藺麗麗 張瑞雪 劉洪健 楊質楠 袁海延 曹永芬
(吉林省水產(chǎn)技術推廣總站,吉林 長春 130012)
輪蟲具有營養(yǎng)豐富,適口性強、繁殖速度快的特點。此外,輪蟲具有可以通過營養(yǎng)強化彌補其本身營養(yǎng)缺失的特性,因此成為比較受歡迎的開口餌料。國內外對于輪蟲的研究主要集中在營養(yǎng)強化手段、外在環(huán)境因子的影響等方面,對于輪蟲營養(yǎng)強化內部機理的研究較少。
L-肉堿是一種具有生物活性分子量較低的類氨酸,具有提高機體蛋白質利用率、促生長、抗氧化的作用。但是L-肉堿對輪蟲的抗氧化作用的研究目前尚未見報道。因此,本試驗以海水的圓形臂尾輪蟲為研究對象,探討不同濃度的L-肉堿對圓形臂尾輪蟲抗氧化作用的影響,通過測定超氧化物歧化酶(SOD)和總抗氧化能力(T-AOC)活性,探究L-肉堿對輪蟲的抗氧化能力的影響,以期為輪蟲的營養(yǎng)強化機理研究提供參考。
圓形臂尾輪蟲由吉林農(nóng)業(yè)大學水產(chǎn)實驗室提供,L-肉堿購自Sigma公司,超氧化物歧化酶(SOD)、總抗氧化能力(T-AOC)檢測試劑盒購自南京建成生物工程研究所。
以人工配制海水(鹽度為20)為輪蟲培養(yǎng)液,將L-肉堿加入培養(yǎng)液中至其終濃度分別為0、0.1、1、10毫克/升。將輪蟲接入1升培養(yǎng)液(接種密度為200個/毫升)培養(yǎng)。培養(yǎng)條件:自然光照,連續(xù)充氣,溫度(25±1)℃,pH 7.3~7.8,每天投喂兩次酵母溶液。每組3個重復。
每隔24小時隨機取3毫升輪蟲培養(yǎng)液,計數(shù)輪蟲數(shù)量,使用試劑盒測定氧化能力。
統(tǒng)計分析采用SPSS 17.0統(tǒng)計軟件。使用ANOVA分析不同濃度L-肉堿對細胞抗氧化指標的影響,并用Duncan's多重比較檢驗各處理組差異。應用LSD多重比較檢驗比較各處理間的均值,差異顯著性水平(P)值設在0.05,誤差和置信區(qū)間用“平均數(shù)±標準差”表示。
試驗結果見圖1。結果表明:0.1毫克/升的肉堿濃度在前3天對輪蟲的存活影響較小,第4天影響比較大;1毫克/升的肉堿濃度從第2天開始趨于平緩,第4天輪蟲存活數(shù)量最多;10毫克/升的肉堿濃度第3天的存活數(shù)最多,但隨后下降趨勢較大,到第4天少于1毫克/升,添加肉堿的3組輪蟲存活數(shù)量均大于對照組,且1毫克/升的效果最好。
圖1 不同肉堿濃度、時間對輪蟲數(shù)量的影響
試驗結果見表1。在L-肉堿的作用下,輪蟲的抗氧化能力顯著提高(P<0.05),而且隨著肉堿濃度的提高而逐漸增強。超氧化物歧化酶(SOD)的活性一直隨肉堿濃度的升高而增強,而總抗氧化能力(T-AOC)在1毫克/升的活性高于0.1毫克/升和10毫克/升,肉堿組與對照組差異顯著(P<0.05),總抗氧化能力在肉堿濃度為1毫克/升時的活性最好。
表1 不同肉堿濃度對輪蟲抗氧化能力的影響
L-肉堿對輪蟲的種群生長具有一定的促進作用,同時L-肉堿也能夠提高輪蟲的抗氧化能力。