結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)試驗(yàn)在肺結(jié)核診斷中的價(jià)值分析

李曉偉 楊偉 劉曉靜

（長(zhǎng)治市人民醫(yī)院 山西 長(zhǎng)治 046000）

肺結(jié)核是臨床常見(jiàn)的呼吸系統(tǒng)疾病之一，其早期并無(wú)典型癥狀，起病隱匿，影像學(xué)具有多樣表現(xiàn)，病理學(xué)、分子生物確診率均較低，血沉等輔助性檢查，易受其他因素影響，診斷較困難[1]。因此，臨床迫切需要尋找更為有效的檢測(cè)方法。鑒于此，本研究探討結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)試驗(yàn)在肺結(jié)核診斷中的應(yīng)用價(jià)值。報(bào)告如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年9月—2019年1月就診于我院的疑似肺結(jié)核患者96例，其中，男性、女性患者分別為52、44例；年齡為22～84歲，平均年齡為（52.98±5.23）歲；病程為7～9個(gè)月，平均病程為（7.99±0.23）個(gè)月。所有患者均簽署知情同意書(shū)。

1.2 方法

使用羅氏固體培養(yǎng)法培養(yǎng)分支桿菌，取0.1mL處理的痰液并在酸性改良羅氏固體培養(yǎng)基斜面上均勻種植（無(wú)菌操作），孵育（37℃）；接種后1周內(nèi)觀察，若菌落生長(zhǎng)，經(jīng)證實(shí)后則可報(bào)告抗酸分支桿菌生長(zhǎng)，后每周觀察1次，并對(duì)菌落生長(zhǎng)和污染情況進(jìn)行記錄，若8周后仍無(wú)菌落生長(zhǎng)，則報(bào)告陰性結(jié)果。

結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)試驗(yàn)使用試劑盒（Immunotec公司），以斑點(diǎn)形成細(xì)胞計(jì)數(shù)。采集患者2～8ml靜脈血，加入淋巴細(xì)胞分離液，密度梯度離心分離外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMC），單個(gè)核細(xì)胞計(jì)數(shù)，將抗原（CFP-10、ESAT-6）、AIM-V（50μl，無(wú)血清培養(yǎng)基）及PBMC（100μl）依次加入微孔培養(yǎng)板，37℃孵育16～20h，洗滌微孔板，加入酶標(biāo)抗體，孵育1h（2～8℃），洗滌微孔板，加入底物反應(yīng)液（50μl），室溫避光反應(yīng)7min后終止反應(yīng)，干燥2h（室溫），斑點(diǎn)計(jì)數(shù)。當(dāng)陰性對(duì)照孔≧6個(gè)時(shí)，測(cè)試孔斑點(diǎn)數(shù)為陰性對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)的2倍及以上時(shí)；當(dāng)陰性對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)為0～5個(gè)，測(cè)試孔斑點(diǎn)數(shù)－陰性對(duì)照孔斑點(diǎn)數(shù)≧6個(gè)時(shí)；當(dāng)CFP-10及ESAT-6測(cè)試孔中任意一個(gè)達(dá)到以上標(biāo)準(zhǔn)則認(rèn)為是陽(yáng)性。

1.3 觀察指標(biāo)

以羅氏固體培養(yǎng)法檢測(cè)結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，記錄并計(jì)算結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)試驗(yàn)診斷肺結(jié)核的靈敏度、特異度及準(zhǔn)確度。比較結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)試驗(yàn)與羅氏固體培養(yǎng)法檢測(cè)結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2.結(jié)果

2.1 羅氏固體培養(yǎng)法檢測(cè)結(jié)果

96例疑似活動(dòng)性肺結(jié)核患者經(jīng)羅氏固體培養(yǎng)法檢測(cè)，結(jié)果顯示：37例為陽(yáng)性（活動(dòng)性肺結(jié)核），59例為陰性。

2.2 結(jié)核感染T細(xì)胞試驗(yàn)診斷結(jié)果

以羅氏固體培養(yǎng)法檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)核感染T細(xì)胞試驗(yàn)檢測(cè)診斷活動(dòng)性肺結(jié)核的靈敏度為89.19%，特異度為61.02%，準(zhǔn)確度為71.88%；結(jié)核感染T細(xì)胞試驗(yàn)檢測(cè)的結(jié)果與羅氏固體培養(yǎng)法結(jié)果一致性一般（Kappa系數(shù)=0.458，0.4≤K＜0.75）。見(jiàn)表。

表 結(jié)核感染T細(xì)胞試驗(yàn)檢測(cè)及羅氏固體培養(yǎng)法檢測(cè)結(jié)果分析（n）

3.討論

以往臨床診斷結(jié)核主要包括血清學(xué)檢測(cè)、培養(yǎng)、痰涂片鏡檢、結(jié)核菌臨床基因擴(kuò)增法等，然而對(duì)結(jié)核病患者使用這些方法進(jìn)行診斷時(shí)存在諸多缺點(diǎn)，如：操作復(fù)雜、檢測(cè)周期長(zhǎng)、特異度及靈敏度較差等。

結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)試驗(yàn)在臨床工作中具有較高的指導(dǎo)價(jià)值，尤其是缺少細(xì)菌學(xué)診斷依據(jù)的活動(dòng)性結(jié)核患者，可起到補(bǔ)充或輔助診斷的作用。其主要使用酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)技術(shù)，利用CFP-10和ESAT-6作為刺激物，對(duì)結(jié)核菌致敏T淋巴細(xì)胞的結(jié)合感染進(jìn)行檢測(cè)[2]。本研究通過(guò)結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)試驗(yàn)對(duì)肺結(jié)核進(jìn)行診斷，并對(duì)其診斷價(jià)值進(jìn)行分析，結(jié)果顯示，以羅氏固體培養(yǎng)法檢查結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)試驗(yàn)診斷肺結(jié)核的靈敏度為89.19%，特異度為61.02%，準(zhǔn)確度為71.88%，可見(jiàn)，結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)試驗(yàn)可作為一種提高臨床診斷準(zhǔn)確率的輔助診斷方法[3]。但結(jié)核感染T細(xì)胞試驗(yàn)的檢測(cè)診斷結(jié)果與羅氏固體培養(yǎng)法診斷結(jié)果一致性一般，可見(jiàn)該診斷方法準(zhǔn)確度中等，需與臨床資料結(jié)合進(jìn)行綜合性分析。

綜上所述，在診斷肺結(jié)核時(shí)，結(jié)核感染T細(xì)胞檢測(cè)試驗(yàn)具有較高的應(yīng)用價(jià)值。