5種食用菌生物活性肽對(duì)高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)耐力訓(xùn)練中生化指標(biāo)的影響*

劉 虎

（黃河水利職業(yè)技術(shù)學(xué)院，河南 開封 475000）

食用菌中含有許多生物活性肽，按其對(duì)人體的功效可分為降壓、降血糖的活性肽，抗氧化、抗凝血、抗病毒的活性肽等多種類型[1]。目前食用菌生物活性肽對(duì)運(yùn)動(dòng)人群的影響研究較少[2]。故對(duì)高強(qiáng)度運(yùn)動(dòng)和耐力訓(xùn)練中，生物活性肽調(diào)節(jié)機(jī)體生化指標(biāo)的機(jī)理展開了試驗(yàn)。

1 試驗(yàn)材料

1.1 試驗(yàn)材料與試劑

供試材料：鹽酸二甲雙胍片，中美上海施貴寶制藥有限公司；靈芝肽、姬松茸肽粉，扶風(fēng)斯諾生物科技有限公司；茶樹菇多肽、雙孢菇肽粉，蘭州沃特萊斯生物科技有限公司提供；云芝肽粉，寧陜國圣生物科技有限公司；四氧嘧啶，上海晶抗生物工程有限公司；鹽酸苯乙雙胍，濟(jì)南勝瑞祥醫(yī)藥科技開發(fā)有限公司；蒸餾水（分析純），濟(jì)南青玉元商貿(mào)有限公司。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物

選用健康4周齡昆明二級(jí)雄性小白鼠，體重為（20±2） g，由第四軍醫(yī)大學(xué)動(dòng)物研究中心提供。對(duì)小鼠進(jìn)行分籠飼養(yǎng)，每籠10只。飼養(yǎng)條件為標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物飼料喂養(yǎng)，自由飲食和飲水，飼養(yǎng)溫度25℃，相對(duì)濕度50%，室內(nèi)照明12 h/12 h光暗交替周期，小鼠試驗(yàn)前均適用性喂養(yǎng)1周。

1.3 試驗(yàn)藥品與儀器

BS-300全自動(dòng)生化分析儀，深圳邁瑞公司；高速離心機(jī)，廣州市正一科技有限公司；血糖試紙（葡萄糖脫氫酶法），雅培糖尿病護(hù)理有限公司；YJ超凈工作臺(tái)，蘇州市蘇凈集團(tuán)安泰公司；BIOICE01-冰浴器，明日百傲（北京） 科技有限公司；BSZ10S分析天平，北京賽多利斯天平有限公司。

2 試驗(yàn)方法

2.1 食用菌生物活性肽降血糖試驗(yàn)

小鼠適用性喂養(yǎng)1周最后一次喂食2 h后，用葡萄糖試紙測量小鼠的尿糖，挑選試紙為淺藍(lán)色陰性的小鼠20只為一組，作為陰性對(duì)照組。

小鼠適用性喂養(yǎng)1周，最后一次喂食后禁食24 h。給小鼠腹腔注射配置好的四氧嘧啶注射液100 mg·kg-1，3 d后，測量小鼠的尿糖[3]，選取定性測定尿糖含量值為“+++”的小鼠分5組，每組20只，分別為陽性對(duì)照組、西藥對(duì)照組、活性肽高劑量組、活性肽中劑量組和活性肽低劑量組。

尿糖陰性對(duì)照組（第1組），灌胃20 mL·kg-1的生理鹽水；陽性對(duì)照組（第2組），即四氧嘧啶糖尿病模型對(duì)照組，灌胃20 mL·kg-1生理鹽水；西藥對(duì)照組（第3組），灌胃20 mL·kg-1鹽酸苯乙雙胍水溶液；活性肽高劑量組（第4組），灌胃400 mL·kg-1活性肽溶液；活性肽中劑量組（第5組），灌胃200 mL·kg-1活性肽溶液；活性肽低劑量組（第6組），灌胃100 mL·kg-1活性肽溶液。

以上6組小鼠均持續(xù)給藥14 d，正常飼養(yǎng)投喂飼料、自由飲水進(jìn)食。第7天最后一次給藥后進(jìn)行稱重，隨機(jī)挑選10只小鼠禁食12 h，采用斷頸法處死小鼠，立即摘取眼球取血，測量小鼠血糖含量[5]；第14天最后1次給藥后，將每組剩余的10只小鼠也采用同樣的方法禁食12 h，測量小鼠血糖含量。通過與陰性對(duì)照組的比較，評(píng)價(jià)血糖指標(biāo)的高低；通過與陽性對(duì)照組的比較，評(píng)價(jià)降血糖的效果的優(yōu)劣。

2.2 食用菌生物活性肽對(duì)小鼠體重和負(fù)重游泳耐力影響的試驗(yàn)

小鼠適用性喂養(yǎng)1周后，選用健康小鼠60只，分成6組。靈芝肽、姬松茸肽、茶樹菇肽、雙孢菇肽、云芝肽粉末，分別按1∶1加蒸餾水混合均勻，得5種生物活性肽樣品溶液，每日定時(shí)經(jīng)口灌胃樣品溶液1次，劑量為1 g·kg-1；對(duì)照組（CK） 每日定時(shí)經(jīng)口灌胃1次同樣體積的蒸餾水。每日上午定時(shí)對(duì)每只小鼠進(jìn)行稱重記錄體重，并進(jìn)行2次游泳訓(xùn)練，每次15 min，下午定時(shí)進(jìn)行小鼠灌胃，連續(xù)30 d，期間正常飼養(yǎng)小鼠。最后一次灌胃1 h后，取各組小鼠10只進(jìn)行負(fù)重游泳試驗(yàn)[4]，在小鼠尾部系體重5%的鉛皮，將小鼠放置于水箱，水溫為（25.0±2.0） ℃，記錄小鼠從入水至全部身體沉入水中的時(shí)間作為小鼠負(fù)重游泳時(shí)間。

3 試驗(yàn)結(jié)果與分析

3.1 四氧嘧啶對(duì)小鼠血糖和體重指標(biāo)的影響

四氧嘧啶對(duì)小鼠體重的影響見表1。

表1 四氧嘧啶對(duì)小鼠體重的影響Tab.1 Effects of different component on body weight of mice

由表1可知，在本次試驗(yàn)中，第2組的小鼠體重有明顯減輕，較第1組正常對(duì)照組小鼠體重第一周后平均減少 14.86%，第二周后平均減少達(dá)40.16%。同時(shí)，試驗(yàn)中觀察到第2組小鼠發(fā)現(xiàn)有活動(dòng)異?，F(xiàn)象，出現(xiàn)飲水和排尿頻率增加和多次進(jìn)食的現(xiàn)象，觀察毛色變暗、有掉毛情況，與糖尿病表現(xiàn)一致。

3.2 小鼠負(fù)重游泳試驗(yàn)結(jié)果

6組小鼠的負(fù)重游泳試驗(yàn)結(jié)果如表2所示。

表2 不同組分對(duì)小鼠負(fù)重游泳時(shí)間的影響Tab.2 Effects of different component on burden swimming time of mice

由表2可知，5種食用菌生物活性肽與對(duì)照組相比，小鼠的游泳時(shí)間都有增加，平均負(fù)重游泳時(shí)間為109.73 min，其中茶樹菇肽對(duì)小鼠運(yùn)動(dòng)耐力的影響最大，與對(duì)照組相比提升了74.51%，效果顯著，說明對(duì)運(yùn)動(dòng)耐力的增強(qiáng)效果良好。

3.3 灌胃不同劑量食用菌生物活性肽對(duì)小鼠體重和運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的影響

試驗(yàn)結(jié)果如圖1所示。

由圖1可知，陽性對(duì)照組小鼠出現(xiàn)了多飲、多食、消瘦的狀況，血糖值明顯升高。試驗(yàn)初期，各小組的小鼠體重仍呈現(xiàn)下降趨勢，從給藥第6天開始，各試驗(yàn)組與陽性對(duì)照組比較，小鼠的攝食頻率、飲水頻率和數(shù)量均明顯減少，體重也趨于平緩，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，體重有所回升?？梢?種食用菌生物活性肽大劑量（400 mg·kg-1）能明顯減緩糖尿病小鼠體重下降的癥狀，在一定程度上可促進(jìn)其體重恢復(fù)。分析其原因可能是由于食用菌生物活性肽對(duì)小鼠的肌肉蛋白質(zhì)具有的生化活性，能夠補(bǔ)充小鼠肌肉蛋白質(zhì)的消耗，幫助肌肉更快地合成優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)，從而促進(jìn)肌肉生長質(zhì)量、提高肌肉生長速度，增加肌肉的運(yùn)動(dòng)耐力。

3.4 灌胃不同劑量藥品對(duì)小鼠血糖的影響

灌胃不同劑量藥品對(duì)小鼠血糖的影響試驗(yàn)結(jié)果見表3。

分別對(duì)靈芝肽、姬松茸肽、茶樹菇肽、雙孢菇肽、云芝肽5種食用菌生物活性肽進(jìn)行試驗(yàn)，分別取5種活性肽的高劑量、中劑量、低劑量3個(gè)組血糖值的平均值。試驗(yàn)結(jié)果如表3所示。

表3 各試驗(yàn)組小鼠血糖值Tab.3 The blood sugar of experiment groups

觀察試驗(yàn)過程發(fā)現(xiàn)，高劑量、中劑量、低劑量3個(gè)組的食用菌生物活性肽均能顯著改善糖尿病小鼠的多飲、多食、消瘦癥狀。試驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，正常陰性組的空腹血糖值7.38，組內(nèi)極差為2.90；陽性組的血糖值為38.74，組內(nèi)極差為11.69，陽性組血糖值與正常陰性組差異較大說明小鼠的糖尿病癥狀比較明顯，陽性組的極差較大說明小鼠個(gè)體間的差異很大，組內(nèi)個(gè)體血糖值差異顯著，糖尿病病情因個(gè)體因素變化較大。西藥組的血糖平均值為22.13，極差值為28.86，差異也較大，說明小鼠血糖值因使用了降糖西藥，雖然有所降低，但由于小鼠個(gè)體間的差異性，用藥后的效果差異也比較大，糖尿病的治療效果和病情并不穩(wěn)定。高、中、低三個(gè)劑量實(shí)驗(yàn)組的血糖平均值依次為 16.76、14.48 和 14.28，極差分別為 6.04、6.12 和 2.63，說明 3 個(gè)試驗(yàn)組均有降低小鼠血糖值的效果，即糖尿病得到了一定的控制；同時(shí)高劑量和中劑量2個(gè)試驗(yàn)組的極差幾乎相同，低劑量實(shí)驗(yàn)組的極差很小，整體極差也相對(duì)較小，說明小鼠個(gè)體間的治療效果差異較小，病情控制的效果比較穩(wěn)定。

4 結(jié)論

對(duì)靈芝肽、姬松茸肽、茶樹菇肽、雙孢菇肽、云芝肽5種食用菌生物活性肽進(jìn)行了降血糖試驗(yàn)，對(duì)血糖生化指標(biāo)進(jìn)行了檢測分析，并進(jìn)行了食用菌生物活性肽對(duì)小鼠體重和負(fù)重游泳耐力的影響試驗(yàn)。證明食用菌生物活性肽對(duì)小鼠的肌肉生長和運(yùn)動(dòng)耐力有一定的促進(jìn)作用，能夠降低小鼠的血糖生化指標(biāo)，高劑量的食用菌生物活性肽對(duì)血糖指標(biāo)的控制作用更加明顯。