李銀珍 杜日昌 丁宇 徐彤 廖羅飛
肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌是起源于二級膽管及膽管末梢系統(tǒng)的一種惡性腫瘤,在原發(fā)性肝癌中占比達(dá)到10~15%[1]。有研究指出在肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌中,表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)陽性表達(dá)明顯,可能有與鑒別良性、惡性病變、肝癌分期等相關(guān)[2]。人表皮生長因子受體-2(human epidermal frowth factor receptor 2, Her-2)近年被作為腫瘤靶向治療的重要靶點(diǎn)之一,其表達(dá)亦可能與預(yù)后相關(guān)[3]。本次研究嘗試對肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌患者進(jìn)行(EGFR)、Her-2檢測,并結(jié)合其臨床信息探討EGFR、Her-2在肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌預(yù)后評估中的價(jià)值,現(xiàn)報(bào)道如下。
回顧性分析我院2009年1月—2017年12月收治的77例肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌患者的臨床資料,依據(jù)患者預(yù)后情況分為預(yù)后良好組35例與預(yù)后不良組42例(生存時(shí)間≥1年為預(yù)后良好,生存時(shí)間<1年為預(yù)后不良)。其中男45例,女32例;>60歲者44例;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移50例;腫瘤直徑>5cm 37例;腫瘤數(shù)目:單發(fā)53例,多發(fā)24例;TNM分期:Ⅰ或Ⅱ級37例,Ⅲ或Ⅳ級40例。本次研究經(jīng)我院倫理委員會批準(zhǔn)后實(shí)施。
1. 納入標(biāo)準(zhǔn):①均經(jīng)超聲等影像學(xué)檢查及病理學(xué)檢查確診為肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌;②35~75歲;③臨床資料完善。
2. 排除標(biāo)準(zhǔn):①預(yù)計(jì)生存時(shí)間<3個(gè)月;②伴有膽管結(jié)石、血吸蟲病等其他疾?。虎郯橛袊?yán)重心腦血管疾病者;④入院前伴有其他惡性腫瘤。
所有患者均于我院行根治性手術(shù)治療;術(shù)前抽取清晨空腹靜脈血7mL,離心后檢測乙肝病毒基因(HBV-DNA)、甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、總膽紅素(TBil)水平;術(shù)后選取切除組織常規(guī)石蠟包埋后制成3 μm厚的連續(xù)切片,經(jīng)免疫組化染色后檢測EGFR、Her-2蛋白表達(dá)情況;單因素分析肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌患者預(yù)后情況與性別、年齡、腫瘤數(shù)目、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤直徑、TNM分期、HBV DNA、AFP、CEA、TBil、EGFR、Her-2間的關(guān)系,同時(shí)將有差異的信息納入logistic模型行多因素分析。
HBV DNA使用7500美國ABI基因擴(kuò)增分析儀以PCR法檢測;AFP使用羅氏601型電化學(xué)發(fā)光儀檢測,試劑盒由上海羅氏診斷產(chǎn)品有限公司生產(chǎn),當(dāng)AFP>20 ng/mL時(shí)判定為陽性;CEA以電化學(xué)發(fā)光法檢測,試劑盒由羅氏公司生產(chǎn),當(dāng)CEA>5 ng/mL時(shí)判定為陽性;TBil使用日立全自動生化分析儀以速率法檢測,試劑盒由中生北控科技股份有限公司生產(chǎn),當(dāng)TBil>20 μmol/L判定為陽性。EGFR、Her-2所用一抗購自羅氏診斷,使用羅氏VENTANA全自動免疫組化儀進(jìn)行檢測。
石蠟切片嚴(yán)格按照一抗說明書進(jìn)行免疫組化染色,結(jié)果判定由兩位高年資病理醫(yī)師以盲評法閱片后得出。
EGFR、Her-2免疫組化結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn):0級為細(xì)胞無染色,1+為癌細(xì)胞的任意部分中微弱的細(xì)胞膜部分染色,2+為完整細(xì)胞膜弱染色>癌細(xì)胞的10%,3+為完整細(xì)胞膜強(qiáng)染色>癌細(xì)胞的10%。0級和1+判為陰性,2+判為不確定,3+判為陽性。對2+的標(biāo)本用FISH的方法進(jìn)行陰陽性的確認(rèn)。0級為細(xì)胞無染色,1+為癌細(xì)胞的任意部分中微弱的細(xì)胞膜部分染色,2+為完整細(xì)胞膜弱染色>癌細(xì)胞的10%,3+為完整細(xì)胞膜強(qiáng)染色>癌細(xì)胞的10%。0級和1+判為陰性,3+判為陽性。
經(jīng)單因素分析,預(yù)后不良組:淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期Ⅲ或Ⅳ級、EGFR陽性、Her-2陽性患者顯著多于預(yù)后良好組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。
將有差異的信息納入多因素logistic回歸分析模型,并行量化賦值,見表2,結(jié)果指出淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期Ⅲ或Ⅳ級、EGFR陽性、Her-2陽性是肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌患者預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見表3。
表1 患者預(yù)后情況與基礎(chǔ)資料、實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)間的關(guān)系 [n(%)]
表2 肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌患者預(yù)后不良的多因素logistic回歸分析
本研究結(jié)果顯示,預(yù)后不良組淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期Ⅲ或Ⅳ級、EGFR陽性、Her-2陽性患者顯著多于預(yù)后良好組,表明淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期Ⅲ或Ⅳ級、EGFR陽性、Her-2陽性可能對患者預(yù)后產(chǎn)生不良影響。牛福勇等[4]研究膽管細(xì)胞癌患者預(yù)后的影響因素時(shí)指出淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期與膽管細(xì)胞癌的預(yù)后密切相關(guān),與本次研究結(jié)果基本相符。本次研究中預(yù)后不良組EGFR陽性、Her-2陽性患者顯著多于預(yù)后良好患者,筆者分析具體原因如下:①EGFR具有酪氨酸激酶活性,具有促進(jìn)細(xì)胞分裂、增殖的作用,而腫瘤生長則是不斷繁殖、浸潤的過程[5-6],當(dāng)患者EGFR為陽性時(shí)體內(nèi)EGFR呈高表達(dá),可能促使腫瘤細(xì)胞繁殖,加劇腫瘤細(xì)胞的浸潤,影響患者預(yù)后。
經(jīng)多因素logistic回歸分析證實(shí)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期Ⅲ或Ⅳ級、EGFR陽性、Her-2陽性是肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌患者預(yù)后不良的危險(xiǎn)因素,可見EGFR、Her-2在肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌患者的預(yù)后評估具有重要的意義。另外本次研究仍存在不足,如受樣本量限制納入研究對象較少,可能對本次研究結(jié)果的推廣產(chǎn)生一定影響,因此后期仍期待擴(kuò)大樣本量繼續(xù)深入研究,為肝內(nèi)膽管細(xì)胞癌的治療及預(yù)后評估提供更充實(shí)、可靠的臨床依據(jù)。