復(fù)合型纖維“美纖多”對產(chǎn)蛋雞腸道結(jié)構(gòu)、免疫指數(shù)及生產(chǎn)性能的影響

張世忠 江 斌 陳盛星 劉 倩 張桂云 劉 景＊

（1.福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所 福州 350013；2.中鯊動物保健品（廈門）有限公司廈門 361006；3.福建農(nóng)林大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院 福州 350002）

目前，對纖維性飼料的研究日益活躍，食物纖維在人類和動物營養(yǎng)方面有許多食療和疾病預(yù)防功能，適量的食物纖維對刺激產(chǎn)蛋雞胃腸道能動性和促進(jìn)腸內(nèi)微生物活動有益，被普遍認(rèn)為有保健促進(jìn)作用。不同種類的動物由于其消化系統(tǒng)、生理結(jié)構(gòu)的不同而對纖維的消化利用能力是不同的。在飼糧中適當(dāng)加入復(fù)合型纖維，有助于保持產(chǎn)蛋雞胃腸道的正常結(jié)構(gòu)和功能。腸道健康是制約蛋雞生產(chǎn)性能的主要因素，腸道健康狀態(tài)的改變直接影響營養(yǎng)素的利用。復(fù)合型纖維“美纖多”是植物細(xì)胞壁的主要組成成分，對動物有營養(yǎng)和非營養(yǎng)雙重作用，適宜的飼糧粗纖維水平有助于維持動物胃腸道健康、改善能量利用，以便提高產(chǎn)蛋雞的生長性能。本研究用復(fù)合型纖維“美纖多”添加在產(chǎn)蛋雞育成和產(chǎn)蛋階段的日糧中，能促進(jìn)蛋雞對礦物質(zhì)的利用，并能降低氮及能量的利用，延長消化時間。本研究旨在探討在產(chǎn)蛋雞育成和產(chǎn)蛋階段日糧中添加不同比例的復(fù)合型纖維“美纖多”對蛋雞腸道結(jié)構(gòu)、免疫指標(biāo)及生長性能的影響。

1 材料與方法

1.1 美纖多 美纖多主要由甜菜粕纖維、海藻纖維等多種植物纖維混合而成，其中酸性洗滌木質(zhì)素2.6%、中性洗滌纖維49.2%、酸性洗滌纖維26.2%，由中鯊動物保健品（廈門）有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)動物與基礎(chǔ)日糧 將384羽1日齡海蘭褐蛋雞隨機(jī)分成4個處理組，每個處理組24個重復(fù)，每個重復(fù)4羽雞。4個處理組分為試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2、試驗(yàn)組3、對照組，每組使用的基礎(chǔ)日糧一致，試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2、試驗(yàn)組3中分別添加0.8%、1.0%、1.2%復(fù)合型纖維飼料。按照《標(biāo)準(zhǔn)化海蘭褐蛋雞飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)》進(jìn)行飼養(yǎng)管理。

表1 試驗(yàn)日糧組成及營養(yǎng)水平

1.3 飼養(yǎng)管理 飼養(yǎng)管理全部與大規(guī)模蛋雞場生產(chǎn)群保持一致?；\養(yǎng)，每天喂2次粉料，自由采食和飲水。雞舍為全封閉式，雞籠二列三層式，每籠4羽，固定專人飼養(yǎng)管理。每天記錄產(chǎn)蛋數(shù)、破蛋率、耗料量、死淘數(shù)及雞群健康狀況等，疫苗防疫與消毒措施按常規(guī)方法進(jìn)行。

1.4 主要儀器設(shè)備 生物組織自動脫水機(jī)、生物組織包埋機(jī)（浙江金華科迪儀器設(shè)備有限公司生產(chǎn)）；組織切片機(jī)(德國Leika公司生產(chǎn))；光學(xué)顯微鏡、顯微照相設(shè)備（日本Nikon公司生產(chǎn)）；全自動生化分析儀（深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司）；電子分析天平FA-2204B。

1.5 測定指標(biāo) 腸道絨毛高度、隱窩深度、成熟細(xì)胞數(shù)量、免疫球蛋白A（ImmunoglobulinA，IgA）、免疫球蛋白G（ImmunoglobulinG，IgG）、免疫球蛋白M（Immunoglobulin M，IgM）、采食量、糞便量、產(chǎn)蛋數(shù)。1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計 應(yīng)用Excel、SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析，差異顯著后進(jìn)行LSD多重比較，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，以P＞0.05作為差異不顯著判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示。

2 結(jié) 果

2.1 腸道結(jié)構(gòu)形態(tài) 各組120日齡的蛋雞經(jīng)屠宰后，取十二指腸前端2～3 cm的腸道，經(jīng)固定24 h（4%PA灌注取材后固定6～8 h）以后，流水沖洗24 h，置于70%～80%乙醇中。對于貼壁生長細(xì)胞，胰酶消化，調(diào)整細(xì)胞濃度約1×105/mL，滴加于蓋玻片上（置于6孔板中），培養(yǎng)相應(yīng)時間后，取出細(xì)胞爬片，用PBS洗滌3次。95%乙醇固定20min，PBS洗滌2次，每次1min。蘇木素染液染色2～3min，自來水洗滌。鏡下觀察，若細(xì)胞核染色過深，用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒，自來水洗滌。浸入伊紅染液染色1 min，自來水洗滌。吹干或自然晾干細(xì)胞，爬片后，中性樹膠封片。若細(xì)胞用4%多聚甲醛固定，則染色時間相應(yīng)延長，蘇木素染色12～15 min、伊紅染色5min即可。

小腸是消化道內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)吸收和轉(zhuǎn)運(yùn)的主要部位，吸收是小腸絨毛的主要功能，所以，動物小腸黏膜結(jié)構(gòu)的良好狀態(tài)是養(yǎng)分消化吸收和動物正常生長的生理學(xué)基礎(chǔ)[1]。絨毛高度與隱窩深度反映了腸道的功能狀況，絨毛高度與成熟細(xì)胞數(shù)量呈顯著相關(guān)，只有成熟的絨毛細(xì)胞才具有吸收養(yǎng)分的功能。由圖1可見，試驗(yàn)3組的絨毛高度比對照組、試驗(yàn)組1、試驗(yàn)組2更高，試驗(yàn)組2的絨毛高度比試驗(yàn)組1和對照組更高，試驗(yàn)組1的絨毛高度比對照組高，添加復(fù)合型纖維各組的絨毛高度都高于對照組。各組間十二指腸隱窩深度和成熟細(xì)胞數(shù)量與絨毛高度的結(jié)果一致，添加復(fù)合型纖維的試驗(yàn)組都好于對照組，且隨著添加量的增加效果更明顯。

2.2 免疫指數(shù) 于120日齡、180日齡，每個處理組選5羽體重相近的蛋雞，用肝素鈉管翅下靜脈采血3 mL，立即送往離心室，3 000 r/min離心10 min，將上層清液分離到EP管中，-20℃低溫保存。用全自動生化分析儀測定血清中免疫球蛋白A（Immunoglobulin A，IgA）、免疫球蛋白G（Immunoglobulin G，IgG）、免 疫 球 蛋 白M （Immunoglobulin M，IgM），依據(jù)酶聯(lián)免疫分析試劑盒測定。

圖1 各組雞腸道形態(tài)結(jié)構(gòu)顯微觀察

由表2可以看出，120日齡時，試驗(yàn)組3的IgA含量最高，為623.16μg/mL；試驗(yàn)組2次之，為621.32μg/mL，二者差異不顯著。對照組IgA含量最低，為528.38μg/mL；試驗(yàn)組3與對照組相差94.78μg/mL；試驗(yàn)組2、試驗(yàn)組3與試驗(yàn)組1、對照組差異顯著（P＜0.05）；試驗(yàn)組1與對照組差異顯著（P＜0.05）。試驗(yàn)組3的IgG含量最高，為1761.56μg/mL；對照組最低，為1 692.73μg/mL，二者相差68.83μg/mL，各試驗(yàn)組間差異顯著（P＜0.05）。試驗(yàn)組3的IgM含量最高，為682.30μg/mL；對照組最低，為620.36μg/mL，二者相差61.94μg/mL，各試驗(yàn)組間差異顯著（P＜0.05）。

180日齡時，試驗(yàn)組3的IgA最高，為628.31μg/mL，比120 d時提升了5.15μg/mL；對照組最低，為603.31μg/mL，但與同組120 d時相比提升了20.93μg/mL；試驗(yàn)組1和試驗(yàn)組2的IgA含量較120 d均有所提高，各試驗(yàn)組間差異顯著（P＜0.05）。試驗(yàn)組3的IgG最高，為1 778.75μg/mL，比120 d提高了17.79μg/mL； 對照組最低，為1 716.57μg/mL，比120 d提高了23.84μg/mL；試驗(yàn)組1和試驗(yàn)組2的IgG含量較120 d均有所提高，各試驗(yàn)組間差異顯著（P＜0.05）。試驗(yàn)組3的IgM最高，為675.23μg/mL，比120 d下降了25.47μg/mL；對照組最低，為637.43μg/mL，比120 d提高了17.07μg/mL；試驗(yàn)組1和試驗(yàn)組2的IgM含量較120 d均有所提高，各試驗(yàn)組間差異顯著（P＜0.05）。

可見，試驗(yàn)組3的IgA、IgG、IgM均比其它組高且差異顯著，表明試驗(yàn)組3配方最能夠有效刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫球蛋白，提高機(jī)體免疫力。

2.3 生產(chǎn)性能 對120日齡開產(chǎn)后蛋雞的采食量、糞便量、產(chǎn)蛋率和破畸蛋率進(jìn)行統(tǒng)計，由表3可以看出，試驗(yàn)組3的產(chǎn)蛋率最高，為50.69%；對照組產(chǎn)蛋率最低，僅為41.9%；試驗(yàn)組3的產(chǎn)蛋率與對照組比較，差異顯著（P＜0.05），其它組間差異不顯著（P＞0.05）。各組間平均蛋重在49.51～50.54 g，組間差異不顯著（P＞0.05）。試驗(yàn)組3的破畸蛋率最低，為30.83%；對照組最高，為33.84%；組間差異不顯著（P＞0.05）；對照組糞便量最重，為9.58 kg；試驗(yàn)組3最輕，為8.79 kg；二者間差異顯著（P＜0.05），其它組間差異不顯著（P＞0.05）。

表2 美纖多對蛋雞血清免疫球蛋白含量的影響

3 討 論

時至今日，蛋雞養(yǎng)殖業(yè)采用高能量、高蛋白的日糧已引發(fā)了一系列腸道健康問題，而在實(shí)際生產(chǎn)過程中，對高纖維日糧應(yīng)用的認(rèn)識不足[2]。目前，畜牧業(yè)飼料中添加的粗纖維主要以米糠、麥麩為主，米糠、麥麩中含有類似于大豆中的胰蛋白酶抑制因子（一種可能引起腹瀉的抗?fàn)I養(yǎng)因子）和含有植酸等抗?fàn)I養(yǎng)因子，需經(jīng)過加工處理，以免采食過量影響產(chǎn)蛋雞的生產(chǎn)性能。米糠、麥麩中脂肪酶活性也較高，因此，貯存過長發(fā)霉產(chǎn)生霉菌毒素對產(chǎn)蛋雞腸道健康帶來危害。米糠、麥麩中的T-2毒素會使活雞腹瀉和肝臟等重要臟器壞死，脂肪肝、肝臟有出血班，血斑蛋、破蛋、軟蛋增多；腺胃、肌胃黏液分泌物增多或出現(xiàn)潰瘍，腺胃腫脹，嚴(yán)重的導(dǎo)致突然死亡，影響產(chǎn)蛋量甚至停產(chǎn)[3]。腸道健康是制約蛋雞生產(chǎn)性能的主要因素，腸道健康狀態(tài)的改變直接影響營養(yǎng)素的利用。隨著我國在2020年全面禁止抗生素作為促生長劑在飼料中添加，蛋雞腸道疾病問題將日益突出，因此，復(fù)合型纖維-美纖多的良好應(yīng)用效果應(yīng)給予更多的關(guān)注。

表3 美纖多對蛋雞生產(chǎn)性能的影響