芪苓水煎劑對四氯化碳致小鼠急性肝損傷的顯微結(jié)構(gòu)影響

黃麗娜 龍海市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 福建漳州 363100

肝臟在代謝、物質(zhì)轉(zhuǎn)化與合成、排泄等方面均起著重要的作用，是動(dòng)物體內(nèi)最大的代謝器官[1]。本課題前期研究結(jié)果表明，“芪苓散”超微粉可一定程度上提高河田雞的抗氧化性能、免疫功能，降低血脂水平。馬紹偉等[2]、孫銘君等[3]將中藥芪苓制劑應(yīng)用于仔豬、河田雞養(yǎng)殖生產(chǎn)，通過養(yǎng)殖場觀察以及實(shí)驗(yàn)室研究，表明芪苓制劑在增強(qiáng)動(dòng)物機(jī)體的抗氧化性能、免疫功能、生產(chǎn)性能等方面呈現(xiàn)良好效果。劉英等[4]研究總結(jié)發(fā)現(xiàn)保護(hù)肝臟在預(yù)防和治療動(dòng)物疾病方面是十分必要的。本論文主要研究在肝毒物質(zhì)四氯化碳的影響下，中藥芪苓水煎劑是否對試驗(yàn)小鼠肝臟細(xì)胞形態(tài)學(xué)方面產(chǎn)生保護(hù)作用及保護(hù)的程度，旨在探討中藥芪苓制劑對動(dòng)物的保肝作用機(jī)制，為芪苓制劑在畜禽生產(chǎn)及獸醫(yī)臨床上的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 主要藥劑及儀器 中藥芪苓水煎劑的主要組成：黃芪、白術(shù)、防風(fēng)、黨參、茯苓等。主要試劑與儀器：四氯化碳（CCl4）、10%福爾馬林、蘇木精染液、1%伊紅染液、1%鹽酸酒精等；Leica雙目顯微鏡、DM2000顯微照相系統(tǒng)（Leica公司）、LeicaRM2135顯微切片機(jī)、載玻片及其他玻璃器皿等。

1.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及分組 試驗(yàn)小鼠昆明系若干只，體重18～22 g，按試驗(yàn)設(shè)計(jì)分為3組，每組10只。A組為空白對照組；B組為陽性對照組；C組為芪苓水煎劑組。各組隔離飼養(yǎng)，每日定時(shí)供給日糧和干凈飲水。

1.2 方法

1.2.1 配制0.3%CCl4石蠟油 將300μLCCl4加入100mL石蠟油中，混合均勻。

1.2.2 制備芪苓水煎劑 稱取中藥芪苓方劑300 g，先加水1 800mL，煎煮40min，紗布過濾，再在濾渣中加水1 200 mL，重復(fù)上述煎煮過濾步驟，最后合并兩次濾液并濃縮至120 mL。

1.2.3 參試動(dòng)物的用藥 A組和B組生理鹽水灌胃，C組小鼠芪苓水煎劑灌胃（0.2 mL/20 g），每日1次，共7次。7 d后，B組和C組按0.2mL/20 g灌胃0.3%CCl4石蠟油，1次/3 d，連用3次。在CCl4灌服期間，仍然按芪苓水煎劑原劑量對C組給藥。

1.2.4 病理采樣、光鏡制樣及觀察 在最后一次造模16 h后處死參試小鼠和按病理學(xué)要求采樣。剖檢取每組小鼠肝臟的同一部位置10%福爾馬林固定，再進(jìn)行石蠟包埋切片，HE染色，光鏡下(200×)觀察和拍照。

2 結(jié) 果

空白對照組小鼠的肝細(xì)胞排列致密、均一，形狀規(guī)則，細(xì)胞核較大、圓形（見圖1）。陽性對照組小鼠肝細(xì)胞明顯腫脹、脂肪變性，細(xì)胞核消失，有的固縮而深染，形狀不規(guī)則（見圖2）。芪苓水煎劑組小鼠大多數(shù)肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)保留完整狀態(tài)，小靜脈附近的肝細(xì)胞有一定程度的變性和壞死（見圖3）。

3 討 論

四氯化碳模型組小鼠肝組織顯微結(jié)構(gòu)變化特點(diǎn)是壞死灶區(qū)域明顯大于芪苓水煎劑組，而芪苓水煎劑試驗(yàn)組小鼠肝臟組織雖然有變質(zhì)性變化，但限制在肝小葉周邊較為狹小的區(qū)域，大多數(shù)肝組織結(jié)構(gòu)病變明顯輕于四氯化碳陽性對照組。由此可說明芪苓水煎劑可緩解四氯化碳所致急性肝損傷的病理組織學(xué)變化，顯示出了一定的抗肝損傷作用，這可能是由于芪苓水煎劑通過中藥含有的多種成分協(xié)同作用而表現(xiàn)為多種功效的集合。因此，芪苓水煎劑可能通過影響自由基的形成及抗氧化反應(yīng)，穩(wěn)定肝細(xì)胞膜，從而降低膜的通透性，減少肝細(xì)胞壞死，使肝細(xì)胞變性和壞死等病理變化減輕等可能機(jī)理而保護(hù)肝臟。

圖2 陽性對照組小鼠肝組織

圖3 芪苓水煎劑組小鼠肝組織