韓英明孫秋艷范作良袁東芳
調(diào)查報(bào)告
2016-2018年山東省部分地區(qū)豬流行性腹瀉流行病學(xué)調(diào)查
韓英明孫秋艷 范作良 袁東芳
(山東省萊州市土山畜牧獸醫(yī)站 261400) (山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院 山東 濰坊)
為了解山東豬流行性腹瀉(PED)病流行情況,對(duì)2016-2018年山東省部分地區(qū)發(fā)病豬病的876份樣品進(jìn)行PED病毒(PEDV)的RT-PCR檢測(cè),共鑒定出92份PEDV陽性樣品,通過從時(shí)間、區(qū)域、豬群日齡等方面進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示:PEDV檢出率為10.5%,其中單純感染檢出率為7.6%,混合感染檢出率為2.9%;不同地區(qū)間PEDV檢出率存在差異,差異率為5.71%~15.7%;每年的1~2月份是該病高發(fā)季節(jié);該病易感豬的日齡為1~70d(檢出率為18.5%~42.4%),1~28d是該病最易感日齡,大于270d豬PEDV未檢出;肉用型豬群檢出率為11.7%,種用型檢出率為7.6%,表明肉用豬和種用豬均有可能感染PEDV。本研究通過對(duì)山東省部分地區(qū)PEDV流行病學(xué)調(diào)查,為山東省大型養(yǎng)豬場(chǎng)有效防控PED提供科學(xué)依據(jù)。
豬流行性腹瀉(PED)是由冠狀病毒科、冠狀病毒屬中的豬流行性腹瀉病毒(PEDV)引起的一種高度接觸性腸道傳染病[1, 2]。病毒主要侵害豬的消化系統(tǒng),呈現(xiàn)嘔吐、腹瀉和脫水等臨床癥狀[3, 4]。研究發(fā)現(xiàn),不同地區(qū)、不同年齡、不同品種豬都能感染發(fā)病,尤其以哺乳仔豬最為嚴(yán)重[5]。我國自2010年以來,PEDV感染出現(xiàn)大面積暴發(fā),近些年P(guān)EDV與豬傳染性胃腸炎病毒(PEDV)、豬輪狀病(PRTV)混合感染的趨勢(shì)日益加劇,給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重危害[6]。本研究采集2016-2018年山東省濰坊市、青島、煙臺(tái)市等16個(gè)地區(qū)規(guī)?;B(yǎng)豬場(chǎng)病料樣品,通過一步法RT-PCR試驗(yàn)進(jìn)行鑒定,并對(duì)檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,了解3年來山東省規(guī)?;B(yǎng)豬場(chǎng)不同地區(qū)、不同月份、不同日齡、不同品種的豬群PED流行規(guī)律,為山東省大型養(yǎng)豬場(chǎng)有效防控PED提供科學(xué)依據(jù)。
1.1 病料樣品來源 876份病料樣品來自2016年-2018年采集自山東省濰坊市、煙臺(tái)市、威海市、青島、日照市、東營市、濟(jì)南市、泰安市、棗莊市、德州市、淄博市、聊城市、菏澤市、濱州市、濟(jì)寧市、臨沂市16個(gè)地區(qū)的規(guī)?;B(yǎng)豬場(chǎng),以及客戶送檢病料樣品,并對(duì)每份樣品記錄豬的品種、發(fā)病季節(jié)、日齡等。
1.2 主要試劑 動(dòng)物疫病基因診斷試劑盒,購自山東綠都生物技術(shù)有限公司,該試劑盒是高效合成和擴(kuò)增的一步法RT-PCR通用試劑盒,根據(jù)檢測(cè)病毒的需要,購買該公司該病毒相應(yīng)的引物即可。各病毒PCR擴(kuò)增片段長(zhǎng)度見表1。
表1 各病毒PCR擴(kuò)增片段長(zhǎng)度
1.3 病料樣品處理 將采集的病死豬的小腸、結(jié)腸樣品用生理鹽水1:5稀釋研磨,反復(fù)凍融3次,9000r/min離心30min,取上清液,-20℃保存。
1.4 RT-PCR的鑒定 按照動(dòng)物疫病基因診斷試劑盒說明書操作,鑒定各病料樣品中病毒。
1.5 數(shù)據(jù)處理 利用SPSS Statistics 19.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,多重比較采用LSD法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
2.1 單純感染PEDV檢出率 從山東省16個(gè)地區(qū)采集的876份病料樣品中,共檢出單純感染病毒性疾病600份,其中單純感染PEDV的病料樣品67份,檢出率為11.2%。其中PRRSV、PCV檢出率極顯著高于其它病毒性傳染病(P<0.01),見表2,因此PEDV可以單獨(dú)致病。
2.2 混合感染PEDV檢出率 876份病料樣品中,共檢出混合感染病毒性疾病71份,其中混合感染PEDV的病料樣品25份,檢出率為28.5%?;旌细腥局饕荘EDV+TEGV,檢出率為21.1%;PEDV+PRTV和PEDV+PCV,檢出率均為4.2%;PEDV+TGEV+PRTV,檢出率為2.8%;PEDV +PRRSV,檢出率為2.8%。PRRSV+PCV檢出率極顯著高于其它病毒性傳染病(P<0.01),檢出率為64.8%(見表3),PEDV能與其它病原混合感染。
2.3 PEDV的檢出情況 876份病料樣品中,PEDV的檢出率為5.71%~15.7%。不同地區(qū)PEDV檢出率差別較大,濰坊市PEDV檢出率顯著高于其他地區(qū)(P<0.05);威海市PEDV檢出率顯著低于其它地區(qū)(P<0.05),見表4。
2.4 不同年份PEDV的流行情況 876份病料樣品檢測(cè)顯示,2016-2018年單純感染PEDV陽性率從9.8%降到5.5%,不同年間PEDV陽性率差異顯著(P<0.05);混合感染PEDV陽性率從4.3%降到2.3%,2016年度PEDV陽性率顯著高于其他年度(P<0.05),2017年度和2018年度PEDV陽性率差異不顯著(P≥0.05),見表5。表明不論是單獨(dú)感染還是混可感染,PEDV呈現(xiàn)逐年遞減的趨勢(shì)。
表2 2016年~2018年間山東省16個(gè)地區(qū)病毒性疾病單純感染的檢出情況 (%)
表3 2016年~2018年間山東省16個(gè)地區(qū)病毒性疾病混合感染的檢出情況 (%)
表4 2016-2018年間山東省16個(gè)地區(qū)PEDV的檢出情況
注:同列數(shù)據(jù)字母不同表示差異顯著(P<0.05),字母相同表示差異不顯著(P≥0.05),大寫字母表示差異極顯著(P<0.01),下同。
表5 2016-2018年間山東省16個(gè)地區(qū)PEDV的檢出情況(%)
圖1 2016年~2018年間山東省16個(gè)地區(qū)不同月份PEDV的檢出情況
注:*表示差異顯著(P<0.05),**表示差異極顯著(P<0.01)
2.5 不同月份PEDV的流行情況分析 2016 ~2018年間山東省17個(gè)地區(qū)樣品檢測(cè)結(jié)果按不同月份統(tǒng)計(jì),PEDV檢出率位于1.1%~26.1%,其中1月份檢出率最高為26.1%,5、6月份檢出率最低為1.1%。1,2月份PEDV檢出率極顯著高于其它月份(P<0.01);3,4,11,12月份PEDV檢出率顯著高于5,6,9,10月份(P<0.05),見圖1。
2.6 不同日齡豬PEDV檢出情況 2016-2018年間山東省16個(gè)地區(qū)樣品中1日齡~14日齡豬的樣品數(shù)量為253頭,14日齡~28日齡豬的樣品數(shù)量為216頭,28~70日齡豬的樣品數(shù)量為232頭,70~120日齡豬的樣品數(shù)量為102頭,120~270日齡豬的樣品數(shù)量為55頭,大于270日齡豬的樣品數(shù)量為18只。各個(gè)日齡段PEDV檢出率差異均顯著(P< 0.05);1日齡~14日齡豬和14日齡~28日齡豬PEDV檢出率與其它日齡段相比差異極顯著(P<0.01);其它日齡段PEDV檢出率差異均顯著(P<0.05),見圖2。表明PED最易感豬的年齡為1~28日齡。
圖2 2016年~2018年間山東省17個(gè)地區(qū)不同日齡豬PEDV的檢出情況
2.7 不同品種豬PEDV檢出情況 876份樣品中肉用型樣品為625份,種用型樣品為251份。肉用型三元品種的檢出率與其它品種檢出率差異顯著(P<0.05);種用型大白品種檢出率與其它品種檢出率差異顯著(p<0.05);肉用型特種野豬和種用型杜洛克均為檢出,與其它品種檢出率相比差異顯著(P<0.05),見表6,表明不同品種的豬均有可能感染PED。
表6 2016年~2018年間不同品種豬PEDV檢出情況 (%)
(1)對(duì)來自山東省不同地區(qū)2016年~2018年間規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)的876份腸組織器官樣品進(jìn)行病毒分離,有671份樣品檢測(cè)到致病性病毒,其中92份檢測(cè)到PEDV,PEDV既能單獨(dú)感染,也能混合感染。受感染PED的豬通過糞便排出病毒后,污染環(huán)境、飼料、飲水、交通工具及用具等造成易感豬的感染,感染PEDV的豬免疫力下降,更容易感染PRRS、PC等其他病毒性疾病[7, 8];或感染了其他病毒性疾病的豬免疫力下降,在PED存在的豬場(chǎng),更容易感染PEDV。(2)3年間對(duì)山東省16個(gè)市的PEDV檢測(cè)表明,不同地區(qū)PEDV檢出率差別較大。檢出率超過10%的地區(qū)從高到低分別為濰坊市、臨沂市、東營市、泰安市、濱州市、濟(jì)寧市和淄博市,因此隨著養(yǎng)殖規(guī)模的不斷增加,養(yǎng)殖場(chǎng)需要注重生物安全的控制,減少PED對(duì)養(yǎng)豬業(yè)造成的經(jīng)濟(jì)損失。(3)3年間病料樣品PEDV平均檢出率為10.5(92/876)%,2016年P(guān)EDV檢出率為14.1%,2016年為9.1%,2018年為7.8%,PEDV呈逐年降低的趨勢(shì),該病自2010年在我國暴發(fā)以來,越來越引起人們的重視,表明PED危害逐漸降低,但是仍然是山東省養(yǎng)豬業(yè)的重要病毒性疾病之一。PEDV單純感染檢出率2016年為9.8%,2016年為6.7%,2018年為5.5%;混合感染檢出率2016年為4.3%,2016年為2.4%,2018年為2.3%,因此不論是單獨(dú)感染還是混可感染,PEDV呈現(xiàn)逐年降低的趨勢(shì),這表明改善山東養(yǎng)豬業(yè)的大環(huán)境,做好飼養(yǎng)管理和健全生物安全體系,PEDV流行將逐漸降低。(4)3年間檢測(cè)結(jié)果表明不同月份PEDV檢出率差別較大,1、2月份PEDV檢出率極顯著高于其它月份,3、4、11、12月份PEDV檢出率顯著高于5、6、7、8、9、10月份,這與資料報(bào)導(dǎo)相符[9]。(5)調(diào)查發(fā)現(xiàn)不同年齡的豬PEDV檢出率差異極大,該病易感豬的年齡為1月以內(nèi),1~28日齡豬是該病最易感年齡。通過對(duì)不同品種豬PEDV檢出率調(diào)查發(fā)現(xiàn),肉用豬和種用豬均有可能感染PED,而肉用型檢出率高于種用型,可能是種用型養(yǎng)殖場(chǎng)生物安全控制較好的原因。
本研究對(duì)山東省16個(gè)地區(qū)PEDV檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,了解了3年來山東省規(guī)模化養(yǎng)豬場(chǎng)PED流行規(guī)律,為目前山東省大型養(yǎng)豬場(chǎng)有效防控PED提供科學(xué)依據(jù),對(duì)PED有效防控策略的制定具有重大意義。
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(2020–04–02)
S851.31+3
A
1007-1733(2020)06-0053-04