楊玲玲,魏迎辰,高翔,洪利凱,沈薇
(安徽中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院,安徽 合肥)
0 引言
據(jù)文獻(xiàn)報道,目前我國慢性創(chuàng)面主要分為創(chuàng)傷感染(67.5%)、壓迫性潰瘍(9.2%)、靜脈性潰瘍(6.5%)、糖尿病潰瘍(4.9%)和其他(11.9%)[1-2]。這其中感染性因素占據(jù)主要因素。慢性感染性創(chuàng)面往往遷延難愈、反復(fù)發(fā)作或有癌變風(fēng)險,治療周期較長,治療成本較高。現(xiàn)今尋找安全有效的治法己成為國內(nèi)外醫(yī)學(xué)研究的熱點。中醫(yī)藥外治在體表潰瘍的治療中顯現(xiàn)了強(qiáng)大的優(yōu)勢,中藥外用有抑菌抗炎、祛腐生肌、促進(jìn)血液循環(huán)、調(diào)節(jié)創(chuàng)面生長因子等作用。經(jīng)皮膚和創(chuàng)面用藥,直達(dá)病所,療效可靠、顯效迅速,并具有操作簡單,使用方便,經(jīng)濟(jì)實用,副作用少。我們自制三石生新膏具有消腫止痛、清熱收濕、祛腐生肌的功效,應(yīng)用臨床多年,療效顯著。本實驗通過建立慢性感染性創(chuàng)面的大鼠模型,觀察三石生新膏外敷對慢性感染性創(chuàng)面的影響,初步探討其可能的作用機(jī)制。
1 材料與方法
1.1 實驗動物
SPF 級SD 雄性大鼠60 只,2 月齡,個體質(zhì)量220-250g 之間,由安徽醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供,許可證號:SCXK(皖)2011-002。置于溫度25℃±2℃飼養(yǎng)室,動物均自由飲水進(jìn)食。動物實驗操作過程完全遵守國家科學(xué)技術(shù)委員會發(fā)布的《實驗動物管理條例》和衛(wèi)生部發(fā)布的《醫(yī)學(xué)實驗動物管理實施細(xì)則》以及安徽中醫(yī)藥大學(xué)動物使用和管理委員會章程的要求執(zhí)行。
1.2 實驗試劑及藥品
三石生新膏:安徽中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院自制,主要成分:制爐甘石,煅石膏,滑石,白芨,龍血竭,冰片,血珀,馬勃,紫草,當(dāng)歸等共研磨成極細(xì)末100 目篩后,用麻油調(diào)勻后再加入凡士林制成軟膏。貝復(fù)濟(jì):重組牛堿性成纖維細(xì)胞生長因子凝膠,36000AU/15mL 液態(tài)噴灑劑,深圳億勝科技有限發(fā)展公司。生理鹽水:0.9%NACL 250mL,杭州吉諾生物醫(yī)藥技術(shù)有限公司。戊巴比妥鈉:中國醫(yī)藥集團(tuán)上?;瘜W(xué)試劑公司;大鼠檢測試劑盒:北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司,批號12129A21。VEGF 抗體:北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司,批號:ZS-72690 lot:K2412。EGF 抗體:北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司,批號:BS3549 lot:G22121。
1.3 實驗儀器
日本Nikon80i 顯微鏡;RM-2135 石蠟切片機(jī);FSX-10-15 圖像信號采集與分析系統(tǒng)(萊卡公司);GHX-9270B-1 型電恒溫培養(yǎng)箱(上海福馬);-80℃超低溫冰箱;亞光ZT-12M 組織脫水機(jī)(湖北孝感);日本島津AUY120 電子天平。
1.4 方法
1.4.1 造模
大鼠常規(guī)飼養(yǎng)1 周后,腹腔注射10%水合氯醛(3.5mL/kg)麻醉,參照付小兵大鼠慢性皮膚潰瘍創(chuàng)面模型的制作方法[3-4],在大鼠背部正中部位,用剃毛刀剃毛,面積約4.0cm×4.0cm,約為大鼠表面積的10%,保證皮膚完整無破損。標(biāo)記造模位置,背部正中兩邊各一個,碘伏棉簽局部皮膚消毒,剪取大鼠背部全層皮膚,面積約1.0cm×1.0cm,深度達(dá)皮下深筋膜,造成皮膚缺損,將消毒膠環(huán)(內(nèi)環(huán)1cm,外環(huán)1.5cm)以3
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