細(xì)胞學(xué)檢測(cè)在小兒結(jié)核性腦膜炎中的診斷價(jià)值及與病毒性腦膜炎對(duì)比研究

陳玉霞

商丘市第三人民醫(yī)院，河南 商丘 476000

腦膜炎是發(fā)生率較高的一類中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病，嚴(yán)重程度高，一旦沒有及時(shí)治療，殘疾率及病死率均較高[1]。結(jié)核性腦膜炎、病毒性腦膜炎是腦膜炎的兩種常見類型。其中結(jié)核性腦膜炎嚴(yán)重程度最高，多是因?yàn)榇竽X內(nèi)中樞神經(jīng)系統(tǒng)由于結(jié)核分枝桿菌經(jīng)過血液循環(huán)進(jìn)入而發(fā)生結(jié)核病，從而影響腦神經(jīng)、腦動(dòng)脈以及腦實(shí)質(zhì)等，同時(shí)侵犯腦膜，引起的一類炎性反應(yīng)[2]。結(jié)核性腦膜炎一般在低于5歲的小兒中發(fā)生率更高，且經(jīng)常會(huì)被誤診為其他疾病，原因是盜汗、頭痛、低熱等初期臨床癥狀不嚴(yán)重，往往被忽視，導(dǎo)致疾病不斷發(fā)展，威脅患兒的生命健康，最終引發(fā)嚴(yán)重后果[3]。

病毒性腦膜炎也是兒科常見神經(jīng)系統(tǒng)性疾病之一，是一種常見的顱內(nèi)感染性疾病，屬中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)感染，后遺癥發(fā)生率和致殘率仍較高，但近年來其病死率有所下降[4]。小兒發(fā)病率高于成人，是病毒性腦膜炎高危人群，有報(bào)道顯示，中樞神經(jīng)感染住院患兒病毒性腦膜炎約占50%以上[5]。病毒性腦膜炎一旦發(fā)現(xiàn)需要及時(shí)治療，其對(duì)大腦的損傷非常大。這種神經(jīng)系統(tǒng)的疾病如果預(yù)后不徹底，嚴(yán)重者可能會(huì)導(dǎo)致兒童意識(shí)障礙，部分患兒會(huì)有很多如癲癇、肢體癱瘓等后遺癥，不僅患兒的生活質(zhì)量受到嚴(yán)重影響，還會(huì)影響兒童正常學(xué)校生活[6]。病毒性腦膜炎是不同病毒導(dǎo)致的顱內(nèi)急性炎癥，存在較多病原體，臨床確診難度較大，誤診的風(fēng)險(xiǎn)高，影響患兒的及時(shí)治療[7]。

病毒性腦膜炎尚無特效藥物，但早期有一定的自愈概率，大多數(shù)病毒性腦膜炎可經(jīng)積極的治療完全康復(fù)[8]。因此，對(duì)癥治療以及早期診斷分類具有重要意義。雖然腦膜炎診斷的金標(biāo)準(zhǔn)是腦脊液病原學(xué)檢測(cè)，但病原菌檢測(cè)中由于抗生素濫用情況加重而使檢出率降低，同時(shí)該檢查耗時(shí)長，極易出現(xiàn)誤診，漏診的情況而延誤治療。所以臨床有必要做好病毒性腦膜炎、結(jié)核性腦膜炎的診斷及鑒別工作，以保證臨床能夠及時(shí)采取正確的治療措施，實(shí)現(xiàn)患兒預(yù)后的改善。當(dāng)前在這兩種疾病的診斷中，細(xì)胞學(xué)檢測(cè)方法的應(yīng)用較為廣泛，本研究以商丘市第三人民醫(yī)院2016-04—2019-04收治的結(jié)核性腦膜炎患兒20例，病毒性腦膜炎患兒30例為對(duì)象，具體分析細(xì)胞學(xué)檢測(cè)在診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1 對(duì)象及方法

1．1對(duì)象選擇2016-04—2019-04商丘市第三人民醫(yī)院收治的結(jié)核性腦膜炎患兒20例(結(jié)核組)，病毒性腦膜炎患兒30例(病毒組)為對(duì)象。結(jié)核組男12例，女8例，年齡0.5～6(3.60±2.18)歲；病毒組男19例，女11例，年齡1～7(3.81±2.43)歲。2組年齡、性別差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。(1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合腦膜炎診斷標(biāo)準(zhǔn)；②確診為結(jié)核性腦膜炎或病毒性腦膜炎；③無其他嚴(yán)重伴發(fā)疾?。虎芑純杭议L對(duì)研究知情同意；⑤獲得醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴嚴(yán)重心腦血管疾病；②伴嚴(yán)重肝腎功能異常；③合并認(rèn)知功能障礙；④合并過敏性疾病；⑤合并血液系統(tǒng)疾病。

1．2方法全部患兒在入院3 d內(nèi)進(jìn)行腰穿，收集患兒3 mL腦脊液，在FMU-5微型腦脊液細(xì)胞玻片離心沉淀器中加入腦脊液0.5 mL，持續(xù)5 min的離心處理，離心速率為800 r/min，收集腦脊液細(xì)胞在玻片上，利用邁-格-姬對(duì)細(xì)胞玻片進(jìn)行8 min染色，等待干燥后通過顯微鏡進(jìn)行觀察并計(jì)數(shù)。

1．3評(píng)價(jià)指標(biāo)測(cè)定2組患兒的血清白蛋白(CALB)，利用日本強(qiáng)生250型全自動(dòng)生化分析儀在溴甲酚綠法下進(jìn)行測(cè)定，腦脊液白蛋白(SALB)在免疫比濁法下進(jìn)行測(cè)定，腦脊液白蛋白指數(shù)(CALB指數(shù))=CALB/SALB×10-3。

測(cè)定并比較2組患兒腦脊液中嗜中性粒細(xì)胞、腦脊液小淋巴細(xì)胞、轉(zhuǎn)化淋巴細(xì)胞、淋巴樣細(xì)胞、激活單核細(xì)胞所占百分比。

評(píng)價(jià)2組患兒血腦屏障損傷程度，依據(jù)CALB指數(shù)進(jìn)行判斷，CALB<9提示正常，CALB9～10為輕度損傷，CALB11～30為中度損傷，CALB30以上為重度損傷。

2 結(jié)果

2．1CALB、SALB、CALB指數(shù)比較結(jié)核組腦膜炎患兒CALB測(cè)定結(jié)果與病毒組腦膜炎患兒比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，結(jié)核組腦膜炎患兒SALB、CALB指數(shù)測(cè)定結(jié)果明顯高于病毒組腦膜炎患兒(P<0.05)。見表1。

組別nCALB(g/L)SALB(g/L)CALB指數(shù)結(jié)核組2036.28±6.521.23±0.5931.75±10.38病毒組3036.34±6.230.67±0.2015.56±9.82t值1.1784.9246.206P值0.2440.0000.000

2．22組腦脊液內(nèi)細(xì)胞類型及比重比較結(jié)核組腦膜炎患兒小淋巴細(xì)胞、淋巴樣細(xì)胞、轉(zhuǎn)化淋巴細(xì)胞均低于病毒組腦膜炎患兒(P<0.05)，激活單核細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞均高于病毒組腦膜炎患兒(P<0.05)，結(jié)核組腦膜炎患兒與病毒組腦膜炎患兒漿細(xì)胞、單核細(xì)胞比重差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

2．32組血腦屏障損傷程度比較結(jié)核組腦膜炎患兒血腦屏障輕度損傷患兒明顯少于病毒組腦膜炎患兒(P<0.05)，中度損傷與重度損傷患兒明顯多于病毒組，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

表2 2組腦脊液內(nèi)細(xì)胞類型及比重比較Table 2 Comparison of cell types and specific gravity incerebrospinal fluid in 2

表3 2組血腦屏障損傷程度比較 [n(%)]Table 3 Comparison of the degree of blood-brain barrierinjury between the 2 groups [n(%)]

3 討論

中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)感染其臨床癥狀往往不典型且多樣，給診治帶來一定困難，是兒科常見感染性疾病之一，嚴(yán)重威脅兒童健康[9]。部分患兒雖積極治療仍遺留癲癇、腦軟化、腦積水、智力低下、聽力障礙等嚴(yán)重后遺癥。結(jié)核性腦膜炎和病毒性腦膜炎是中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的兩種常見類型。

結(jié)核病變會(huì)經(jīng)血行-腦脊液途徑影響腦膜，機(jī)體高度過敏性緊密聯(lián)系結(jié)核性腦膜炎的出現(xiàn)，部分患兒也可能由于腦膜干酪灶、腦實(shí)質(zhì)破潰導(dǎo)致結(jié)核性腦膜炎。結(jié)核桿菌為需氧菌，通過呼吸道進(jìn)入肺部，先在小區(qū)域形成感染，因?yàn)榻Y(jié)核菌不會(huì)有毒素、酶的分泌，所以不會(huì)導(dǎo)致炎性反應(yīng)或免疫反應(yīng)，宿主不會(huì)有癥狀表現(xiàn)[10]。之后淋巴系統(tǒng)會(huì)受到桿菌入侵并進(jìn)入局部淋巴結(jié)中，由于菌血癥影響會(huì)通過血行播散進(jìn)入腦實(shí)質(zhì)、腦膜處，且會(huì)大量復(fù)制。等到宿主出現(xiàn)免疫反應(yīng)，T淋巴細(xì)胞會(huì)致敏，將巨噬細(xì)胞激活，向感染灶轉(zhuǎn)移[11]。巨噬細(xì)胞能夠?qū)U菌吞沒，且可以與其融合轉(zhuǎn)變?yōu)槎嗪司藜?xì)胞，這種情況免疫反應(yīng)的影響會(huì)殺滅大部分桿菌，僅在巨噬細(xì)胞中遺留少數(shù)[12]。不完全的囊壁樣組織會(huì)包繞肉芽腫性病灶，因?yàn)轶w積非常小，所以可能長期靜止存在于腦膜中。如果宿主免疫力減弱，病灶中結(jié)核菌會(huì)被激活，進(jìn)入蛛網(wǎng)膜下腔中，跟隨腦脊液出現(xiàn)播散，經(jīng)過一段時(shí)間后導(dǎo)致結(jié)核性腦膜炎。

病毒性腦膜炎是指中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染所導(dǎo)致的急性炎癥反應(yīng)疾病，是由病毒感染所致的軟腦膜部位的炎癥反應(yīng)綜合征。病毒性腦膜炎病原體以腸道病毒、皰疹病毒、腮腺炎病毒等為主，具有傳染性，其中柯薩奇B組及?？刹《靖腥据^為多見，患兒可出現(xiàn)腦組織體征改變及神經(jīng)系統(tǒng)麻痹等情況。病毒性腦膜炎多發(fā)于低齡嬰幼兒，癥狀較輕可自行痊愈，若治療延誤會(huì)影響患兒的腦部功能，造成肢體功能障礙、精神障礙等不良后遺癥，重者出現(xiàn)腦水腫、驚厥，進(jìn)而遺留神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥，若嚴(yán)重可導(dǎo)致患者死亡。病毒性腦膜炎的致殘率較高，據(jù)相關(guān)研究報(bào)道[13]，約33.9%的患兒可遺留肢體癱瘓。減少病毒性腦膜炎患兒并發(fā)癥，促進(jìn)腦部功能的恢復(fù)的重要保證是積極有效的臨床救治，因此，對(duì)疾病的早期診斷、治療顯得尤為重要。

患兒軟腦膜、腦部腫脹表現(xiàn)出彌漫性混濁，有灰黃色漿液纖維素性滲出物，額葉底部、視交叉池、腦底部橋池的分布最明顯[14]。腦神經(jīng)鞘會(huì)受到炎性滲出物侵犯，會(huì)對(duì)神經(jīng)纖維形成包繞及擠壓，顯微鏡檢查能夠觀察到軟腦膜彌漫性炎細(xì)胞浸潤，主要是淋巴細(xì)胞與單核細(xì)胞，少有漿細(xì)胞、巨噬細(xì)胞[15]。在軟腦膜部位能夠檢查發(fā)現(xiàn)有散在的粟粒狀結(jié)核結(jié)節(jié)，組成包括成纖維細(xì)胞、單核細(xì)胞、多核巨細(xì)胞，少量存在漿細(xì)胞，并且結(jié)節(jié)中多會(huì)存在干酪樣壞死物質(zhì)。臨床發(fā)現(xiàn)，腦實(shí)質(zhì)中、軟腦膜血管中的小動(dòng)脈多會(huì)出現(xiàn)血管炎性改變，始于外膜，對(duì)彈力纖維形成破壞，并導(dǎo)致血管內(nèi)膜炎，繼而導(dǎo)致血管閉塞，嚴(yán)重情況下會(huì)引起腦梗死。小兒結(jié)核性腦膜炎無典型臨床癥狀，診斷難度較大，誤診風(fēng)險(xiǎn)高，本研究通過進(jìn)行腦脊液細(xì)胞學(xué)檢查，發(fā)現(xiàn)結(jié)核組SALB、CALB指數(shù)測(cè)定結(jié)果明顯高于病毒組(P<0.05)，結(jié)核組小淋巴細(xì)胞、淋巴樣細(xì)胞、轉(zhuǎn)化淋巴細(xì)胞均低于病毒組(P<0.05)，激活單核細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞均高于病毒組(P<0.05)，結(jié)核組血腦屏障輕度損傷患兒明顯少于病毒組(P<0.05)，中度損傷與重度損傷患兒雖然多于病毒組，但因?yàn)檠芯繉?duì)象數(shù)量過少，所以差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。從結(jié)果可知，進(jìn)行細(xì)胞學(xué)檢測(cè)能夠幫助鑒別結(jié)核性腦膜炎、病毒性腦膜炎，兩種腦膜炎在SALB、CALB指數(shù)方面，在小淋巴細(xì)胞、淋巴樣細(xì)胞、轉(zhuǎn)化淋巴細(xì)胞、激活單核細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞比重方面，在血腦屏障受損程度方面均存在一定差異，通過這些檢測(cè)對(duì)兩種類型的腦膜炎進(jìn)行鑒別。細(xì)胞學(xué)檢測(cè)能夠幫助鑒別小兒結(jié)核性腦膜炎、病毒性腦膜炎，為臨床診療進(jìn)行提供科學(xué)指導(dǎo)，臨床有良好應(yīng)用價(jià)值。