng)元凋亡及神經(jīng)絲蛋白200（NF200）、生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43（GAP-43）、凋亡相關(guān)蛋白激酶1（DAPK1）表達(dá)的影響。方法：采用大鼠頭顱瞬間旋轉(zhuǎn)損傷裝置建立DAI大鼠模型。將成功建立的45只DAI大鼠隨機(jī)分為模型組、實(shí)驗(yàn)組和聯(lián)合組，每組15只;另選擇15只正常大鼠作為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組大鼠腹腔注射單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉[30 mg/（kg·d）]，聯(lián)合組大鼠腹腔注射單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉[30 mg/（kg·d）]+復(fù)方麝香注射液[2 mL/（kg·d）]，對(duì)照組與模型組腹腔注射等量生理鹽水，連續(xù)干預(yù)7 d。采用改良神經(jīng)功能缺損評(píng)分（mNSS）法評(píng)估各組大鼠的神經(jīng)功能缺損情況;采用蘇木精-伊紅（HE）染色觀察大鼠腦組織病理學(xué)變化;采用TdT介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記（TUNEL）檢測(cè)各組大鼠神經(jīng)元凋亡情況;采用蛋白質(zhì)免疫印跡（Wb）法檢測(cè)大鼠腦組織NF200、GAP-43與DAPK1蛋白表達(dá)。結(jié)果：干預(yù)第1～7天，模型組、聯(lián)合組與實(shí)驗(yàn)組大鼠mNSS評(píng)分均逐漸降低;與對(duì)照組比較，模型組大鼠第1～7天的mNSS評(píng)分均明顯升高，但聯(lián)合組與實(shí)驗(yàn)組低于模型組，聯(lián)合組低于實(shí)驗(yàn)組（ P <0.05）;與對(duì)照組比較，模型組大鼠神經(jīng)元凋亡指數(shù)及腦組織DAPK1蛋白相對(duì)表達(dá)量均明顯升高，且聯(lián)合組與實(shí)驗(yàn)組低于模型組，聯(lián)合組低于實(shí)驗(yàn)組（ P <0.05）;NF200、GAP-43蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯降低，且聯(lián)合組與實(shí)驗(yàn)組高于模型組，聯(lián)合組高于實(shí)驗(yàn)組（ P <0.05）。結(jié)論：復(fù)方麝香注射液聯(lián)合神經(jīng)節(jié)苷脂治療DAI可改善大鼠神經(jīng)功能缺損情況，抑制神經(jīng)元凋亡，改善神經(jīng)功能，其作用機(jī)制可能與上調(diào)腦組織NF200、GAP-43蛋白表達(dá)，下調(diào)DAPK1蛋白表達(dá)相關(guān)，且兩藥聯(lián)合使用效果更佳。

關(guān)鍵詞? 彌散性軸索損傷;單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂;復(fù)方麝香注射液;神經(jīng)元;凋亡;神經(jīng)絲蛋白200;生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43;凋亡相關(guān)蛋白激酶1

Effects of Compound Shexiang Injection Combined with Ganglioside on Neuronal Apoptosis in Rats with Diffuse Axonal Injury

SONG Guozhi1，ZHANG Xueqiang1，WANG Xia2，CHANG Cheng1，CHEN Jianjun1

（1 Handan Central Hospital，Handan 056001，China; 2 Handan First Hospital，Handan 056001，China）

Abstract Objective： To explore effects of Compound Shexiang Injection combined with ganglioside on neuronal apoptosis and expressions of neurofilament 200（NF200），growth-associated protein 43（GAP-43）and death-associated protein kinase 1（DAPK1）in rats with diffuse axonal injury（DAI）. Methods： DAI rat models were established using a rat skull transient rotation injury device.Forty-five DAI rats successfully established were randomly divided into model group，test group and combined group，with 15 rats in each group.Another 15 normal rats were selected as control group.Rats in the test group were intraperitoneally injected with monosialotetrahexosyl ganglioside sodium[30 mg/（kg·d）]，rats in the combined group were injected intraperitoneally with monosialotetrahexosyl ganglioside sodium（30 mg·kg-1·d-1）+Compound Shexiang Injection（2 mL·kg-1·d-1），and the model and control groups were injected intraperitoneally with the same amount of normal saline，for 7 d.Modified neurological severity score（mNSS）method was used to evaluate neurological deficits in each group of rats.Hematoxylin-eosin（HE）staining was used to observe pathological changes of brain tissue in rats.TdT-mediated dUTP Notch End Labeling（TUNEL）was used to detect neuronal apoptosis in each group of rats.Protein expressions of NF200，GAP-43 and DAPK1 in rat brain tissue were detected by Western blot（Wb）method. Results： From the 1st to 7th d of the intervention，the mNSS scores of rats in the model group，the combined group and the test group were gradually decreased.Compared with the control group，the mNSS scores of the rats in the model group were significantly increased from the 1st to 7th d，but those in the combined group and the test group were lower than those in the model group，and those in the combined group were lower than those in the test group（P < 0.05）.Compared with the control group，the neuronal apoptosis index and the relative expression of DAPK1 protein in brain tissue of rats in the model group were significantly increased，and those in the combined group and the test group were lower than those in the model group，and those in the combined group were lower than those in the test group（P < 0.05）.The relative expressions of NF200 and GAP-43 proteins were significantly decreased，and those in the combined group and the test group were higher than those in the model group，and those in the combined group were higher than those in the test group（P < 0.05）. Conclusion： Compound Shexiang Injection combined with ganglioside in the treatment of DAI can improve neurological deficits in rats，inhibit neuronal apoptosis，and improve neural function.Its mechanism of action may be related to up-regulation of NF200 and GAP-43 protein expressions in brain tissue and down-regulation of DAPK1 protein expression，and the combined use of the 2 drugs is more effective.

Keywords? Diffuse axonal injury; Monosialotetrahexosyl ganglioside; Compound Shexiang Injection; Neuron; Apoptosis; Neurofilament 200; Growth-associated protein 43; Death-associated protein kinase 1

中圖分類號(hào)：R285.5 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? doi： 10.3969/j.issn.1673-7202.2020.04.015

彌散性軸索損傷（Diffuse Axonal Injury，DAI）是頭部受到外力作用后發(fā)生成角或旋轉(zhuǎn)加/減速運(yùn)動(dòng)所造成的一種原發(fā)性腦實(shí)質(zhì)的損傷，以軸索損傷為主要改變，上腦干背外側(cè)象限局灶性出血、胼胝體局灶性出血和軸索的廣泛損害是其特征性病理改變，但由于目前其發(fā)病機(jī)制尚不明確，臨床尚無治療DAI的有效手段[1]。神經(jīng)節(jié)苷脂是一種酸性鞘糖脂，是臨床較常用的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)藥物之一，可維持細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和功能的完整性，但單獨(dú)使用修復(fù)受損神經(jīng)細(xì)胞的作用有限[2]。中醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為，DAI屬血瘀癥范疇，頭部暴力傷后，腦絡(luò)損傷，導(dǎo)致血流不暢，氣血逆亂，故傷后昏迷時(shí)間長(zhǎng)，治則以醒神開竅、活血化瘀為主[3]。復(fù)方麝香注射液是在安宮牛黃丸組方基礎(chǔ)上改制而成的水溶性注射液，具有行氣活血、清熱涼血及醒神止痙等功效，有擴(kuò)張血管、抗驚厥、鎮(zhèn)靜與興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用，臨床多用于治療神經(jīng)系統(tǒng)及腦血管疾病[4]。而目前復(fù)方麝香注射液聯(lián)合神經(jīng)節(jié)苷脂治療DAI尚未見報(bào)道，因此開展本研究，以期能夠?yàn)槠渑R床推廣應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 SPF級(jí)雄性SD大鼠，6周齡，體質(zhì)量200～220 g，購于上海靈暢生物科技有限公司，動(dòng)物生產(chǎn)合格證號(hào)為SCXK（滬）2018-0003。飼養(yǎng)環(huán)境與條件：上海靈暢生物科技有限公司屏障環(huán)境動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，每籠5只，溫度（25±2）℃，濕度（55±2）%，光照明暗時(shí)間比為12 h/12 h，自由獲取食物和水。

1.1.2 藥物 復(fù)方麝香注射液[神威藥業(yè)（四川）有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：19030331];單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉（北京賽升藥業(yè)股份有限公司，生產(chǎn)批號(hào)：20180112）。

1.1.3 試劑與儀器 TdT介導(dǎo)的dUTP缺口末端標(biāo)記（TUNEL）凋亡試劑盒（美國(guó)Promega公司，生產(chǎn)批號(hào)：200-664-3）;兔抗鼠神經(jīng)絲蛋白200（NF200）抗體（英國(guó)Abcam公司，生產(chǎn)批號(hào)：1392503Z）;兔抗鼠生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43（GAP-43）抗體（美國(guó)Santa Cruz公司，生產(chǎn)批號(hào)：PB11058）;兔抗鼠凋亡相關(guān)蛋白激酶1（DAPK1）抗體（美國(guó)Sigma公司，生產(chǎn)批號(hào)：L750N46）;石蠟切片機(jī)（上海三崴醫(yī)療設(shè)備有限公司，型號(hào)：HM340E型）;高速冷凍離心機(jī)（美國(guó)Beckman公司，型號(hào)：Couvter型）;光學(xué)顯微鏡（德國(guó)LEICA公司，型號(hào)：DM LB2型）;多功能酶標(biāo)儀（瑞士TECAN公司，型號(hào)：M200 PRO型）;分析軟件（美國(guó)Media Cybernetics公司，型號(hào)：Image-Pro Plus v6.0）等。

1.2 方法

1.2.1 分組與模型制備 采用大鼠頭顱瞬間旋轉(zhuǎn)損傷裝置建立DAI大鼠模型：按照2 mL/kg的劑量用100 g/L水合氯醛腹腔注射麻醉大鼠，將大鼠固定于旋轉(zhuǎn)損傷裝置，進(jìn)行大鼠頭顱沿冠狀面?zhèn)认蛐D(zhuǎn)90°的瞬間旋轉(zhuǎn)致傷，并快速制動(dòng)靜止。將成功建立的45只DAI大鼠隨機(jī)分為模型組、實(shí)驗(yàn)組及聯(lián)合組，每組15只，另選擇15只正常大鼠作為對(duì)照組[5]。

1.2.2 干預(yù)方法 實(shí)驗(yàn)組大鼠腹腔注射單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉[30 mg/（kg·d）]，聯(lián)合組大鼠腹腔注射單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂鈉[30 mg/（kg·d）]+復(fù)方麝香注射液[2 mL/（kg·d]，對(duì)照組與模型組腹腔注射等量生理鹽水，連續(xù)干預(yù)7 d。

1.2.3 檢測(cè)指標(biāo)與方法

1.2.3.1 改良神經(jīng)功能缺損評(píng)分（mNSS）法[6]評(píng)估各組大鼠的神經(jīng)功能缺損情況 各組大鼠于干預(yù)1、3、5、7 d采用mNSS法評(píng)估各組大鼠神經(jīng)功能缺損情況，主要包括：運(yùn)動(dòng)、感覺、平衡木及反射4項(xiàng)測(cè)試，記分為0～18分，分?jǐn)?shù)越高，表明腦損傷越嚴(yán)重。

1.2.3.2 蘇木精-伊紅（HE）染色[7]觀察大鼠腦組織病理學(xué)變化 干預(yù)第7天進(jìn)行mNSS評(píng)分后，采用頸椎脫臼法處死各組大鼠，解剖、采集大鼠腦組織，4%多聚甲醛固定24 h，經(jīng)脫水、包埋、切片（5 μm）等制作石蠟切片，行常規(guī)HE染色，光學(xué)顯微鏡下觀察各組大鼠腦組織病理學(xué)特點(diǎn)。

1.2.3.3 TUNEL法檢測(cè)大鼠神經(jīng)元凋亡情況 取石蠟切片，按照TUNEL凋亡試劑盒說明書提供的步驟進(jìn)行TUNEL染色[8]。于倒置熒光顯微鏡下觀察陽性細(xì)胞，即凋亡細(xì)胞，細(xì)胞核染為綠色為陽性細(xì)胞，每個(gè)標(biāo)本隨機(jī)選擇5個(gè)視野，計(jì)算細(xì)胞凋亡指數(shù)=陽性細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)×100%。

1.2.3.4 蛋白免疫印跡（Wb）法[9]檢測(cè)大鼠腦組織NF200、GAP-43與DAPK1蛋白表達(dá) 取-80 ℃保存的腦組織，加入裂解液勻漿，離心后取上清液，提取總蛋白，BCA法檢測(cè)蛋白濃度。取20 μg蛋白樣品上樣，進(jìn)行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS-PAGE），濕轉(zhuǎn)膜后封閉，加入1∶ 1 000稀釋的一抗NF200、GAP-43與DAPK1，4 ℃孵育過夜，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記二抗，室溫孵育2 h。采用Image-Pro Plus v6.0分析軟件進(jìn)行蛋白條帶的灰度值分析，以目的蛋白與內(nèi)參β-actin灰度值的比值作為目的蛋白的相對(duì)表達(dá)量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以 （ ±s） 表示，組間比較采用 t 檢驗(yàn)，以 P <0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠mNSS評(píng)分比較 干預(yù)第1～7天，模型組、聯(lián)合組與實(shí)驗(yàn)組大鼠mNSS評(píng)分均逐漸降低;與對(duì)照組比較，模型組大鼠第1～7天的mNSS評(píng)分均明顯升高，但聯(lián)合組與實(shí)驗(yàn)組低于模型組，聯(lián)合組低于實(shí)驗(yàn)組（ P <0.05）。見表1。

2.2 各組大鼠腦組織病理學(xué)變化 對(duì)照組大鼠腦組織結(jié)構(gòu)完整，未見異常，神經(jīng)元數(shù)量多，形態(tài)規(guī)則;模型組大鼠腦組織結(jié)構(gòu)疏松，間質(zhì)水腫，軸突出現(xiàn)斷裂變性，神經(jīng)元數(shù)量明顯減少，細(xì)胞皺縮、核深染，且大部分神經(jīng)元水腫并壞死;聯(lián)合組與實(shí)驗(yàn)組大鼠腦組織病變明顯改善，神經(jīng)元數(shù)量較模型組顯著增多，壞死程度減輕，神經(jīng)元形態(tài)趨于正常，且聯(lián)合組大鼠腦組織病變改善程度優(yōu)于實(shí)驗(yàn)組。見圖1。

2.3 各組大鼠神經(jīng)元凋亡情況 對(duì)照組、模型組、聯(lián)合組與實(shí)驗(yàn)組大鼠神經(jīng)元凋亡指數(shù)分別為 （8.64±3.21）%、（51.22±5.37）%、（16.84±4.22）%、（36.51±3.87）%。與對(duì)照組比較，模型組大鼠神經(jīng)元的凋亡指數(shù)明顯升高，且聯(lián)合組與實(shí)驗(yàn)組低于模型組，聯(lián)合組低于實(shí)驗(yàn)組（ P <0.05）。見圖2。

2.4 各組大鼠腦組織NF200、GAP-43與DAPK1蛋白表達(dá) 與對(duì)照組比較，模型組大鼠腦組織NF200、GAP-43蛋白相對(duì)表達(dá)量明顯降低，且聯(lián)合組與實(shí)驗(yàn)組高于模型組，聯(lián)合組高于實(shí)驗(yàn)組（ P <0.05）;模型組DAPK1蛋白相對(duì)表達(dá)量升高，且聯(lián)合組與實(shí)驗(yàn)組低于模型組，聯(lián)合組低于實(shí)驗(yàn)組（ P <0.05）。見表2，圖3。

3 討論

DAI是一種常見且危重的顱腦損傷，可導(dǎo)致選擇性大腦白質(zhì)軸突水腫、軸索斷裂等病理改變，以長(zhǎng)時(shí)間意識(shí)障礙為典型臨床表現(xiàn)，臨床診斷較困難且預(yù)后差[10-11]。神經(jīng)節(jié)苷脂是含唾液酸的一類膜糖脂的總稱，是組成細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)和維持膜功能的基本物質(zhì)，與軸突的生長(zhǎng)、突觸的形成及神經(jīng)元的分化等密切相關(guān)，已被廣泛用于臨床治療脊髓損傷、缺氧缺血性腦病、阿爾茲海默病及糖尿病周圍神經(jīng)病變等，但由于其單獨(dú)使用時(shí)療效有限，故常需與相應(yīng)藥物聯(lián)合使用[12]。中醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為，DAI是由于暴力引起人體內(nèi)部氣血經(jīng)絡(luò)臟腑受損或功能失調(diào)而產(chǎn)生一系列癥狀，屬頭部?jī)?nèi)傷。傷后氣機(jī)不利，閉塞機(jī)竅，致患者昏迷不醒;氣為血之帥，血為氣之母，氣血不調(diào)是百病發(fā)生的根本;傷血必致傷氣，先見氣滯，繼則見氣虛，嚴(yán)重者氣脫，瘀血經(jīng)久不散，損傷難愈，因此，顱腦損傷以氣虛血瘀多見。復(fù)方麝香注射液由石菖蒲、麝香、冰片、郁金、廣藿香、薄荷等主要成分組成，石菖蒲、廣藿香、薄荷芳香化濁、行氣化濕、辟穢止嘔，以解痰瘀熱邪諸毒，醒神益智;麝香善于走竄，活血、行氣止痛、開竅醒腦，為醒神回蘇之要藥;冰片有清熱解毒、消腫止痛、去翳明目、通諸竅的功效;郁金疏脾解郁、活血化瘀、清心開竅，全方具有祛痰開竊、醒腦安神之功效，同時(shí)也可降低血腦屏障通透性，縮短昏迷時(shí)間，減輕腦水腫，改善腦供血、供氧等[13]。藥理研究[14]表明，石菖蒲具有調(diào)節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、消化系統(tǒng)與內(nèi)分泌系統(tǒng)功能的作用;麝香為通關(guān)利竅之藥，可顯著減輕腦水腫、改善血液流變性及細(xì)胞聚集、抑制炎性反應(yīng)早期的滲出性水腫等;郁金可改善缺血周圍半暗帶的微循環(huán)和血液流變黏稠度。有研究[15]報(bào)道，復(fù)方麝香注射液治療早期高血壓性腦出血患者，臨床療效顯著，可促進(jìn)患者神經(jīng)功能恢復(fù)，提高其日常生活能力，利于預(yù)后，值得臨床推廣使用。本研究結(jié)果顯示，聯(lián)合組與實(shí)驗(yàn)組大鼠第1～7天的mNSS評(píng)分明顯低于模型組，且聯(lián)合組低于實(shí)驗(yàn)組，提示復(fù)方麝香注射液與神經(jīng)節(jié)苷脂治療DAI均可改善神經(jīng)功能缺損情況，緩解病情，且兩藥聯(lián)合使用效果更佳。

DAPK1在腦外傷、腦缺血等信號(hào)刺激下被激活，可通過多種途徑介導(dǎo)神經(jīng)元損傷、死亡，損害神經(jīng)功能;當(dāng)顱腦損傷時(shí)，神經(jīng)元細(xì)胞可大量合成NF200，NF200進(jìn)而發(fā)揮促進(jìn)神經(jīng)元功能修復(fù)與神經(jīng)軸突再生的作用;GAP-43具有促進(jìn)神經(jīng)發(fā)育、軸突再生與突觸重建等作用[16]。有研究[17]顯示，凋亡相關(guān)蛋白DAPK1可致腦缺血損傷后神經(jīng)元細(xì)胞凋亡，從而損傷腦神經(jīng)組織，破壞神經(jīng)功能。有研究[18]顯示，參芎葡萄糖注射液可促進(jìn)損傷脊髓的功能恢復(fù)，其機(jī)制可能與上調(diào)損傷區(qū)脊髓GAP-43、NF200表達(dá)有關(guān)。李振華等[19]研究發(fā)現(xiàn)，神經(jīng)節(jié)苷脂治療急性脊髓損傷大鼠，可改善脊髓損傷程度，緩解運(yùn)動(dòng)障礙，其機(jī)制可能與上調(diào)B淋巴細(xì)胞瘤-2（Bcl-2）表達(dá)，抑制神經(jīng)元凋亡有關(guān)。目前尚無關(guān)于復(fù)方麝香注射液或神經(jīng)節(jié)苷脂對(duì)NF200、GAP-43、DAPK1作用的相關(guān)報(bào)道，本研究結(jié)果顯示，聯(lián)合組與實(shí)驗(yàn)組大鼠神經(jīng)元凋亡指數(shù)及腦組織DAPK1蛋白相對(duì)表達(dá)量均低于模型組，NF200、GAP-43蛋白相對(duì)表達(dá)量高于模型組，提示復(fù)方麝香注射液與神經(jīng)節(jié)苷脂治療DAI均可抑制神經(jīng)元凋亡，上調(diào)腦組織NF200、GAP-43蛋白表達(dá)，同時(shí)下調(diào)DAPK1蛋白表達(dá)，從而保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞，改善神經(jīng)功能。

綜上所述，復(fù)方麝香注射液聯(lián)合神經(jīng)節(jié)苷脂治療DAI可改善大鼠神經(jīng)功能缺損情況，抑制神經(jīng)元凋亡，上調(diào)腦組織NF200、GAP-43蛋白表達(dá)，同時(shí)下調(diào)DAPK1蛋白表達(dá)，從而保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞，改善神經(jīng)功能，且兩藥聯(lián)合使用具有協(xié)同作用，這為臨床治療DAI提供了新方向，也為復(fù)方麝香注射液與神經(jīng)節(jié)苷脂的推廣應(yīng)用提供了理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1] Benson C.Diffuse Axonal Injury[J].Encyclop Neurolog Sci，2014，24（1）：998-999.

[2]尹立國(guó)，王金林，張中原，等.腦創(chuàng)傷后依達(dá)拉奉聯(lián)合單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂對(duì)大鼠神經(jīng)行為學(xué)影響的近期觀察[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2014，18（10）：1594-1596.

[3]周路橋，羅富強(qiáng)，彭虎，等.中西醫(yī)結(jié)合治療彌漫性軸索損傷31例臨床研究[J].中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2014，3（2）：24-27.

[4]宋紀(jì)寧，梁日晶，薛振生.復(fù)方麝香注射液治療高血壓性腦出血300例[J].陜西中醫(yī)，2014，35（6）：663-664.

[5]李宇，宋錦寧，張明，等.PLC及IP3R拮抗劑對(duì)彌漫性軸索損傷后繼發(fā)性腦損傷的治療作用[J].西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2015，36（1）：28-33.

[6]李丹東，宋錦寧，龐宏剛，等.Rho/ROCK通路在大鼠實(shí)驗(yàn)性彌漫性軸索損傷中的作用[J].西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2015，36（1）：16-22.

[7]龐宏剛，宋錦寧，李丹東，等.SDF-1α/CXCR4通路在大鼠彌漫性軸索損傷中的作用[J].西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2015，36（1）：40-44.

[8]張明，宋錦寧，李宇，等.高表達(dá)瞬時(shí)電位受體通道1在大鼠彌漫性軸索損傷中的作用機(jī)制[J].西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2014，35（6）：740-746，773.

[9]黃廷欽，宋錦寧，李宇，等.FK506對(duì)大鼠彌漫性軸索損傷后神經(jīng)元凋亡及軸突再生相關(guān)蛋白表達(dá)的影響[J].西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)： 醫(yī)學(xué)版，2015，36（1）：45-53.

[10] Su E，Bell M.Diffuse Axonal Injury[J].Med J Arm Force India，2016，62（3）：277-279.

[11]Soltani Z，Shahrokhi N，Karamouzian S，et al.Does progesterone improve outcome in diffuse axonal injury？[J].Brain Inj，2017，31（1）：16-23.

[12]李?yuàn)檴?單唾液酸四己糖神經(jīng)節(jié)苷脂治療成年缺氧缺血性腦損傷的臨床療效[J].貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，42（8）：983-986.

[13]李亮，何家俊，黃山林.高壓氧聯(lián)合復(fù)方麝香注射液治療彌漫性軸索損傷的臨床效果觀察[J].中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥，2017，24（10）：39-41.

[14]龐亞平.復(fù)方麝香注射液用于重型顱腦損傷80例的療效觀察及護(hù)理體會(huì)[J].中國(guó)藥業(yè)，2014，23（10）：81-81，82.

[15]梁紅英，裴華，樊紅翠.復(fù)方麝香注射液治療早期高血壓性腦出血患者的療效及對(duì)神經(jīng)功能的影響[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)刊，2018，45（22）：119-121，124.

[16]Huang TQ，Song JN，Zheng FW，et al.Protection of FK506 against neuronal apoptosis and axonal injury following experimental diffuse axonal injury[J].Mol Med Rep，2017，15（5）：3001-3010.

[17]Qiao X，Yang X，Zhou Y，et al.Characterization of DAPK1 as a novel transcriptional target of BRMS1[J].Int J Oncol，2017，50（5）：1760-1766.

[18]吳銀俠，陳新勝，袁小燕，等.參芎葡萄糖注射液對(duì)脊髓損傷后運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)及GAP-43和NF200表達(dá)的影響[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2014，24（2）：44-49.

[19]李振華，吳東梅，王景續(xù)，等.神經(jīng)節(jié)苷脂對(duì)急性脊髓損傷大鼠Bcl-2表達(dá)的影響[J].解剖科學(xué)進(jìn)展，2015，21（6）：632-634.

（2020-02-05收稿 責(zé)任編輯：王明）

基金項(xiàng)目：河北省2016年度醫(yī)學(xué)科學(xué)研究重點(diǎn)課題計(jì)劃項(xiàng)目（20160027）作者簡(jiǎn)介：宋國(guó)智（1969.06—），男，碩士研究生，主任醫(yī)師，研究方向：神經(jīng)外科方向，E-mail：15631008622@163.com