康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的毒力測定

楊廣明 王興紅 黃振興 劉曼

（1 貴州省生物研究所，貴陽 550025；2 貴州省養(yǎng)蜂學(xué)會，貴陽 550001）

大蠟螟（Galleria mellonellaL.）隸屬鱗翅目（Lepidoptera）、螟蛾科（Pyralidae）、蠟螟亞科（Galleriinae）、蠟螟屬（Galleria Fabricius），又名巢蟲、綿蟲、隧道蟲，是中華蜜蜂（Apis cerana cerana）最主要的蟲害之一[1，2]。大蠟螟是世界性大害蟲，分布廣泛，主要以幼蟲危害蜜蜂，1～2 齡幼蟲沿著巢脾內(nèi)有蜜蜂幼蟲殘余物及繭衣的巢房蛀食巢脾，駐壞蜂具[3]；3～4 齡幼蟲會造成蜜蜂的蛹和幼蟲死亡，出現(xiàn)“白頭蛹”，若不及時處理，輕則子脾受損、群勢下降、產(chǎn)蜜量減少，重則整群蜂巢脾被毀，蜂群棄巢而逃，給養(yǎng)蜂業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟損失[3，4]。

目前，大蠟螟的防治手段形式多樣，主要包括物理防治[5-7]、化學(xué)防治[3，8]、生物防治[9]及飼養(yǎng)管理防治[8]。物理防治因成本過高在我國尚難以大范圍推廣，生物防治則因技術(shù)要求高、效果緩慢且不穩(wěn)定在應(yīng)用中也很受局限，化學(xué)藥劑的長期大量使用使得害蟲種群抗藥性和藥劑殘留問題日益突出。因此，篩選高效、低毒、符合國家用藥標(biāo)準(zhǔn)的綠色防控技術(shù)十分重要，而關(guān)于大蠟螟綠色防控方面的研究報道較少，僅集中在尋找有效的生物源農(nóng)藥方面。如Zaitoun測定了21種植物提取液對大蠟螟發(fā)育的影響并評價其對工蜂的毒性，結(jié)果表明，其中4種植物提取液對大蠟螟幼蟲有毒殺作用，致死率為95%～100%，且對工蜂無影響[10]；另外，F(xiàn)eldlaufer等研究了甾醇代謝抑制劑ILP-12（N，N-二甲基十二胺）對大蠟螟的控制能力，結(jié)果顯示，巢脾在2.5mg/g的藥物濃度下，幼蟲的發(fā)育完全受到抑制，大蠟螟對蜂巢沒有造成損壞[11]?？祵捵鳛橐环N新型、高效、低毒、低殘留、廣譜型殺蟲劑，近幾年已被廣泛用于農(nóng)業(yè)害蟲的防控，特別對鱗翅目害蟲的毒力活性高、持效期長、安全間隔期短[12，13]，且對天敵友好，對哺乳動物、魚類和鳥類的毒性極低，對農(nóng)產(chǎn)品無殘留影響[14，15]。目前，國內(nèi)有關(guān)康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的毒力尚未見報道。

因此，為探索安全、有效防控大蠟螟的新途徑，本研究選擇康寬（20%氯蟲苯甲酰胺）作為供試藥劑，測定其對大蠟螟不同齡期幼蟲的毒力，以期為大蠟螟的田間防治和藥劑的合理使用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試蟲源

供試蟲源為貴州省生物研究所害蟲生物防控實驗室人工飼養(yǎng)的大蠟螟種群。采用人工飼料在智能人工氣候箱飼養(yǎng)，飼養(yǎng)條件如下：溫度（35±0.5）℃、相對濕度（60±10）%、全黑條件。分別挑選大小一致、健康的1齡、4齡、6齡初期幼蟲備用。

1.2 供試藥劑

康寬（有效成分：氯蟲苯甲酰胺），200g/L，懸浮劑，美國杜邦公司生產(chǎn)。根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果，將供試藥劑配成如下濃度：1齡幼蟲：用自來水按等比法配制成12.00、4.00、1.33、0.44、0.15mg/L共5個濃度；4齡幼蟲：用自來水按等比法配制成33.33、11.11、3.70、1.23、0.41mg/L共5個濃度；6齡幼蟲：用自來水按等比法配制成6個濃度（200.00、100.00、50.00、25.00、12.50、6.25mg/L）。

1.3 試驗方法

采用胃毒法測定康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的室內(nèi)毒力。用電子天平稱取若干等量大蠟螟人工飼料，置于鼓風(fēng)干燥箱中烘干水分，備用。用移液槍吸取等量不同濃度藥液滴在人工飼料上，移入培養(yǎng)皿中央，然后引入20頭大小一致、活力強的大蠟螟1齡幼蟲，試蟲處理后置于溫度（35±0.5）℃、相對濕度（60±10）%、全黑暗環(huán)境的人工氣候箱內(nèi)培養(yǎng)，藥后72 h檢查各處理幼蟲的死亡情況，用細(xì)毛筆將幼蟲輕輕翻轉(zhuǎn)，腹部向上，以幼蟲不能自主活動視為死亡標(biāo)準(zhǔn)，同時挑出死蟲，統(tǒng)計死亡數(shù)。試驗設(shè)3次重復(fù)，以自來水作為對照。以同樣的方法處理4齡幼蟲和6齡幼蟲。

1.4 數(shù)據(jù)分析

1.4.1 計算方法

根據(jù)試驗調(diào)查原始數(shù)據(jù)，計算各處理的死亡率和校正死亡率。

M1（%）=K /N×100

式中：M1為死亡率，K為死亡蟲數(shù)，N為處理總蟲數(shù)。

M2（%）=（Mt- M0）/（1-M0）×100

式中：M2為校正死亡率，Mt為處理死亡率，M0為空白對照死亡率。

1.4.2 統(tǒng)計分析

采用Excel 2007軟件計算死亡率及校正死亡率，利用SPSS 21.0軟件進(jìn)行相關(guān)分析和回歸分析，得出相關(guān)系數(shù)、毒力回歸方程、致死中濃度（LC50）及95%置信區(qū)間。所有描述性統(tǒng)計值均用平均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)誤（Mean±SE）表示。相對毒力倍數(shù)=6齡幼蟲LC50/其他齡期幼蟲LC50，以6齡幼蟲的相對毒力指數(shù)為1。

2 結(jié)果與分析

2.1 康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的殺蟲活性

康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的殺蟲活性測定結(jié)果見表1。結(jié)果表明，康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲均具有毒殺活性，且隨著供試藥劑濃度增大，大蠟螟幼蟲死亡率逐漸上升，呈明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系。隨藥劑濃度降低，1齡幼蟲的校正死亡率分別為91.23%、51.67%、30.97%、15.44%、5.17%，4齡幼蟲的校正死亡率分別為93.25%、62.81%、33.95%、18.60%、5.09%，6齡幼蟲的校正死亡率分別為91.67%、73.33%、60.00%、40.00%、20.00%、5.00%。其中，康寬對大蠟螟1齡幼蟲的致死作用最強，要使大蠟螟幼蟲的死亡率達(dá)到90%以上，1齡幼蟲所需藥劑濃度僅約為12mg/L，4齡幼蟲所需藥劑濃度約為33.33mg/L，6齡幼蟲所需藥劑高達(dá)200mg/L左右，約為1齡幼蟲的17倍，4齡幼蟲的6倍?？梢姡?齡幼蟲對藥劑最敏感，4齡、6齡幼蟲敏感性逐漸下降。

表1 康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的殺蟲活性

表2 康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的毒力測定

2.2 康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的毒力測定

康寬對大蠟螟1齡、4齡、6齡幼蟲的毒力回歸方程、相關(guān)系數(shù)及致死中濃度LC50值見表2。結(jié)果表明，胃毒處理72h后，康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的毒力隨著蟲齡的增加而逐漸降低，大小順序為：1齡幼蟲＞4齡幼蟲＞6齡幼蟲。其LC50值分別為2.430mg/L（1.204～5.534mg/L）、5.661mg/L（4.337～7.434mg/L）和40.071mg/L（33.031～48.620mg/L）。以康寬對6齡幼蟲的毒力為1，對4齡幼蟲的相對毒力倍數(shù)為7.078，對1齡幼蟲的相對毒力倍數(shù)為16.490。

3 結(jié)論與討論

有研究表明，害蟲幼蟲隨蟲齡增大，體重增加，體內(nèi)的一些水解酶、解毒酶活性也隨之增強，從而使其耐藥能力提高，因此對藥劑的敏感性下降[16，17]。本研究中，康寬（20%氯蟲苯甲酰胺）對大蠟螟的殺蟲活性隨著幼蟲齡期的增大而降低，用藥72h后，康寬對大蠟螟不同齡期幼蟲的毒力大小順序依次為：1齡幼蟲＞4齡幼蟲＞6齡幼蟲。其原因可能與大蠟螟幼蟲蟲齡增加，耐藥能力增強有關(guān)。本試驗所用藥劑康寬具有速效性，同時具有低成本、低毒、低殘留、無公害等生物農(nóng)藥的特點，綜合成本和藥效，康寬值得推薦用于防控大蠟螟。另外，大蠟螟初孵幼蟲有上脾的習(xí)性，1～2齡幼蟲經(jīng)框耳爬上框梁，然后蛀入巢脾，上脾率達(dá)90%以上，初孵幼蟲上脾引起的工蜂咬脾清巢防衛(wèi)反應(yīng)，可為掉落箱底的幼蟲及其后期發(fā)育取得食料，且1～2齡幼蟲體小、爬行速度快、靈活，不易被工蜂發(fā)現(xiàn)，3齡以上幼蟲體大，易被工蜂發(fā)現(xiàn)驅(qū)趕，能上脾為害的較少[1，18]。因此，綜合本研究結(jié)果及大蠟螟的危害特點，建議生產(chǎn)中選擇對殺蟲劑敏感性較強的低齡幼蟲期為最佳防治時期。

本研究中，康寬對大蠟螟1齡、4齡、6齡幼蟲的致死中濃度（LC50）分別為2.430mg/L、5.661mg/L和40.071mg/L。這一結(jié)果與康寬對其他鱗翅目昆蟲的毒力存在一定的差異，如康寬對大螟Sesamia inferens1齡幼蟲的LC50值為1.133mg/L，對3齡幼蟲的LC50值為44.733mg/L[19]；康寬對草地貪夜蛾Spodoptera frugiperda4齡幼蟲的LC50值僅為1.93mg/L[20]；康寬對豆莢螟EtieLLa zinckeneLLa和二化螟ChiLo suppressaLis3齡幼蟲的LC50值分別為0.490mg/L和8.740mg/L[21，22]，這可能是由于不同害蟲的個體大小、食性、抵抗能力等生物學(xué)特性差異所致。

本試驗雖未涉及田間藥效，但采用的胃毒測定方法比較接近田間殺蟲劑毒殺害蟲的作用方式，可為康寬的田間用量提供參考。另外，在應(yīng)用該藥時，應(yīng)當(dāng)建立長期的監(jiān)測機制，及時監(jiān)測大蠟螟的抗藥性動態(tài)，制定合理的殺蟲劑輪換用藥策略，指導(dǎo)科學(xué)用藥，這將有助于大蠟螟的可持續(xù)防治。