淋巴細(xì)胞亞群、hs-CRP、TGF-β1水平與兒童原發(fā)性腎病綜合征預(yù)后的關(guān)系研究

壽曉霞,劉佳誼

(內(nèi)蒙古醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院：1.兒科；2.檢驗(yàn)科，內(nèi)蒙古呼和浩特 010050)

原發(fā)性腎病綜合征(PNS)是兒童常見腎臟疾病，其發(fā)病率僅次于急性腎炎[1]。PNS以水腫、高脂血癥、大量蛋白尿和低蛋白血癥為主要臨床表現(xiàn)，目前一般采用激素類藥物治療該病，但治療后預(yù)后較差，易反復(fù)發(fā)作。有學(xué)者認(rèn)為，若能找到特異性的指標(biāo)，對PNS進(jìn)行有效的預(yù)后評估，針對預(yù)后較差的患者進(jìn)行密切隨訪，早期干預(yù)，對于改善預(yù)后、減少復(fù)發(fā)具有重要意義[2]。有研究發(fā)現(xiàn)，PNS發(fā)病與炎癥介質(zhì)和細(xì)胞免疫功能紊亂有關(guān)，而淋巴細(xì)胞亞群參與機(jī)體免疫反應(yīng)，提示其可應(yīng)用于PNS的預(yù)后風(fēng)險評估[3]。轉(zhuǎn)化生長因子-β1(TGF-β1)能引起腎臟纖維化，超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)是炎性反應(yīng)標(biāo)志物，二者在PNS的疾病進(jìn)展中發(fā)揮著一定作用，但目前關(guān)于hs-CRP、TGF-β1在PNS患兒預(yù)后風(fēng)險評估應(yīng)用中的研究較少[4]。因此，本研究探討了淋巴細(xì)胞亞群(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+)、hs-CRP、TGF-β1與PNS患兒預(yù)后的關(guān)系，旨在為臨床預(yù)后評估提供依據(jù)，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年6月至2018年12月本院兒科收治的PNS患兒110例作為研究組，同期60例體檢健康兒童作為對照組。研究組男75例，女35例，平均年齡(8.64±2.54)歲；預(yù)后良好60例，預(yù)后不良50例。對照組男32例，女28例；平均年齡(8.53±2.42)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合中華醫(yī)學(xué)會兒科學(xué)分會腎臟病學(xué)組《兒童常見腎臟疾病診治循證指南》中PNS的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，尿蛋白定性陽性，且24 h尿蛋白定量>3.5 g，血漿清蛋白<30 g/L，膽固醇>5.7 mmol/L，有不同程度水腫；(2)未經(jīng)激素類藥物治療的初診患兒。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并其他過敏性疾??；(2)合并惡性腫瘤；(3)臨床資料不完整；(4)病情危重，生命體征不平穩(wěn)。研究組與對照組性別、年齡等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，有可比性。本研究經(jīng)本院倫理委員會批準(zhǔn)，所有研究對象家屬均簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1治療方法 研究組患兒確診PNS后，給予利尿，調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)與酸堿平衡治療，同時給予醋酸潑尼松片(天津天藥藥業(yè)股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H12020689)起始量2 mg/(kg·d)，每日最大劑量不超過40 mg，晨起口服。監(jiān)測患兒尿蛋白、24 h尿蛋白定量、血脂水平，觀察患兒臨床癥狀(包括尿量、水腫情況、食欲、一般狀態(tài)等)。根據(jù)病情將醋酸潑尼松片逐漸減量，改為隔日頓服，每2周減2.5 mg，最終可減至10.0 mg/d維持治療。維持治療28 d后，依據(jù)患兒疾病恢復(fù)情況逐漸減量到停藥。隨訪時間：患兒一般狀態(tài)好轉(zhuǎn)，水腫消退后可出院，出院后每3周到門診隨訪1次；病情穩(wěn)定者激素維持治療期間可每5周到門診隨訪1次；停藥后可每25周到門診隨訪1次，直至隨訪1年。隨訪期間收集患兒的臨床資料，包括身高、體質(zhì)量、病程、住院時間、尿蛋白轉(zhuǎn)陰時間及實(shí)驗(yàn)室相關(guān)指標(biāo)。

1.2.2檢測方法 抽取5 mL靜脈血，置于真空采血管中，采用JIDI-5D型低速離心機(jī)(廣州吉迪儀器有限公司)分離血清，置于-70 ℃冰箱保存?zhèn)溆?。采用酶?lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測hs-CRP、TGF-β1水平，儀器為南京基蛋生物科技股份有限公司生產(chǎn)的CM800型全自動生化分析儀;采用中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)的ZS-BFA流式細(xì)胞儀檢測淋巴細(xì)胞亞群，包括CD3+、CD4+、CD4+/CD8+，試劑盒購自中生北控生物科技股份有限公司，所有操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。

1.3觀察指標(biāo) 比較研究組(治療前)與對照組的淋巴細(xì)胞亞群、hs-CRP、TGF-β1水平。分析影響PNS患兒預(yù)后的獨(dú)立危險因素，預(yù)后良好判斷標(biāo)準(zhǔn)：臨床癥狀全部消失，尿蛋白轉(zhuǎn)陰，血漿清蛋白正常，血脂正常，反復(fù)多次檢查結(jié)果均正常，且患兒未再次出現(xiàn)尿中有泡沫、食欲減退、肢體水腫等癥狀；預(yù)后不良判斷標(biāo)準(zhǔn)：臨床癥狀未消失，且患兒病情反復(fù)，實(shí)驗(yàn)室檢查提示蛋白尿、高脂血癥、低蛋白血癥等。分析淋巴細(xì)胞亞群、hs-CRP、TGF-β1單獨(dú)及聯(lián)合檢測對PNS預(yù)后的預(yù)測價值。

2 結(jié) 果

2.1研究組與對照組淋巴細(xì)胞亞群、hs-CRP、TGF-β1水平比較 研究組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；研究組hs-CRP、TGF-β1水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。見表1。

表1 研究組與對照組淋巴細(xì)胞亞群、hs-CRP、TGF-β1水平比較

2.2影響PNS預(yù)后的單因素分析 單因素分析結(jié)果顯示，性別、年齡、身高、體質(zhì)量、病程、住院時間與PNS預(yù)后無關(guān)(P>0.05)；CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、hs-CRP、TGF-β1、尿蛋白轉(zhuǎn)陰時間是PNS預(yù)后的影響因素(P<0.05)。見表2。

2.3影響PNS預(yù)后的多因素Logistic回歸分析 將單因素分析中的影響因素(CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、hs-CRP、TGF-β1、尿蛋白轉(zhuǎn)陰時間)納入多因素Logistic回歸分析模型。結(jié)果顯示，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、TGF-β1、hs-CRP是影響PNS預(yù)后的獨(dú)立危險因素(P<0.05)。見表3。

2.4淋巴細(xì)胞亞群、hs-CRP、TGF-β1單獨(dú)及聯(lián)合檢測對PNS預(yù)后的預(yù)測價值 ROC曲線分析結(jié)果顯示，TGF-β1預(yù)測PNS預(yù)后的靈敏度最高，為98.0%，hs-CRP預(yù)測PNS預(yù)后的特異度最高，為100.0%。CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、hs-CRP及TGF-β1 5項(xiàng)聯(lián)合檢測的曲線下面積(AUC)為0.985，高于各項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測。見圖1、表4。

表2 影響PNS預(yù)后的單因素分析

表3 影響PNS預(yù)后的多因素Logistic回歸分析

圖1 淋巴細(xì)胞亞群、hs-CRP、TGF-β1單獨(dú)及聯(lián)合檢測預(yù)測PNS預(yù)后的ROC曲線

表4 淋巴細(xì)胞亞群、hs-CRP、TGF-β1聯(lián)合檢測對PNS預(yù)后的預(yù)測價值

注：—為無數(shù)據(jù)。

3 討 論

PNS是一種臨床常見腎臟疾病，為多種原因所導(dǎo)致的腎小球?yàn)V過膜通透性改變，大量蛋白從尿液排出，血漿清蛋白水平下降。目前，臨床上主要應(yīng)用激素治療PNS，但治療后極易復(fù)發(fā)，最終導(dǎo)致患兒病程延長，免疫力低下，嚴(yán)重影響患兒預(yù)后。近年來，隨著醫(yī)療技術(shù)水平的不斷提高，ARUMUGAM等[6]研究發(fā)現(xiàn)，找出靈敏度、特異度高的標(biāo)志物，對PNS預(yù)后進(jìn)行早期評估，并采取有效的措施，對減少患兒機(jī)體受損，提高治療效果有重要價值。因此，本研究探討了淋巴細(xì)胞亞群、hs-CRP、TGF-β1水平與PNS預(yù)后的關(guān)系，以期為臨床預(yù)后判斷提供依據(jù)。

PNS為免疫系統(tǒng)紊亂及炎性反應(yīng)相關(guān)性疾病，與淋巴細(xì)胞亞群、細(xì)胞炎癥因子、生長因子有關(guān)[7]。淋巴細(xì)胞亞群是機(jī)體免疫系統(tǒng)內(nèi)功能最強(qiáng)的一群細(xì)胞，可維持機(jī)體正常免疫功能。其中CD4+與CD8+具有輔助和抑制作用，可形成細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)來維持機(jī)體免疫系統(tǒng)平衡，二者水平下降和升高都可影響機(jī)體免疫功能[8-9]。本研究發(fā)現(xiàn)，研究組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平均低于對照組(P<0.05)；CD3+、CD4+、CD4+/CD8+是影響PNS預(yù)后的獨(dú)立危險因素(P<0.05)，與ABEDINI[10]的研究結(jié)果一致，提示淋巴細(xì)胞亞群水平在PNS患兒中明顯降低，可能與疾病的發(fā)生、發(fā)展和預(yù)后有關(guān)。

TGF-β1能作用于腎臟，通過纖維化因子調(diào)節(jié)細(xì)胞生長、分化，增加細(xì)胞基質(zhì)分泌，誘導(dǎo)酶原激活抑制物產(chǎn)生等引起腎臟纖維化，最終導(dǎo)致腎小球硬化[11]。本研究中，研究組TGF-β1水平高于對照組(P<0.05)；TGF-β1是影響PNS預(yù)后的獨(dú)立危險因素(P<0.05)，提示TGF-β1水平與PNS的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有關(guān)。hs-CRP為特異性炎性反應(yīng)標(biāo)志物，是機(jī)體在炎性反應(yīng)出現(xiàn)時大量合成的急性時相反應(yīng)蛋白，可釋放到局部組織并有效控制炎性反應(yīng)[12]。以往研究顯示，PNS患兒病情發(fā)展與hs-CRP水平呈正相關(guān)，即PNS病情越嚴(yán)重，hs-CRP水平越高[13]。本研究中，研究組hs-CRP水平高于對照組(P<0.05)；hs-CRP是影響PNS預(yù)后的獨(dú)立危險因素(P<0.05)，提示hs-CRP與PNS的發(fā)生、發(fā)展有關(guān)，且可用于評估患兒預(yù)后。有研究發(fā)現(xiàn)，尿蛋白轉(zhuǎn)陰時間>7 d的患者預(yù)后較≤7 d的患者差，提示尿蛋白轉(zhuǎn)陰時間可影響PNS的預(yù)后[14]。本研究中，尿蛋白轉(zhuǎn)陰時間是影響PNS患兒預(yù)后的危險因素，與上述研究結(jié)果類似，但多因素Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，尿蛋白轉(zhuǎn)陰時間并不是影響PNS患兒預(yù)后的獨(dú)立危險因素。

采用ROC曲線進(jìn)一步分析淋巴細(xì)胞亞群、hs-CRP、TGF-β1單獨(dú)及聯(lián)合檢測對PNS預(yù)后的預(yù)測價值，發(fā)現(xiàn)聯(lián)合檢測對PNS患兒預(yù)后的預(yù)測價值明顯優(yōu)于各項(xiàng)指標(biāo)單獨(dú)檢測，提示臨床可將淋巴細(xì)胞亞群、hs-CRP、TGF-β1聯(lián)合檢測作為監(jiān)測PNS病情發(fā)展及預(yù)后的重要評估指標(biāo)。

4 結(jié) 論

綜上所述，淋巴細(xì)胞亞群、hs-CRP、TGF-β1水平與PNS的預(yù)后密切相關(guān)，聯(lián)合檢測對PNS患兒的預(yù)后評估具有一定價值，能有效指導(dǎo)PNS患兒的臨床管理。