象親內(nèi)皮皰疹病毒及其研究進(jìn)展

楊 念 張 立

（北京師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院，生物多樣性與生態(tài)工程教育部重點實驗室 北京 100875）

亞洲象（Elephasmaximus）為全球僅存約5萬頭的瀕危物種，其中我國境內(nèi)僅有約250頭［1］。棲息地喪失與破碎（例如土地開發(fā)、農(nóng)作物種植）、人象沖突、非法盜獵等各種干擾使得亞洲象的生存環(huán)境日益嚴(yán)峻，使其種群數(shù)量不斷下降。傳染性疾病的出現(xiàn)給原本已很艱難的亞洲象保育工作帶來新的打擊，象親內(nèi)皮皰疹病毒（elephant endotheliotropic herpesviruses，EEHV）感染可導(dǎo)致系統(tǒng)性出血性疾病，造成亞洲象急性死亡，致死率極高，是威脅亞洲象種群數(shù)量增長的主要因素之一［2-3］。

本文將從象親內(nèi)皮皰疹病毒的探究過程及特性、其傳播對亞洲象保育的影響，以及目前的防控措施及其局限性3個方面簡單介紹象親內(nèi)皮皰疹病毒，最后總結(jié)并提出對未來研究方向的展望。

1 象親內(nèi)皮皰疹病毒的探究過程及特性

20世紀(jì)90年代初期，瑞士馬戲團(tuán)一頭3歲齡的亞洲象急性死亡，在對其剖檢及組織病理學(xué)切片檢查時發(fā)現(xiàn)疑似皰疹病毒包涵體，但因當(dāng)時技術(shù)有限，未能將死亡象所感染的皰疹病毒定種［4］。直至1999年，借助PCR技術(shù)，史密森動物園的研究人員在10頭亞洲象的樣本中發(fā)現(xiàn)了該種新型皰疹病毒，并因其展現(xiàn)出的親上皮細(xì)胞特性而將其命名為象親內(nèi)皮皰疹病毒［5］。

皰疹病毒為大型雙鏈DNA病毒，象親內(nèi)皮皰疹病毒目前屬皰疹病毒科，乙型皰疹病毒亞科，長鼻病毒屬［2］，現(xiàn)共發(fā)現(xiàn)7種亞型（EEHV1～7）［7］。然而值得注意的是，對所發(fā)現(xiàn)的象親內(nèi)皮皰疹病毒進(jìn)行全基因組測序，得知這幾種亞型分為A-T豐富及G-C豐富2個分支，且這2個分支可能早在3 500萬年前就已出現(xiàn)［8］；同時，基因及蛋白質(zhì)層面的系統(tǒng)發(fā)生分析皆提示長鼻病毒屬并不屬于現(xiàn)有的甲、乙、丙3種皰疹病毒亞科，故研究團(tuán)隊已提議將其劃分為新的亞科——丁型皰疹病毒亞科［7-9］。象親內(nèi)皮皰疹病毒可同時感染亞洲象及非洲象，亞洲象感染可導(dǎo)致出血性疾病，但對非洲象致病性較弱，感染非洲象僅造成皮膚或肺部結(jié)節(jié)，其傳播機(jī)制現(xiàn)今仍知之甚少［2，10］。對圈養(yǎng)及野生亞洲象危害最大的為EEHV1的嵌合變種（EEHV1A及EEHV1B）［7］，感染可導(dǎo)致出血性疾病，其中1～8歲幼齡亞洲象易感，且致死率高達(dá)80%。據(jù)統(tǒng)計北美洲及歐洲60%死亡幼齡象的死因均為象親內(nèi)皮皰疹病毒感染［3］。感染幼象病程較快，發(fā)病急，但癥狀有時并不明顯，例如乏力、厭食等；由圖1可見感染象可出現(xiàn)頭面部腫脹、舌腫大發(fā)紺等癥狀，大體剖檢可見心包積液伴心內(nèi)、外膜及心肌點狀或斑狀淤血，在小腸等部位還可見潰瘍灶等［2-3，11］。已有成年健康亞洲象隱性帶毒及向環(huán)境中排毒的報道［12］。因野生亞洲象樣本獲取較為困難，大多數(shù)的感染案例為圈養(yǎng)亞洲象，但已在亞洲發(fā)現(xiàn)因象親內(nèi)皮皰疹病毒感染致死的野生亞洲象［6］。同時，研究人員還從健康象的結(jié)膜拭子、口腔拭子等樣本中分離出一種新的象皰疹病毒——象丙型皰疹病毒（elephant gammaherpesviruses，EGHV），現(xiàn)發(fā)現(xiàn)其5種亞型及1種嵌合變體，目前并未有其具有致病性的報道［10］。目前我國在這一領(lǐng)域的研究尚屬空白。

圖1 象親內(nèi)皮皰疹病毒感染象剖檢圖［6］

2 象親內(nèi)皮皰疹病毒對亞洲象保育的影響

北美及歐洲僅有圈養(yǎng)亞洲象，故象親內(nèi)皮皰疹病毒感染對其保育的主要威脅在于如何保持可持續(xù)的圈養(yǎng)亞洲象種群；因圈養(yǎng)亞洲象繁育過程中遺傳多樣性降低，新產(chǎn)出幼象可能對EEHV易感 性增加［3］。

擁有野生亞洲象的亞洲各國，還需面對象親內(nèi)皮皰疹病毒感染對野生種群數(shù)量的負(fù)面影響。象親內(nèi)皮皰疹病毒在野生亞洲象種群中的擴(kuò)散可能具有不確定性、不可控性及延遲性。雖已知野生亞洲象種群中有象親內(nèi)皮皰疹病毒感染案例，但野生亞洲象樣本獲取難度極大，幾乎無法測得野生亞洲象種群的感染率［6］。因為監(jiān)測有難度，野生亞洲象種群可能出現(xiàn)象親內(nèi)皮皰疹病毒感染地區(qū)性疫情爆發(fā)的情況，且治療野生亞洲象也有很大難度，故具不可控性。該事件如果發(fā)生，無疑會對數(shù)量正在下降中的小種群造成嚴(yán)重打擊。同時，幼象為象親內(nèi)皮皰疹病毒感染致死的主要對象，且亞洲象壽命較長，長期發(fā)展下去，野生亞洲象的種群年齡結(jié)構(gòu)可能被改變，所以象親內(nèi)皮皰疹病毒對于野生亞洲象種群數(shù)量及結(jié)構(gòu)的影響可能會有滯后性。

3 防治措施及局限性

象親內(nèi)皮皰疹病毒感染的防治措施為定期監(jiān)測和及時治療。通常采集鼻洗及全血作為檢測樣本，常用的實驗室分子檢測方法包含PCR及實時PCR［10，12］。傳統(tǒng)PCR主要用于診斷是否為象親內(nèi)皮皰疹病毒感染及對所得病毒分型；相比于傳統(tǒng)PCR，實時PCR檢測更加敏感，可進(jìn)行定量且實時監(jiān)測［2］。一些研究團(tuán)隊也在著手研究更加高效的檢測方法［13］。對于感染象，通常給予治療皰疹病毒感染的人用抗生素例如泛昔洛韋、噴昔洛韋等，伴以支持療法例如補液等進(jìn)行治療，雖然存活率仍然較低，但此治療方案對于處在病程早期患象有較好效 果［2，7，11］。 需要指出的是，因為 象親 內(nèi)皮皰疹病毒感染病程發(fā)展迅速，需要盡快作出診斷及治療處置，這就需要一線人員根據(jù)臨床表現(xiàn)及平日經(jīng)驗及時作出判斷。因為象親內(nèi)皮皰疹病毒尚未成功進(jìn)行體外細(xì)胞培養(yǎng)，所以疫苗的研發(fā)仍是一個難題［2］。

目前，象親內(nèi)皮皰疹病毒感染監(jiān)控及防治措施還面臨一些困難及不足。首先，很難獲得野生亞洲象及未經(jīng)訓(xùn)練的圈養(yǎng)象的樣本。對圈養(yǎng)象進(jìn)行行為訓(xùn)練耗時長且需要專業(yè)人士操作。其次，樣本采集后需進(jìn)行實驗室分子檢測，對實驗室、實驗設(shè)備、研究人員專業(yè)技能要求更高，可能導(dǎo)致檢測人員短缺。再次，PCR等檢測需要4 h左右，但因該病發(fā)病急且快，可能出現(xiàn)實驗室診斷結(jié)果未出而患象已經(jīng)死亡的情況，這對于象親內(nèi)皮皰疹病毒的臨床防控工作非常不利［14］。最后，還需要考慮成本的調(diào)控。密集的監(jiān)測及實驗室檢測需要較多勞動和材料成本；且因亞洲象體重大，治療時所需藥物劑量多，故治療成本較高。因此，如何完善象親內(nèi)皮皰疹病毒監(jiān)測防治計劃，并使其可持續(xù)的推行應(yīng)用仍是需考慮的問題。

4 總結(jié)及展望

本文簡單介紹了象親內(nèi)皮皰疹病毒的研究成果及現(xiàn)狀，總結(jié)其對當(dāng)前亞洲象種群的影響，并討論主要的解決措施及其不足，希望能對今后我國象親內(nèi)皮皰疹病毒研究提供一些基礎(chǔ)認(rèn)知。同時，如何建立一套有效的象親內(nèi)皮皰疹病毒預(yù)防措施，例如疫苗的研發(fā)，以及開發(fā)一些便捷且簡易的象親內(nèi)皮皰疹病毒感染檢測方法，從而提高檢查效率并降低研究成本，仍是今后研究應(yīng)關(guān)注的領(lǐng)域。