不同分型Hp感染的健康體檢人群胃黏膜功能的差異*

方 東

安徽省合肥市第二人民醫(yī)院 230000

幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，Hp)是國際公認(rèn)的Ⅰ類致癌因子，其感染率具有一定地域差異，據(jù)統(tǒng)計，我國50%～60%的人群Hp陽性，部分區(qū)域甚至超出80%[1]。眾所周知，Hp感染可能導(dǎo)致胃黏膜的慢性炎癥、潰瘍、萎縮甚至癌變，但是人群中大多數(shù)Hp感染者為無任何臨床癥狀的健康人群，僅在體檢中發(fā)現(xiàn)Hp陽性。Hp含有的CagA基因及VacA基因分別編碼細(xì)胞毒素相關(guān)蛋白及空泡毒素，當(dāng)前研究根據(jù)兩種基因表達(dá)情況將Hp菌株進(jìn)行分型，Ⅰ型含有CagA及VacA基因，Ⅱ型不含CagA基因，以及一些中間表達(dá)型，即表達(dá)一種毒力因子(即CagA+VacA-和CagA-VacA+)。CagA和VacA是Hp致病的毒力因子，而單純尿素酶(Ure)陽性的Ⅱ型Hp往往僅具有較弱的致病性[2]。胃黏膜“血清學(xué)活檢”是近年來廣泛推崇的無創(chuàng)化胃黏膜功能評估的方法，主要包括血清胃蛋白酶原Ⅰ(Pepsinogen，PGⅠ)、PGⅡ和PGⅠ/PGⅡ比值(Pepsinogen ratio，PGR)、促胃液素-17(Gastrin-17，G-17)，能夠準(zhǔn)確反映胃黏膜的炎癥和萎縮的范圍、程度，預(yù)判癌變風(fēng)險，具有重要參考意義和良好的可操作性[3]。當(dāng)前，大多數(shù)研究主要集中在Hp感染對胃癌前疾病和癌前病變患者的影響，而對無癥狀健康體檢者的研究相對較少，而通過對健康人群的Hp和胃黏膜狀況分析，更有助于我們對不同分型的Hp感染對胃黏膜功能狀況的分析和了解。在此基礎(chǔ)上，本研究共計納入190例我院門診健康體檢的人群進(jìn)行研究，取得了一定進(jìn)展，現(xiàn)將內(nèi)容匯報如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選取我院2019年3—9月間門診行健康體檢的人群140例作為研究對象，其中男72例，女68例，年齡18～65歲，中位年齡43歲。所有體檢者均行14C呼氣試驗(yàn)檢測Hp陽性，證實(shí)為幽門螺旋桿菌感染。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)近5年內(nèi)無明顯上消化道癥狀；(2)Hp分型和胃黏膜功能檢測結(jié)果齊全。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)近5年內(nèi)經(jīng)內(nèi)鏡明確診斷為萎縮性胃炎、消化性潰瘍、腫瘤等上消化道器質(zhì)性疾病；(2)胃手術(shù)史；(3)近1個月內(nèi)口服抗生素、抑酸劑(PPI或H2R受體拮抗劑)、NSIADS等藥物；(4)有反復(fù)腹脹、納差、早飽、腹痛等上消化道癥狀者。同時，選取50例Hp陰性的健康體檢者設(shè)為對照組，男23例，女27例，年齡21～67歲，中位年齡45歲。兩組患者間性別、年齡因素?zé)o統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2 Hp分型和胃黏膜功能檢測 收集Hp陽性的健康體檢者的血清Hp分型檢測和胃黏膜功能結(jié)果，Hp分型采用西安聯(lián)爾生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)血清Hp分型檢測試劑盒ELISA法檢測，根據(jù)Ure、CagA和VacA抗體定性檢測的結(jié)果，將Hp分為三種類型，Ⅰ型Hp：含有CagA及VacA基因，血清學(xué)抗體CagA+VacA+Ure+；Ⅱ型Hp：不含有CagA及VacA基因，血清學(xué)抗體CagA-VacA-Ure+；中間型Hp分為單純表達(dá)CagA和VacA基因，即血清學(xué)抗體CagA+VacA-Ure+和CagA-VacA+Ure+。

胃黏膜功能檢測：使用BIOHiT生物技術(shù)公司提供試劑盒，日本東芝全自動生化免疫分析儀完成檢測。采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)水平，并計算PGⅠ/PGⅡ(PGR)比值；采用雙抗體夾心法測定促胃液素-17(G-17)水平。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 建立Excel表格記錄數(shù)據(jù)，導(dǎo)入SPSS19.0統(tǒng)計軟件系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，方差齊性Levene檢驗(yàn)，多組間差異行one-way ANOVA方差分析，多個樣本的兩兩組間比較采用SNK-q檢驗(yàn)。檢驗(yàn)統(tǒng)計量α=0.05。P<0.05時差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

Hp分型檢測結(jié)果：Ⅰ型Hp共計48例，Ⅱ型33例，中間型Hp共59例(CagA+VacA-Ure+ 27例，CagA-VacA+Ure+32例)。

四組患者間PGⅠ、PGⅡ、G-17水平存在統(tǒng)計學(xué)差異(F=5.838，P=0.001；F=4.560，P=0.004；F=12.869，P<0.000)，而PGR水平無統(tǒng)計學(xué)差異(F=0.669，P=0.572)。

SNK-q檢驗(yàn)結(jié)果顯示，Ⅰ型Hp和中間型Hp人群PGⅠ、PGⅡ水平低于對照組和Ⅱ型Hp組(P<0.05)，G-17水平高于對照組和Ⅱ型Hp組(P<0.05)，Ⅰ型Hp組人群PGⅠ、PGⅡ和G-17水平與中間組Hp間均無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。對照組和Ⅱ型Hp組間PGⅠ、PGⅡ和G-17水平無差異(P>0.05)。見表1。

表1 不同分型Hp感染人群胃黏膜功能情況

注：*與對照組比較，P<0.05；#與Ⅱ型Hp組對比，P<0.05。

3 討論

幽門螺桿菌(Hp)是定植于胃黏膜的致病菌，具有高度變異特性，已經(jīng)被證實(shí)與多種上消化道疾病密切相關(guān)。關(guān)于Hp致病性的分子生物學(xué)研究指出，Hp攜帶的多種抗原蛋白是決定其毒力強(qiáng)弱的關(guān)鍵因素，其中CagA和VacA基因被認(rèn)為是最重要的毒力因子。CagA基因表達(dá)的蛋白協(xié)助Hp進(jìn)入宿主細(xì)胞內(nèi)，可以改變細(xì)胞形態(tài)、增強(qiáng)細(xì)胞的移動性、降低細(xì)胞之間的黏附能力、促進(jìn)上皮細(xì)胞向間葉細(xì)胞轉(zhuǎn)化，干擾宿主細(xì)胞信號傳導(dǎo)；VacA可引起靶細(xì)胞發(fā)生空泡變性、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞骨架重排，甚至細(xì)胞死亡等形態(tài)學(xué)改變[4-5]。而相反的是，Hp產(chǎn)生的大量Ure蛋白對胃黏膜上皮并不具有嚴(yán)重的危害性，主要參與細(xì)菌的粘附、改變周圍的酸堿環(huán)境。研究指出，根據(jù)Hp攜帶CagA和VacA基因的差異將Hp進(jìn)行分型，不同分型Hp間的致病性強(qiáng)弱具有明顯的差異，在此基礎(chǔ)上有助于指導(dǎo)臨床上科學(xué)合理地根除Hp治療[6]。

通過測定PGⅠ、PGⅡ、PGR、G-17的方法評估胃黏膜炎癥、萎縮程度和范圍以及早期胃癌的篩查具有重要臨床意義，在國內(nèi)外已經(jīng)得到廣泛認(rèn)可并逐步推廣。研究認(rèn)為，Hp感染患者胃黏膜功能檢測結(jié)果與Hp細(xì)菌定植的部位、細(xì)菌毒力以及黏膜的炎癥、是否存在萎縮等因素相關(guān)，不同分型的Hp感染患者胃蛋白酶原和胃泌素水平可能存在一定差異[7]。當(dāng)前國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)在于Hp和PG、G17的檢測在早期胃癌和癌前疾病中的意義，如日本早期胃癌篩查指南推出的ABC法、血清學(xué)活檢方法等，但對于無癥狀健康體檢人群Hp感染情況和胃黏膜功能狀況的研究報道十分少見，而對于這一部分人群的研究能夠剔除疾病本身對檢測結(jié)果的干擾，更有助于了解Hp攜帶的CagA和VacA基因的致病過程和胃黏膜損傷特點(diǎn)。

本研究通過對Ⅰ型、Ⅱ型、中間型以及Hp陰性對照組健康體檢人群的血清學(xué)結(jié)果進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)四組患者間PGⅠ、PGⅡ、G-17水平存在統(tǒng)計學(xué)差異，證實(shí)了不同分型Hp感染患者胃黏膜損傷間可能存在區(qū)別。其中，Ⅰ型Hp感染者PGⅠ、PGⅡ水平均位于四種中最低，而G17水平最高，PG主要由胃體底的主細(xì)胞和部分黏液頸細(xì)胞分泌，PGⅠ、PGⅡ下降反映Ⅰ型Hp在引起胃竇體黏膜炎癥和萎縮的、分泌細(xì)胞功能下降方面的效應(yīng)相對較強(qiáng)，而G17受胃內(nèi)酸度的負(fù)反饋調(diào)節(jié)和胃竇黏膜萎縮兩方面影響，Ⅰ型Hp感染者G17顯著升高也驗(yàn)證胃竇部萎縮、腸化程度增加以及胃酸分泌減少。除此之外，Ⅱ型Hp組和陰性對照組間PGⅠ、PGⅡ、PGR、G-17水平無統(tǒng)計學(xué)差異，提示僅表達(dá)Ure基因而CagA和VacA基因缺失的Ⅱ型Hp對胃黏膜損傷程度相對較小，而這一部分感染者是否需要積極進(jìn)行根除Hp治療可能需要進(jìn)一步商榷。

當(dāng)前，Hp感染被明確定義為傳染性疾病，臨床上對于采用呼氣試驗(yàn)檢測尿素酶陽性的患者多采取積極根除治療的態(tài)度，而這無疑會增加抗生素使用率和Hp耐藥的風(fēng)險，因此，是否能夠通過聯(lián)合檢測Hp分型和呼氣試驗(yàn)來進(jìn)一步圈定需要根除Hp治療的無癥狀感染者具有重要的臨床研究意義，這樣有助于科學(xué)合理地進(jìn)行根除Hp治療，從而降低耐藥性、提高根除Hp治療的獲益—風(fēng)險比。

綜上所述，不同分型的Hp感染對健康人群胃黏膜功能的影響存在一定差異，通過Hp分型檢測有助于評估胃黏膜炎癥、萎縮以及癌變的狀態(tài)和風(fēng)險。本文是在健康體檢人群中的初步探討，后期將繼續(xù)在不同上消化道疾病中進(jìn)行進(jìn)一步研究、報道。