• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    不同嗜食寄主對西花薊馬胰蛋白酶基因CL4520.Contig1表達量的影響

    2020-06-09 02:35:08謝文郅軍銳劉利呂莎莎周治成
    江蘇農(nóng)業(yè)科學 2020年7期

    謝文 郅軍銳 劉利 呂莎莎 周治成

    摘要:為明確西花薊馬取食不同嗜食寄主對其體內(nèi)胰蛋白酶基因CL4520.Contig1表達量的影響,研究了西花薊馬從菜豆豆莢分別轉(zhuǎn)換到較嗜食寄主菜豆植株和非嗜食寄主蠶豆植株上繼代飼養(yǎng)1、2、3代后,其2齡若蟲和成蟲體內(nèi)CL4520.Contig1表達量的異同。結(jié)果表明,轉(zhuǎn)換到菜豆植株上繼代飼養(yǎng)的1、2、3代西花薊馬2齡若蟲體內(nèi)CL4520.Contig1表達量分別比對照降低了61.86%、13.16%、19.10%,在成蟲體內(nèi)降低了57.07%、88.03%、12.41%;轉(zhuǎn)換到蠶豆植株上繼代飼養(yǎng)的1、2、3代西花薊馬2齡若蟲體內(nèi)CL4520.Contig1表達量分別是對照的2.33倍、6.06倍、4.10倍,成蟲則是對照的3.93倍、6.44倍、5.55倍。由此得出,當轉(zhuǎn)換寄主后,西花薊馬體內(nèi)胰蛋白酶基因CL4520.Contig1會迅速產(chǎn)生響應,其表達量發(fā)生明顯變化,CL4520.Contig1的表達量在取食嗜食寄主菜豆植株時受到一定的抑制,而在取食非嗜食寄主蠶豆植株時明顯被激活,且CL4520.Contig1的表達量在西花薊馬不同齡期存在差異。

    關(guān)鍵詞:西花薊馬;不同嗜食寄主;胰蛋白酶;基因表達量

    中圖分類號: S433.89;Q786文獻標志碼: A

    文章編號:1002-1302(2020)07-0069-05

    寄主植物和昆蟲在長期的進化過程中相互影響、相互適應或協(xié)同進化,當寄主植株被昆蟲取食時會產(chǎn)生多種防御物質(zhì)[1],而植食性昆蟲面對寄主的防御機制,也會在進化過程中形成相應的反防御機制,其中昆蟲體內(nèi)的消化酶就起到了重要作用[2]。昆蟲利用其體內(nèi)消化酶降解植物淀粉和蛋白質(zhì)等,達到消化和吸收營養(yǎng)物質(zhì)的目的;同時,昆蟲體內(nèi)消化酶活性的高低反映了昆蟲對營養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的能力和生長發(fā)育的速率[3-5]。胰蛋白酶(trypsin,TRY)是昆蟲中腸中重要的蛋白水解酶,可以有力迅速地激活其他蛋白酶原,進而行使消化功能[6]。此外,胰蛋白酶還具有阻止前體細胞抗體毀滅的功能[7]。

    西花薊馬[Frankliniella occidentalis (Pergande)]屬纓翅目(Thysanoptera)薊馬科(Thripidae)。21世紀初,西花薊馬在我國北京首次被報道[8],之后迅速傳播擴散,近年來相繼在吉林[9]、新疆[10]、寧夏[11]和內(nèi)蒙古中西部[12]等地被發(fā)現(xiàn)。西花薊馬主要通過銼吸式口器危害寄主植物的葉、花和果實[13],也可傳播番茄斑萎病毒(tomato spotted wilt virus,TSWV)等多種植物病毒,加重對植物的危害[14-15],是世界危險性害蟲。

    西花薊馬是典型的多食性害蟲,可危害不同種類植物,主要危害花卉、蔬菜和果樹等,寄主達60多個科500多種植物,可在不同寄主植物間遷移擴散危害[16]。但西花薊馬在不同寄主植株上的發(fā)育歷期、產(chǎn)卵量和著蟲率等有明顯差異[17-19]。由于不同寄主植株所含營養(yǎng)物質(zhì)的質(zhì)和量不同[20],昆蟲取食誘導產(chǎn)生的防御物質(zhì)也不同,因此導致昆蟲在不同寄主上適應性不同。Kotkar等的研究結(jié)果表明,昆蟲取食不同寄主植株后消化酶活性都會不同[21-22],說明不同寄主是影響昆蟲體內(nèi)消化酶活性的重要因子。牟峰的研究表明,取食不同處理菜豆植株后,西花薊馬體內(nèi)消化酶活性發(fā)生顯著變化[23];姜麗娜等研究發(fā)現(xiàn),取食不同寄主植株的西花薊馬體內(nèi)消化酶活性變化不一致[6];在蒲恒滸等的研究中,西花薊馬取食不同誘導處理的番茄植株后,其體內(nèi)消化酶活性顯著高于取食健康的番茄植株[24],但這些研究中并未報道不同嗜食寄主對西花薊馬消化酶基因表達量的影響。

    為研究不同嗜食寄主對西花薊馬消化酶基因表達量的影響,以及西花薊馬取食不同寄主后的逐代適應過程,本試驗在前人明確菜豆植株為西花薊馬較嗜食寄主和蠶豆植株為非嗜食寄主的基礎(chǔ)上[18,25],研究了取食菜豆豆莢的西花薊馬分別轉(zhuǎn)換到較嗜食寄主菜豆植株和非嗜食寄主蠶豆植株上繼代飼養(yǎng)1、2、3代后,其2齡若蟲和成蟲體內(nèi)胰蛋白酶基因CL4520.Contig1的表達量,以期揭示西花薊馬對不同嗜食寄主植物的適應性的異同,為明確西花薊馬與寄主之間的互作機制奠定基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    1.1.1 供試蟲源

    西花薊馬采自貴州省貴陽市花溪周邊蔬菜地,鑒定后在人工氣候箱[RXZ型,購自寧波江南儀器廠,溫度為(25±1) ℃,相對濕度為(70±5)%,光—暗周期為14 h—10 h]以菜豆豆莢長期繼代飼養(yǎng)達20代以上。

    1.1.2 供試寄主

    菜豆品種選自河北省辛集市盛農(nóng)種子公司的金束鹿泰國地豆王,于人工氣候室(條件同人工氣候箱)內(nèi)培養(yǎng)菜豆植株,每營養(yǎng)缽(直徑10 cm,高9 cm)培育2株清潔苗,待菜豆長至15 cm左右、3~4張真葉時,取長勢一致的菜豆植株作為供試寄主植物,生長期間不施用任何農(nóng)藥。

    蠶豆品種選自康樂縣進忠農(nóng)產(chǎn)品實業(yè)開發(fā)有限責任公司的臨蠶五號,于人工氣候室內(nèi)培養(yǎng)蠶豆植株(條件同上),每營養(yǎng)缽(直徑10 cm,高9 cm)培育4株清潔苗,待蠶豆長至15 cm左右、8~10張葉時,取長勢一致的蠶豆植株作為供試寄主植物。生長期間不施用任何農(nóng)藥。

    1.2 試驗方法

    1.2.1 菜豆和蠶豆植株上F1代西花薊馬的飼養(yǎng)及2齡若蟲和成蟲的取樣

    選取健康、長勢一致的菜豆、蠶豆植株各60缽,每個養(yǎng)蟲籠中放置12缽寄主植株,取人工氣候箱內(nèi)菜豆豆莢上飼養(yǎng)的已交配3 d的西花薊馬雌成蟲分別接到菜豆植株和蠶豆植株上,每缽植株約100頭雌成蟲,24 h后,剔除所接所有成蟲,每天觀察葉片上孵化出的若蟲情況,待西花薊馬若蟲達2齡階段,每個養(yǎng)蟲籠中挑取200頭若蟲為1個樣,放入1.5 mL離心管中,貼上標簽,立即用液氮冷凍于-80 ℃下冰箱中保存,以備提取總RNA時取用。同時保留一定若蟲繼續(xù)在植株上飼養(yǎng),至成蟲階段后取成蟲150頭放入1.5 mL離心管中,貼上標簽,立即用液氮冷凍于-80 ℃下冰箱中保存,以備提取總RNA時取用。在飼養(yǎng)過程中,如有萎蔫植株,及時補加新鮮長勢相同的植株。試驗設(shè)置5個養(yǎng)蟲籠,每個養(yǎng)蟲籠的西花薊馬為1個重復。

    1.2.2 菜豆和蠶豆植株上F2代西花薊馬的飼養(yǎng)及2齡若蟲和成蟲的取樣

    在“1.2.1”節(jié)中成蟲取樣2~3 d后,另取已交配的F1代雌成蟲100頭,依照“1.2.1”節(jié)中相同的方法轉(zhuǎn)移到新的養(yǎng)蟲籠健康的同種植株上,待分別發(fā)育到2齡若蟲和成蟲后,對2齡若蟲和成蟲取樣,貼上標簽后,立即用液氮冷凍置于-80 ℃下冰箱中保存。試驗設(shè)置5個養(yǎng)蟲籠,每個養(yǎng)蟲籠的西花薊馬為1個重復。

    1.2.3 菜豆和蠶豆植株上F3代西花薊馬的飼養(yǎng)及2齡若蟲和成蟲的取樣

    在“1.2.2”節(jié)的中成蟲取樣2~3 d后,另取已交配的F2代雌成蟲100頭,依照“1.2.1”節(jié)中相同的方法轉(zhuǎn)移到新的養(yǎng)蟲籠健康的同種植株上,待分別發(fā)育到2齡若蟲和成蟲后,對2齡若蟲和成蟲取樣,貼上標簽后,立即用液氮冷凍置于-80 ℃下冰箱中保存。試驗設(shè)置5個養(yǎng)蟲籠,每個養(yǎng)蟲籠的西花薊馬為1個重復。

    試驗以菜豆豆莢上長期繼代飼養(yǎng)的西花薊馬2齡若蟲及雌成蟲為對照。

    1.2.4 西花薊馬成蟲和2齡若蟲總RNA的提取

    參照SV Total RNA分離純化試劑盒(Promega)說明書步驟進行西花薊馬成蟲和2齡若蟲總RNA的提取,取吸光度比D260 nm/D280 nm處于1.9~2.1之間及D260 nm/D230 nm為2.1左右的RNA備用。

    1.2.5 反轉(zhuǎn)錄

    根據(jù)RevertAid First Strant cDNA Synthesis Kit反轉(zhuǎn)錄試劑盒(Thermo)的操作方法進行反轉(zhuǎn)錄。

    1.2.6 引物設(shè)計

    引物序列CL4520.Contig1_All-F:CGGTTGTGGAATGGCTAA;CL4520.Contig1_All-R:ACTAGAACGGACGGACTC。引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。

    1.2.7 實時熒光定量(realtime qPCR)分析

    以西花薊馬EF-1基因作為內(nèi)參基因[26]。本試驗借助Mx3000PTM熒光定量PCR儀和MxPro軟件,以FastStart Essential DNA Green Master(Roche公司)為熒光染料,根據(jù)qPCR結(jié)果得到的CT值采用2-ΔΔCT法進行基因相對表達量的計算。

    1.3 數(shù)據(jù)分析

    用Excel 2016和SPSS 19.0軟件對試驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計和分析,不同世代間差異性分析用Duncans多重比較,2齡若蟲和成蟲兩蟲態(tài)間、菜豆和蠶豆植株間的差異均采用獨立樣本t檢驗。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 取食菜豆植株對西花薊馬不同世代胰蛋白酶基因CL4520.Contig1表達量的影響

    由圖1可知,西花薊馬從菜豆豆莢轉(zhuǎn)換到菜豆植株后,西花薊馬2齡若蟲體內(nèi)胰蛋白酶基因CL4520.Contig1的表達量在F1代顯著下降;到F2代后,表達量有所上升,與對照和F1代差異均不顯著;到F3代CL4520.Contig1的表達量與F2代大致相當。西花薊馬2齡若蟲體內(nèi)胰蛋白酶基因CL4520.Contig1的表達量在F1代、F2代和F3代依次比對照降低61.86%、13.16%和19.10%。

    成蟲體內(nèi)胰蛋白酶基因CL4520.Contig1的表達量在F1代也顯著下降;到了F2代下降更為明顯,達到最低水平,比對照降低了88.03%;到F3代后,西花薊馬成蟲體內(nèi)CL4520.Contig1的表達量上升到了對照水平。

    西花薊馬取食菜豆植株F2代時,2齡若蟲體內(nèi)CL4520.Contig1的表達量顯著高于成蟲;取食菜豆植株F1代和F3代時,均是成蟲體內(nèi)CL4520.Contig1的表達量顯著高于2齡若蟲。

    [FK(W14][TPXW11.tif;S+3mm][FK)]

    2.2 取食蠶豆植株對西花薊馬不同世代胰蛋白酶基因CL4520.Contig1表達量的影響

    由圖2可知,西花薊馬從菜豆豆莢轉(zhuǎn)換到蠶豆植株后,2齡若蟲體內(nèi)CL4520.Contig1的表達量在F1代有所上升但和對照差異不顯著;到F2代后,表達量顯著上升,達到最高水平,為對照的6.06倍;到F3代CL4520.Contig1的表達量雖比F2代顯著下降,但仍顯著高于F1代和對照。

    成蟲體內(nèi)CL4520.Contig1的表達量轉(zhuǎn)移到蠶豆植株后均顯著升高,在F1代和F2代分別為對照的3.93倍和6.44倍,且在F2代達到最高水平,F(xiàn)3代CL4520.Contig1的表達量雖略有下降,但與F2代差異不顯著。

    西花薊馬取食蠶豆植株F2代時,2齡若蟲和成蟲體內(nèi)CL4520.Contig1的表達量差異不顯著,而取食蠶豆植株F1代和F3代時,均是成蟲體內(nèi)CL4520.Contig1的表達量顯著高于2齡若蟲。

    2.3 取食不同寄主對西花薊馬體內(nèi)胰蛋白酶基因CL4520.Contig1表達量的影響

    由表1可知,取食不同嗜食寄主植株西花薊馬相同世代和同一蟲態(tài)下體內(nèi)胰蛋白酶基因CL4520.Contig1表達量不同,均是取食蠶豆植株的CL4520.Contig1[JP3]表達量顯著高于取食菜豆植株的。西花薊馬2齡若蟲體內(nèi)胰蛋白酶基因CL4520.Contig1表達量在取食蠶豆植株的F1代、F2代、F3代分別是取食菜豆植株的F1代、F2代、F3代的6.10倍、6.98、5.07 倍,成蟲體內(nèi)的表達量也是在取食蠶豆植株時高,分別是取食菜豆的9.16、53.82、6.34倍。

    3 討論

    昆蟲體內(nèi)的消化酶與取食的食物密切相關(guān),其酶活性的高低是判斷昆蟲對不同寄主適合度的重要指標[27]。通常情況下,基因表達量上升會導致其編碼的蛋白質(zhì)表達量升高,進而會使其相應酶活性增強[28-29]。本研究發(fā)現(xiàn)同一世代和相同蟲態(tài)下取食非嗜食寄主蠶豆植株的西花薊馬體內(nèi)胰蛋白酶基因CL4520.Contig1表達量顯著高于取食較嗜食寄主菜豆植株的??赡苁且驗槲骰ㄋE馬取食非嗜食寄主蠶豆時,為了更好地分解吸收寄主植物營養(yǎng)物質(zhì)而增加胰蛋白酶基因的表達量,從而增加體內(nèi)胰蛋白酶的量。此研究結(jié)果和Leo等研究結(jié)果一致,當斜紋夜蛾取食不適宜寄主時,通過蛋白半胱氨酸消化酶的過量表達來適應植物[30]。但也有研究表明,昆蟲取食不同寄主植物時,其消化酶活性與對寄主的嗜食度基本呈正相關(guān),與本研究結(jié)果正好相反。如張娜等研究發(fā)現(xiàn),甜菜夜蛾5齡幼蟲取食3種不同適合度寄主植物后,其體內(nèi)淀粉酶和脂肪酶活性隨嗜食度的降低而依次降低[31]。王倩倩等的研究表明,取食藜、大豆和向日葵3種喜食寄主的草地螟幼蟲中腸消化酶較取食其他2種非喜食寄主植物的中腸消化酶活性更強[32]。閻雄飛等研究發(fā)現(xiàn),取食適宜寄主復葉槭和漳河柳的光肩星天牛成蟲消化道的淀粉酶、果膠酶和胃蛋白酶活性顯著高于取食抗性寄主新疆楊和白蠟的這3種消化酶的活性[33]。還有研究表明,胰蛋白酶基因表達量與寄主嗜食度無關(guān)。如孫洋等研究測定了綠盲蝽取食8種不同嗜食度寄主后體內(nèi)一種胰蛋白酶基因的表達量,體內(nèi)AlSP4基因表達量在嗜食寄主和非嗜食寄主上無規(guī)律可言,與寄主的嗜食度無關(guān)[34-36]??赡苁且驗椴煌瑢W者研究的消化酶基因不同,其參與的分子調(diào)節(jié)機制也不同,也有可能是因為昆蟲種類不同,其適應不同寄主的機制也不同,具體原因還需進一步研究。

    本研究結(jié)果表明,當轉(zhuǎn)換寄主后,F(xiàn)1代西花薊馬2齡若蟲和成蟲體內(nèi)胰蛋白酶基因CL4520.Contig1表達量會發(fā)生較大變化,除取食菜豆植株的F2代2齡若蟲外,其余均在F2代達到最高水平或最低水平,到F3代時,取食菜豆植株的西花薊馬表達量恢復到對照水平,取食蠶豆植株的表達量仍然顯著高于對照??赡苁寝D(zhuǎn)換到較嗜食寄主后,西花薊馬通過調(diào)控自身酶基因表達量,在F3代就適應了寄主,而轉(zhuǎn)換到非嗜食寄主后,適應過程較長,在F3代并不能很好地適應寄主,因此繼續(xù)通過提高酶基因表達量達到適應寄主的目的。

    本研究結(jié)果表明,西花薊馬取食同種寄主植株的情況下,除了取食菜豆植株的F2代西花薊馬2齡若蟲體內(nèi)胰蛋白酶基因CL4520.Contig1表達量比成蟲高,其余的成蟲表達量均比同一世代2齡若蟲高,說明不同蟲態(tài)對寄主的適應能力不同。郅軍銳等研究發(fā)現(xiàn),西花薊馬2齡若蟲和成蟲取食健康和二斑葉螨危害后的菜豆植株后體內(nèi)保護酶和解毒酶活性的變化和蟲態(tài)、酶的種類及寄主有關(guān),也說明了在適應寄主過程中酶變化的復雜性[37]。

    本研究揭示了西花薊馬體內(nèi)胰蛋白酶基因CL4520.Contig1對菜豆和蠶豆2種不同嗜好寄主的適應過程。至于西花薊馬取食其他不同寄主之后體內(nèi)胰蛋白酶基因和其他消化酶基因表達量如何改變,不同消化酶基因如何協(xié)調(diào),如何適應對不同類別寄主,還須進一步研究。

    參考文獻:

    [1]陳明順,仵均祥,張國輝. 植物誘導性直接防御[J]. 昆蟲知識,2009,46(2):175-186.

    [2]彭 露,嚴 盈,劉萬學,等. 植食性昆蟲對植物的反防御機制[J]. 昆蟲學報,2010,53(5):572-580.

    [3]王 琳. 昆蟲淀粉酶蛋白質(zhì)類抑制劑研究進展[J]. 廣東農(nóng)業(yè)科學,2006,46(8):110-113.

    [4]嚴 盈,劉萬學,萬方浩. 唾液成分在刺吸式昆蟲與植物關(guān)系中的作用[J]. 昆蟲學報,2008,51(5):537-544.

    [5]周 隆,文禮章,張友軍. 不同寄主植物對煙粉虱消化酶和氨基酸代謝酶活性的影響[C]//華中昆蟲研究(第七卷). 北京:中國農(nóng)業(yè)科學技術(shù)出版社,2011:38-44.

    [6]姜麗娜,錢 蕾,喜 超,等. CO2濃度升高對不同寄主植物上西花薊馬和花薊馬成蟲體內(nèi)消化酶活性的影響[J]. 昆蟲學報,2017,60(3):237-246.

    [7]Ashman R F. Enzymatic modification of lymphocyte receptors for antigen. Ⅲ. Resistance of receptors to trypsin at the peak of the immune response[J]. European Journal of Immunology,1976,5(6):421-425.

    [8]張友軍,吳青君,徐寶云,等. 危險性外來入侵生物——西花薊馬在北京發(fā)生危害[J]. 植物保護,2003,29(4):58-59.

    [9]劉若思,劉 燕,王 軍,等. 重要外來入侵害蟲西花薊馬在吉林省部分地區(qū)的首次發(fā)現(xiàn)[J]. 北京農(nóng)學院學報,2015,30(2):24-27.

    [10]楊 華,何 偉,崔元玗,等. 西花薊馬在新疆設(shè)施蔬菜種植區(qū)的發(fā)生與分布[J]. 新疆農(nóng)業(yè)科學,2016,53(1):38-42.

    [11]張治科,張 燁,吳圣勇. 西花薊馬在寧夏的發(fā)生及防控措施[J]. 植物檢疫,2016,30(4):75-77.

    [12]高振江,張冬梅,高 娃,等. 害蟲西花薊馬在內(nèi)蒙古中西部地區(qū)的發(fā)生與分布[J]. 北方農(nóng)業(yè)學報,2017,45(2):82-85.

    [13]Kirk W J,Terry L I. The spread of the western flower thrips Frankliniella occidentalis (Pergande)[J]. Agric Forest Entomol,2003,5(4):301-310.

    [14]Whitfield A E,Ullman D E,German T L. Tospovirus-thrips interactions[J]. Annual Review of Phytopathology,2005,43:459-489.

    [15]Adkins S. Tomato spotted wilt virus—Positive steps towards negative success[J]. Molecular Plant Pathology,2000,1(3):151-157.

    [16]Manners A G,Dembowski B R,Madaline A H. Biological control of western flower thrips,F(xiàn)rankliniella occidentalis(Pergande)(Thysanoptera:Thripidae),in gerberas,chrysanthemums and roses[J]. Australian Journal of Entomology,2013,52(3):134-137.

    [17]李景柱,郅軍銳,鄭珊珊. 西花薊馬對不同豆科蔬菜寄主的選擇性[J]. 貴州農(nóng)業(yè)科學,2010,38(9):103-105.

    [18]裴昌瑩,鄭長英. 西花薊馬對不同蔬菜寄主的選擇性研究[J]. 中國生態(tài)農(nóng)業(yè)學報,2011,19(2):383-387.

    [19]曹 宇,劉 燕,熊正利,等. 西花薊馬對不同花卉寄主的產(chǎn)卵選擇性[J]. 植物保護學報,2015,42(5):741-748.

    [20]王倩倩,李克斌,尹 姣,等. 不同寄主植物對昆蟲生長發(fā)育的影響[C]//創(chuàng)新驅(qū)動與現(xiàn)代植保——中國植物保護學會第十一次全國會員代表大會暨2013年學術(shù)年會論文集.北京:中國農(nóng)業(yè)科學技術(shù)出版社,2013.

    [21]Kotkar H M,Sarate P J,Tamhane V A,et al. Responses of midgut amylases of Helicoverpa armigera to feeding on various host plants[J]. Journal of Insect Physiology,2009,55(8):663-670.

    [22]徐 偉,張吉輝,畢嘉瑞,等. 寄主植物對雙斑螢葉甲中腸消化酶和解毒酶活性的影響[J]. 吉林農(nóng)業(yè)大學學報,2018,40(5):23-28.

    [23]牟 峰. 不同處理菜豆植株對西花薊馬生長發(fā)育和酶活性的影響[D]. 貴陽:貴州大學,2015.

    [24]蒲恒滸,郅軍銳,曾 廣,等. 不同誘導處理對番茄植株保護酶及西花薊馬體內(nèi)消化酶活性的影響[J]. 植物保護學報,2018,45(4):915-916.

    [25]袁成明,郅軍銳,曹 宇,等. 西花薊馬對蔬菜寄主的選擇性[J]. 生態(tài)學報,2011,31(6):1720-1726.

    [26]Zheng Y T,Li H B,Lu M X,et al. Evaluation and validation of reference genes for qRT-PCR normalization in Frankliniella occidentalis (Thysanoptera:Thripidae)[J]. PLoS one,2014,9(10):e111369.

    [27]賈 冰,譚 瑤,付曉彤,等. 不同寄主植物對牧草盲蝽生長發(fā)育、繁殖及消化酶活性的影響[J]. 草業(yè)科學,2018,301(8):162-171.

    [28]Pan Y O,Guo H L,Gao X W. Carboxylesterase activity,cDNA sequence,and gene expression in malathion susceptible and resistant strains of the cotton aphid,Aphis gossypii[J]. Comparative Biochemistry and Physiology B-Biochemistry & Molecular Biology,2009,152(3):266-270.

    [29]Zhou X J,Sheng C F,Li M,et al. Expression responses of nine cytochrome P450 genes to xenobiotics in the cotton bollworm Helicoverpa armigera[J]. Pesticide Biochemistry and Physiology,2010,97(3):209-213.

    [30]Leo F D,Bonadé-Bottino M A. Opposite effects on spodoptera littoralis larvae of high expression level of a trypsin proteinase inhibitor in transgenic plants[J]. Plant Physiology,1998,118(3):997-1004.

    [31]張 娜,郭建英,萬方浩,等. 寄主植物對甜菜夜蛾生長發(fā)育和消化酶活性的影響[J]. 植物保護學報,2009,36(2):146-150.

    [32]王倩倩,王 蕾,李克斌,等. 不同寄主植物對草地螟的營養(yǎng)作用及消化酶的影響[J]. 植物保護,2015,41(4):46-51.

    [33]閻雄飛,劉 娟,劉永華. 不同寄主對光肩星天牛成蟲消化酶的影響[J]. 湖北農(nóng)業(yè)科學,2012,51(18):4010-4013.

    [34]徐文華,王瑞明,林付根,等. 棉盲蝽的寄主種類、轉(zhuǎn)移規(guī)律、生態(tài)分布與寄主的適合度[J]. 江西農(nóng)業(yè)學報,2007,19(12):45-50,56.

    [35]魏書艷,肖留斌,譚永安,等. 不同寄主受綠盲蝽危害后生理代謝指標的變化[J]. 植物保護學報,2010,37(4):359-364.

    [36]孫 洋,柏立新,張永軍,等. 綠盲蝽絲氨酸蛋白酶基因AlSP4的克隆及取食不同寄主植物后的表達譜分析[J]. 昆蟲學報,2012,55(6):641-650.

    [37]郅軍銳,田 甜,溫 娟,等. 西花薊馬或二斑葉螨為害的菜豆對兩者間后取食者體內(nèi)保護酶和解毒酶活性的影響[J]. 昆蟲學報,2016,59(7):707-715.

    99在线人妻在线中文字幕| 日本三级黄在线观看| 简卡轻食公司| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 一级二级三级毛片免费看| 欧美精品国产亚洲| 久久久久久久久久黄片| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 91av网一区二区| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 蜜臀久久99精品久久宅男| 日韩一本色道免费dvd| 亚洲精品aⅴ在线观看| 色综合色国产| 欧美日韩综合久久久久久| 欧美区成人在线视频| 亚洲第一区二区三区不卡| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 成年版毛片免费区| 国产欧美日韩精品一区二区| 99热这里只有是精品50| 老女人水多毛片| 91精品国产九色| 亚洲精品456在线播放app| 精品无人区乱码1区二区| 简卡轻食公司| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 久久久国产成人免费| 久久午夜福利片| 一个人观看的视频www高清免费观看| 亚洲国产精品成人综合色| 岛国在线免费视频观看| 免费搜索国产男女视频| 欧美zozozo另类| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 国产亚洲91精品色在线| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 成人亚洲欧美一区二区av| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 激情 狠狠 欧美| 成人av在线播放网站| 直男gayav资源| 一个人看的www免费观看视频| 免费看a级黄色片| 少妇的逼好多水| 一本久久精品| 一级爰片在线观看| 三级国产精品欧美在线观看| 97超视频在线观看视频| 国内精品宾馆在线| 欧美一级a爱片免费观看看| 小说图片视频综合网站| 99热网站在线观看| 97热精品久久久久久| 国产一级毛片在线| 国产精品乱码一区二三区的特点| 亚洲成人精品中文字幕电影| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 精品人妻熟女av久视频| 国产一区有黄有色的免费视频 | 欧美精品一区二区大全| 男女边吃奶边做爰视频| 久久国内精品自在自线图片| 久久久a久久爽久久v久久| 免费av不卡在线播放| 日本色播在线视频| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 亚洲精华国产精华液的使用体验| 欧美97在线视频| 国产色婷婷99| 久久这里有精品视频免费| 欧美潮喷喷水| 在线播放无遮挡| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 赤兔流量卡办理| 搞女人的毛片| 日本-黄色视频高清免费观看| 欧美又色又爽又黄视频| 男女下面进入的视频免费午夜| 久久精品影院6| 丰满少妇做爰视频| 高清毛片免费看| 亚洲色图av天堂| 黄片wwwwww| 日韩强制内射视频| 熟女人妻精品中文字幕| 亚洲欧美成人精品一区二区| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲国产欧洲综合997久久,| 午夜精品在线福利| 日本一本二区三区精品| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 91久久精品国产一区二区成人| 久久精品久久精品一区二区三区| 啦啦啦韩国在线观看视频| 国产在线一区二区三区精 | 干丝袜人妻中文字幕| 亚洲精品456在线播放app| 桃色一区二区三区在线观看| 国产精品蜜桃在线观看| 中文在线观看免费www的网站| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 日本与韩国留学比较| 色哟哟·www| 在线免费十八禁| 中文字幕久久专区| 2021天堂中文幕一二区在线观| 成人特级av手机在线观看| 水蜜桃什么品种好| 欧美潮喷喷水| 亚洲精品aⅴ在线观看| 一边亲一边摸免费视频| 国产精品国产三级国产专区5o | 最近中文字幕高清免费大全6| 啦啦啦啦在线视频资源| 欧美日韩国产亚洲二区| 91aial.com中文字幕在线观看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 久久久久性生活片| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 亚洲欧美精品专区久久| 高清日韩中文字幕在线| 日韩制服骚丝袜av| 免费在线观看成人毛片| 成人鲁丝片一二三区免费| 亚洲不卡免费看| 中文字幕久久专区| 赤兔流量卡办理| 国产伦在线观看视频一区| 九草在线视频观看| 伦理电影大哥的女人| 日韩欧美 国产精品| 久久精品国产自在天天线| 成年女人永久免费观看视频| 身体一侧抽搐| 精品国产露脸久久av麻豆 | 亚洲欧美精品综合久久99| 国产精品久久久久久久久免| av线在线观看网站| 国产一区有黄有色的免费视频 | 久久久久性生活片| 国产在线一区二区三区精 | 人人妻人人澡欧美一区二区| 亚洲欧美日韩无卡精品| 日本wwww免费看| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 最近最新中文字幕免费大全7| 丰满乱子伦码专区| 97热精品久久久久久| 国产一区有黄有色的免费视频 | 久久精品久久精品一区二区三区| 热99re8久久精品国产| 日韩一区二区视频免费看| 1000部很黄的大片| 亚洲精品国产成人久久av| 日本欧美国产在线视频| 国产三级中文精品| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 中文字幕制服av| 亚洲成色77777| 91久久精品电影网| 精品酒店卫生间| 午夜福利网站1000一区二区三区| 免费观看a级毛片全部| 黑人高潮一二区| av在线播放精品| 欧美色视频一区免费| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 中文资源天堂在线| 欧美不卡视频在线免费观看| 又粗又爽又猛毛片免费看| 亚洲av成人av| 免费观看性生交大片5| 97热精品久久久久久| 国产精品蜜桃在线观看| 99久久成人亚洲精品观看| 国产精品99久久久久久久久| 国产极品天堂在线| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产黄色小视频在线观看| 国产在视频线精品| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 看免费成人av毛片| 亚洲精品自拍成人| 国产精品久久久久久精品电影| 免费观看性生交大片5| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 在线a可以看的网站| 国产成年人精品一区二区| 国产精品一区www在线观看| 国产亚洲精品av在线| 国内揄拍国产精品人妻在线| 亚洲人与动物交配视频| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 亚洲三级黄色毛片| 亚洲精品,欧美精品| 毛片一级片免费看久久久久| 联通29元200g的流量卡| 婷婷色综合大香蕉| 国产真实乱freesex| 欧美+日韩+精品| www.色视频.com| 久久久色成人| 国产又色又爽无遮挡免| 久久久久久伊人网av| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产成人免费观看mmmm| 免费看日本二区| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲国产欧美人成| 老女人水多毛片| 日韩一本色道免费dvd| 偷拍熟女少妇极品色| 乱码一卡2卡4卡精品| 日本与韩国留学比较| 一边摸一边抽搐一进一小说| 中国美白少妇内射xxxbb| 美女大奶头视频| 亚洲最大成人手机在线| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 久久这里只有精品中国| 午夜爱爱视频在线播放| 色网站视频免费| 精品久久久久久久久av| 国产69精品久久久久777片| 在线天堂最新版资源| 欧美精品国产亚洲| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产成人精品久久久久久| 综合色av麻豆| 欧美极品一区二区三区四区| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 国产一区二区在线av高清观看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 国产伦一二天堂av在线观看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 国内精品宾馆在线| 国产精品不卡视频一区二区| 国产成人免费观看mmmm| 免费看日本二区| 两个人的视频大全免费| 精品久久久久久久末码| 秋霞伦理黄片| 日韩中字成人| 亚洲va在线va天堂va国产| 免费观看精品视频网站| 国产真实伦视频高清在线观看| 能在线免费看毛片的网站| av在线老鸭窝| 色网站视频免费| 男女啪啪激烈高潮av片| 日本午夜av视频| 国产精品久久久久久精品电影| 久久精品综合一区二区三区| 国产黄色小视频在线观看| 日本一二三区视频观看| 精品久久久噜噜| 永久网站在线| 国产精品一区二区三区四区久久| 99久国产av精品国产电影| 成人欧美大片| 婷婷色麻豆天堂久久 | 成人欧美大片| 男人舔奶头视频| 嫩草影院精品99| 久久精品国产鲁丝片午夜精品| 国产成人精品久久久久久| 一夜夜www| 国产大屁股一区二区在线视频| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 亚洲国产精品成人综合色| 成人午夜精彩视频在线观看| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 日本黄色视频三级网站网址| 两个人视频免费观看高清| 亚洲丝袜综合中文字幕| 午夜a级毛片| 国产老妇伦熟女老妇高清| 国产精品国产高清国产av| 久久久久久大精品| 国产免费又黄又爽又色| 色综合亚洲欧美另类图片| 在线免费观看不下载黄p国产| 国语自产精品视频在线第100页| 综合色av麻豆| 国产精品野战在线观看| 国产一区亚洲一区在线观看| 别揉我奶头 嗯啊视频| av播播在线观看一区| 亚洲欧美日韩高清专用| 欧美区成人在线视频| 99国产精品一区二区蜜桃av| 看黄色毛片网站| 久久久成人免费电影| 少妇熟女欧美另类| 男的添女的下面高潮视频| 免费搜索国产男女视频| 少妇熟女aⅴ在线视频| 久久久久久大精品| 一个人看视频在线观看www免费| 国产真实伦视频高清在线观看| 毛片一级片免费看久久久久| 国产高清三级在线| 亚洲精品aⅴ在线观看| 成人特级av手机在线观看| 91精品国产九色| 欧美日韩综合久久久久久| АⅤ资源中文在线天堂| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 不卡视频在线观看欧美| 99热网站在线观看| 亚洲av熟女| 国产一区有黄有色的免费视频 | 不卡视频在线观看欧美| 免费电影在线观看免费观看| 国产中年淑女户外野战色| 亚洲无线观看免费| 亚洲怡红院男人天堂| 国产成人aa在线观看| 搞女人的毛片| 在线免费观看的www视频| 能在线免费观看的黄片| 久久鲁丝午夜福利片| 国产亚洲91精品色在线| 中文字幕亚洲精品专区| av国产免费在线观看| 国产精品国产三级国产专区5o | 麻豆av噜噜一区二区三区| 男女啪啪激烈高潮av片| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| av在线蜜桃| 亚洲va在线va天堂va国产| 国产精品人妻久久久影院| 啦啦啦啦在线视频资源| 22中文网久久字幕| 亚洲四区av| 老司机影院毛片| 免费看美女性在线毛片视频| kizo精华| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 精品久久久噜噜| 久久这里只有精品中国| av线在线观看网站| 看非洲黑人一级黄片| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 国产av码专区亚洲av| 91久久精品国产一区二区成人| 搞女人的毛片| 超碰av人人做人人爽久久| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 变态另类丝袜制服| 亚洲在线观看片| 日韩精品有码人妻一区| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲国产精品sss在线观看| 午夜激情欧美在线| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 亚洲人与动物交配视频| 亚洲av中文av极速乱| 日本一二三区视频观看| 亚洲中文字幕日韩| 午夜免费激情av| 国产精品一区二区在线观看99 | 毛片一级片免费看久久久久| 精品酒店卫生间| 视频中文字幕在线观看| 国产免费男女视频| 精品免费久久久久久久清纯| 国产成人freesex在线| 欧美性感艳星| 伦精品一区二区三区| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 美女黄网站色视频| 精品久久久久久久久久久久久| 精华霜和精华液先用哪个| 美女高潮的动态| 午夜福利在线在线| 能在线免费观看的黄片| 日韩人妻高清精品专区| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 亚洲av日韩在线播放| 一级毛片我不卡| 欧美日本视频| 又粗又爽又猛毛片免费看| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 国产精品日韩av在线免费观看| 免费黄色在线免费观看| 日韩国内少妇激情av| 美女国产视频在线观看| 一级毛片我不卡| 国产伦在线观看视频一区| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 男女啪啪激烈高潮av片| 水蜜桃什么品种好| 婷婷色麻豆天堂久久 | av在线观看视频网站免费| 午夜激情欧美在线| 亚洲av中文av极速乱| 日韩欧美精品免费久久| 久久这里有精品视频免费| 一级黄片播放器| 久久久精品大字幕| 精品人妻偷拍中文字幕| 免费观看性生交大片5| 青春草视频在线免费观看| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 国产av一区在线观看免费| 午夜a级毛片| 免费看日本二区| 欧美日本亚洲视频在线播放| 国产69精品久久久久777片| 村上凉子中文字幕在线| 男人狂女人下面高潮的视频| 亚洲欧洲国产日韩| 日韩欧美国产在线观看| 长腿黑丝高跟| 国产欧美日韩精品一区二区| 综合色av麻豆| 亚洲,欧美,日韩| 激情 狠狠 欧美| 久久久久久久久中文| 男女边吃奶边做爰视频| 久久这里有精品视频免费| 亚洲av福利一区| 久久久a久久爽久久v久久| 国产精品一区二区三区四区久久| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚洲最大成人av| 欧美高清成人免费视频www| 久久久久久久午夜电影| 人人妻人人看人人澡| 精品久久国产蜜桃| 看黄色毛片网站| 最近视频中文字幕2019在线8| 国产激情偷乱视频一区二区| 国产精品三级大全| 中文字幕av在线有码专区| 国产精品精品国产色婷婷| 少妇的逼水好多| 中国国产av一级| 亚洲人成网站在线观看播放| 亚洲精品国产成人久久av| 国产亚洲精品av在线| 国产精品女同一区二区软件| 久久精品国产亚洲av涩爱| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 国产熟女欧美一区二区| 麻豆成人午夜福利视频| 神马国产精品三级电影在线观看| 免费看av在线观看网站| 午夜a级毛片| 欧美高清性xxxxhd video| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 亚洲国产高清在线一区二区三| 国产亚洲av嫩草精品影院| 综合色av麻豆| 内地一区二区视频在线| 蜜臀久久99精品久久宅男| 欧美xxxx性猛交bbbb| 国产精品久久久久久久电影| 日韩成人av中文字幕在线观看| 国产午夜精品一二区理论片| АⅤ资源中文在线天堂| 99热这里只有是精品50| 免费av毛片视频| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 中文字幕精品亚洲无线码一区| 国产精品久久久久久久电影| 久久99热这里只频精品6学生 | 日日啪夜夜撸| 日韩 亚洲 欧美在线| 麻豆久久精品国产亚洲av| 久久久色成人| 国产成人精品久久久久久| 国内精品宾馆在线| 免费观看在线日韩| 国产精华一区二区三区| 日本免费在线观看一区| 好男人视频免费观看在线| 成年版毛片免费区| 一二三四中文在线观看免费高清| 伦精品一区二区三区| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产精品人妻久久久久久| 久久久久久大精品| 国产精品人妻久久久久久| 亚洲最大成人av| 97超碰精品成人国产| 听说在线观看完整版免费高清| 麻豆成人av视频| 丰满少妇做爰视频| 日韩人妻高清精品专区| 内地一区二区视频在线| 天堂√8在线中文| 精品少妇黑人巨大在线播放 | 国产极品天堂在线| 国产av一区在线观看免费| 97在线视频观看| 大香蕉久久网| 好男人在线观看高清免费视频| 亚洲欧美精品专区久久| 久久久a久久爽久久v久久| 我要看日韩黄色一级片| 人体艺术视频欧美日本| 国产乱来视频区| 国产成人91sexporn| 久久这里有精品视频免费| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 一区二区三区高清视频在线| 欧美极品一区二区三区四区| 亚洲内射少妇av| 欧美激情久久久久久爽电影| 一本一本综合久久| av免费观看日本| 国产日韩欧美在线精品| 最近中文字幕高清免费大全6| 天堂中文最新版在线下载 | 嫩草影院精品99| 一级黄色大片毛片| 亚洲最大成人手机在线| 亚洲精品自拍成人| 精品午夜福利在线看| 一区二区三区乱码不卡18| 伦精品一区二区三区| 99久久精品国产国产毛片| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 精品久久久久久久久久久久久| 久久久成人免费电影| 联通29元200g的流量卡| 丝袜美腿在线中文| 男的添女的下面高潮视频| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 韩国高清视频一区二区三区| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 久久久久免费精品人妻一区二区| www.色视频.com| 国产高清三级在线| 精品国产三级普通话版| 日本黄色片子视频| 亚洲中文字幕日韩| 卡戴珊不雅视频在线播放| 亚洲成色77777| 亚洲av熟女| 成年版毛片免费区| 男女视频在线观看网站免费| 日韩成人伦理影院| 日本爱情动作片www.在线观看| 人人妻人人看人人澡| 偷拍熟女少妇极品色| 又黄又爽又刺激的免费视频.| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 成年av动漫网址| 欧美又色又爽又黄视频| 99热这里只有是精品在线观看| ponron亚洲| 亚洲欧美一区二区三区国产| 欧美精品一区二区大全| 51国产日韩欧美| 亚洲精品aⅴ在线观看| 毛片一级片免费看久久久久| 欧美变态另类bdsm刘玥| 日韩大片免费观看网站 | 嘟嘟电影网在线观看| 精品人妻视频免费看| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 国产精品久久久久久av不卡| 美女被艹到高潮喷水动态| 日本午夜av视频| 热99re8久久精品国产| 高清午夜精品一区二区三区| av国产久精品久网站免费入址| 99视频精品全部免费 在线| 日韩高清综合在线| 国产一区二区三区av在线| 国产探花在线观看一区二区| 在线观看一区二区三区| 18禁动态无遮挡网站| 亚洲综合色惰| 欧美成人免费av一区二区三区| 亚洲av成人av| 国产精品一区二区在线观看99 | 国产成人福利小说| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 插阴视频在线观看视频| 你懂的网址亚洲精品在线观看 | 波多野结衣高清无吗| 免费黄网站久久成人精品| 日韩大片免费观看网站 | 国产真实伦视频高清在线观看| 乱系列少妇在线播放| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 日韩高清综合在线| 中文天堂在线官网| videos熟女内射| 精品久久久久久久久av| 国产精品1区2区在线观看.| 综合色av麻豆| 在线天堂最新版资源| 中文字幕制服av| 亚洲国产精品专区欧美| 高清视频免费观看一区二区 | 91久久精品国产一区二区三区| .国产精品久久| 国产单亲对白刺激| 精品久久久久久久久av| 国产午夜精品一二区理论片| 99久久精品国产国产毛片| 精品国产三级普通话版| 91精品一卡2卡3卡4卡|