AECA和炎性細(xì)胞因子在糖尿病腎病中的表達(dá)水平及意義

黃新梅 陳立軍 高紅梅 曹文瓊 哈華蘭 朱學(xué)新 陸敬雁

（蘭州市第一人民醫(yī)院 甘肅 蘭州 730050）

近年來(lái)，隨著老齡社會(huì)的到來(lái)，糖尿病發(fā)生率日益升高。腎病是糖尿病患者常見(jiàn)并發(fā)癥，同時(shí)也是引起終末腎功能衰竭的重要原因，糖尿病腎病是糖尿病患者最重要的合并癥之一，目前已成為終末期腎臟病的第二位原因，僅次于各種腎小球腎炎，由于其存在復(fù)雜的代謝紊亂，一旦發(fā)展到終末期腎臟病，往往比其他腎臟疾病的治療更加棘手，因此及時(shí)防治對(duì)于延緩糖尿病腎病的意義重大。已有臨床學(xué)者通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)[1]：炎癥在糖尿病腎病發(fā)生及發(fā)展中起著重要作用，同時(shí)由于內(nèi)皮細(xì)胞抗體介導(dǎo)的免疫損傷是引起內(nèi)皮功能障礙的重要因素。本文為了進(jìn)一步分析AECA、炎性細(xì)胞因子在糖尿病腎病中的表達(dá)水平及意義，特選取我院收治的108例糖尿病腎病患者作為此次研究對(duì)象，現(xiàn)報(bào)告如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

本次所選108例糖尿病腎病患者來(lái)源于我院自2018年2月—2019年2月收治的，納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合WHO糖尿病腎病診斷標(biāo)準(zhǔn)；簽訂知情同意書(shū)，自愿參與本次研究，獲得醫(yī)學(xué)倫理會(huì)同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：繼發(fā)性高血壓者；合并肝中心肝腎疾病；出血傾向者；凝血障礙者；精神病者。將其作為研究組，研究組：男性患者61例，女性患者47例；年齡34～82歲，平均年齡（54.42±2.45）歲；病程（0.21～40）年，平均病程（21.23±9.34）年。同時(shí)選取我院體檢的健康者108例，男性65例，女性43例；年齡32～84歲，平均年齡（55.23±1.56）歲。兩組性別、年齡等一般資料經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

1.2 方法

入院后清晨空腹抽取5ml靜脈血，按照每分鐘3000轉(zhuǎn)的速度離心15分鐘，分離血清后取血漿測(cè)定。于熒光顯微鏡下觀察AECA結(jié)果，并在1：10的稀釋度下，判定陰性與陽(yáng)性，陰性：看不到特異性熒光；陽(yáng)性：可看到特異性熒光。由北京晶美生物工程有限公司提供檢測(cè)試劑盒，采用雙抗體夾心ELISA法測(cè)定IL-6、TNF-α水平，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作。由美國(guó)GeneMay公司提供檢測(cè)試劑盒，采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定P-選擇素水平。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察及比較研究組與對(duì)照組的AECA陽(yáng)性表達(dá)率、IL-6、TNF-α、P-選擇素水平，同時(shí)比較AECA陰性組與AECA陽(yáng)性組的IL-6、TNF-α、P-選擇素水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

利用SPSS 20.0軟件，計(jì)數(shù)資料和計(jì)量資料分別行卡方和t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 研究組與對(duì)照組的各項(xiàng)指標(biāo)比較

研究組患者的AECA陽(yáng)性表達(dá)率、IL-6、TNF-α、P-選擇素水平均高于對(duì)照組，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，有顯著差異（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 研究組與對(duì)照組的各項(xiàng)指標(biāo)比較（±s,μg/L）

表1 研究組與對(duì)照組的各項(xiàng)指標(biāo)比較（±s,μg/L）

組別nAECA陽(yáng)性表達(dá)（%）IL-6TNF-αP-選擇素研究組10824（22.22）7.45±2.346.56±1.6766.56±23.45對(duì)照組1080（0.00）2.34±1.123.45±1.2542.34±21.23[χ2]t[27.000]20.47015.4947.957 P 0.0000.0000.0000.000

2.2 糖尿病腎病患者中AECA陽(yáng)性組與陰性組的各項(xiàng)指標(biāo)比較

AECA陽(yáng)性組糖尿病腎病患者的IL-6、TNF-α、P-選擇素水平均高于AECA陰性組，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，有顯著差異（P＜0.05），見(jiàn)表2。

表2 研究組AECA陽(yáng)性組與陰性組的各項(xiàng)指標(biāo)比較（±s,μg/L）

表2 研究組AECA陽(yáng)性組與陰性組的各項(xiàng)指標(biāo)比較（±s,μg/L）

組別nIL-6TNF-αP-選擇素AECA陽(yáng)性組229.23±3.238.12±2.3285.23±20.21 AECA陰性組865.45±3.145.67±2.1258.34±21.23 t 5.0104.7455.351 P 0.0000.0000.000

3.討論

糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy）是糖尿病嚴(yán)重并發(fā)癥之一，迄今為止，糖尿病腎病的發(fā)病機(jī)制并不明確，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為與遺傳、腎臟血流動(dòng)力學(xué)異常、高血糖造成代謝異常、血管活性物質(zhì)代謝異常相關(guān)。也有學(xué)者[2]認(rèn)為內(nèi)皮功能障礙是促進(jìn)糖尿病腎病發(fā)生及發(fā)展的重要因素，并成為臨床研究熱點(diǎn)話題。

抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體（AECA）是一種異質(zhì)性抗體，可提高內(nèi)皮細(xì)胞間黏附因子、血管黏附因子水平、內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)E-選擇素，促進(jìn)白細(xì)胞的黏附。同時(shí)，還可通過(guò)刺激內(nèi)皮素的產(chǎn)生，促進(jìn)血栓形成，并參與到炎癥反應(yīng)中，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡。由于糖尿病腎病發(fā)生及發(fā)展中，出現(xiàn)較多的致病因素，從而損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，暴露內(nèi)皮細(xì)胞表面抗原，促進(jìn)AECA產(chǎn)生，最終促進(jìn)免疫復(fù)合物的合成，加重內(nèi)皮細(xì)胞損傷[3]。伴隨著糖尿病腎病病程的不斷發(fā)展，AECA的陽(yáng)性檢出率也隨之而增加。此次數(shù)據(jù)顯示：糖尿病腎病患者的AECA陽(yáng)性率顯著高于對(duì)照組。

IL-6與TNF-α均是由單核-巨噬細(xì)胞分泌，產(chǎn)生于血管內(nèi)皮細(xì)胞及腎臟的多種細(xì)胞，具有多種功能，參與多種生理及免疫過(guò)程中，最終影響胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，參與到細(xì)胞凋亡，有效刺激系膜細(xì)胞產(chǎn)生氧自由基，增多過(guò)氧化脂質(zhì)代謝產(chǎn)物，最終損傷細(xì)胞內(nèi)膜[4]。其中IL-6在腎小球基底膜增厚患者體內(nèi)，明顯升高。而糖尿病腎病患者的主要病理則是腎小球基底增厚。此次數(shù)據(jù)調(diào)查研究顯示：糖尿病腎病患者的IL-6與TNF-α水平均高于對(duì)照組，表明：IL-6與TNF-α可增強(qiáng)炎癥反應(yīng)，刺激胰島素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡等活動(dòng)，最終導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)膜的損傷。

P-選擇素屬于黏附因子，位于血小板的α顆粒及血管內(nèi)皮細(xì)胞的Weibel-palade小體內(nèi)，屬于黏附分子家族成員，其表達(dá)位于所有中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及單核細(xì)胞等表面，在靜止?fàn)顟B(tài)下，血小板及內(nèi)皮細(xì)胞表面沒(méi)有P-選擇素[5]，當(dāng)激活腫瘤壞死因子后，Weibel-palade小體膜迅速與細(xì)胞膜融合，使得P-選擇素在內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)，從而發(fā)生一系列炎癥反應(yīng)。此次數(shù)據(jù)調(diào)查顯示：糖尿病腎病患者的P-選擇素水平高于對(duì)照組。此外，此次數(shù)據(jù)調(diào)查顯示：AECA陽(yáng)性組的炎癥因子水平高于AECA陰性組，表明AECA介導(dǎo)的免疫損傷，可能加重內(nèi)皮細(xì)胞損傷，從而提高炎癥因子水平，加重病情。

綜上所述，AECA陽(yáng)性表達(dá)率、IL-6、TNF-α、P-選擇素水平在糖尿病腎病發(fā)生及發(fā)展中有重要作用。