一例半番鴨感染新城疫的診斷

岳 穩(wěn) 傅光華 黃 瑜 福建省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所 福州 350013

新城疫（Newcastle disease）是由新城疫病毒（Newcastle diseasevirus，NDV）引起的一種嚴重的傳染病，新城疫病毒又稱為禽1型副黏病毒（Avian Paramyxovirus type 1，APMV-1），新城疫是禽類重要的烈性傳染病之一[1]。2019年8月初，福建省南平市某養(yǎng)鴨戶飼養(yǎng)的80日齡半番鴨出現(xiàn)部分死亡，根據(jù)臨床癥狀、剖檢病變及實驗室檢查，確定鴨群感染新城疫。現(xiàn)將這起半番鴨感染新城疫的診斷報道如下。

1 發(fā)病情況

2019年8月，福建省農(nóng)業(yè)科學院畜牧獸醫(yī)研究所接診一例來自福建省南平市某養(yǎng)鴨戶的半番鴨病例。該養(yǎng)鴨戶飼養(yǎng)半番鴨700羽，在50日齡時購回，購回后僅免疫禽流感疫苗。鴨群7月下旬開始發(fā)病，病初每天死亡5～7羽，4 d后病死率逐漸升高，最多時1 d死亡30多羽。發(fā)病后全群使用磺胺喹噁啉、氟苯尼考，效果不佳。至送檢時，已死亡200多羽。

2 臨床癥狀

鴨群發(fā)病初期體溫升高，精神萎靡，食欲不振，兩翅下垂，水樣腹瀉，并伴有難聞的惡臭味。隨著病情發(fā)展，病死率逐漸升高。

3 剖檢病變

剖檢病死鴨，可見肝臟腫大，有不同程度出血；肺充血；胰臟出血或散布大量白色壞死點，部分患鴨還出現(xiàn)心肌嚴重出血，心包積液，腸道尤其是十二指腸內(nèi)膜嚴重出血。其余臟器無明顯眼觀病變。

4 實驗室檢查

4.1 臨床樣品處理 無菌采集患鴨肝、脾、胰腺組織，一部分用于細菌分離鑒定，另一部分加入含抗生素（青霉素1 000 U/mL、鏈霉素1 000 ug/mL）的PBS緩沖液進行研磨制備成20%混懸液，-80℃保存?zhèn)溆谩?/p>

4.2 細菌分離及病毒RT-PCR檢測 對采集的病死鴨組織樣品分別取樣劃線接種血瓊脂平板進行細菌分離培養(yǎng)，結(jié)果細菌分離呈陰性。以病毒DNA/RNA抽提試劑盒，按照產(chǎn)品說明書提取樣品中的核酸，分別進行禽流感病毒、鴨坦布蘇病毒、禽1型副黏病毒、鴨瘟病毒和鴨呼腸孤病毒等病原檢測。PCR擴增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠進行電泳。結(jié)果RT-PCR檢測僅有新城疫病毒呈陽性，其余病毒均呈陰性。擴增片段送生物試劑公司進行序列測序，測序結(jié)果表明獲得的擴增片段序列與GenBank數(shù)據(jù)庫中的新城疫序列同源性為97%～99.5%。

圖1 樣品PCR擴增電泳圖

4.3 病毒分離 將制備的組織混懸液離心取上清，經(jīng)尿囊腔接種5枚11日齡鴨胚，每枚接種0.2 mL。之后于37℃恒溫培養(yǎng)，連續(xù)觀察7 d。無菌收集致死鴨胚尿囊液毒，測定其血凝活性和RT-PCR檢測。結(jié)果顯示鴨胚尿囊液毒能凝集雞紅細胞和鴨紅細胞；RT-PCR檢測結(jié)果顯示分離的病毒為新城疫病毒陽性，其余病毒均為陰性。

5 診 斷

根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢病變及實驗室檢查結(jié)果，確診該群半番鴨感染新城疫。

6 討論與分析

1）新城疫是一種急性烈性傳染病，發(fā)病后傳播迅速、危害巨大。該病主要侵害雞、火雞、鴿等陸生禽，發(fā)病迅速，發(fā)病率和病死率極高。水禽是禽1型副黏病毒的貯存宿主，臨床上經(jīng)常表現(xiàn)為健康帶毒而不發(fā)病，20世紀90年代以來，陸續(xù)出現(xiàn)了鴨、鵝等水禽感染該病并出現(xiàn)死亡的報道[2]。但臨床上，雞和火雞等陸生禽與水禽在發(fā)病時表現(xiàn)的臨床癥狀及病理變化存在較大差異。陸生禽發(fā)病后，臨床上呈現(xiàn)共濟失調(diào)或嚴重精神沉郁等神經(jīng)癥狀，剖檢可見以喉頭或氣管環(huán)出血等呼吸道病變以及嚴重的胸肌、大腿肌等臟器出血，尤為特征的是腺胃黏膜水腫、乳頭和乳頭間有出血點等。而鴨、鵝等水禽感染該病后的剖檢病變主要為胰腺表面有針尖狀白色壞死點或（和）出血、腸道黏膜出血，而胸肌、大腿肌肉及腺胃乳頭等處很少有出血病變[3]。因此，對鴨發(fā)生新城疫的臨床診斷時，需要注意陸生禽與水禽發(fā)生新城疫的臨診要點差別，以防誤診、漏診。

2）對鴨發(fā)生新城疫的臨床診斷時，易與鴨發(fā)生禽流感相混淆，應(yīng)通過實驗室檢查確診加以區(qū)別。雛番鴨發(fā)生新城疫的臨床診斷時，易與禽流感、雛番鴨細小病毒病、鴨呼腸孤病毒病相混淆，應(yīng)通過實驗室檢查加以鑒別。

3）該病為高度接觸性傳染病，建立嚴格的飼養(yǎng)管理制度，尤其是生物防控措施是鴨場預防該病傳入的重要手段。保障良好的飼養(yǎng)環(huán)境，控制好飼養(yǎng)密度，保證鴨舍的溫度、濕度和合理通風。盡管世界各國對新城疫采取了嚴格的防控措施,如撲殺、限用中等毒力疫苗、強制性免疫等,但它依舊是危害禽類的主要傳染病并呈現(xiàn)新的流行趨勢[4]。該病大多數(shù)情況下無法治愈，造成嚴重的經(jīng)濟損失。因此，在養(yǎng)殖過程中，要制定嚴格的生物安全措施，提高飼養(yǎng)管理水平，進行綜合防控。