• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    Fmoc保護(hù)氨基酸-卟啉化合物的設(shè)計(jì)合成與光譜性能研究

    2016-01-05 07:27:57劉曉星甄亞枝邢曉麗陶敏莉
    化學(xué)與生物工程 2015年5期

    劉曉星,甄亞枝,邢曉麗,陶敏莉

    (1.天津大學(xué)理學(xué)院化學(xué)系,天津 300072;2.天津化學(xué)化工協(xié)同創(chuàng)新中心,天津 300072)

    Fmoc保護(hù)氨基酸-卟啉化合物的設(shè)計(jì)合成與光譜性能研究

    劉曉星1,2,甄亞枝1,2,邢曉麗1,2,陶敏莉1,2

    (1.天津大學(xué)理學(xué)院化學(xué)系,天津 300072;2.天津化學(xué)化工協(xié)同創(chuàng)新中心,天津 300072)

    摘要:為了獲得結(jié)構(gòu)和性能更加接近天然卟啉的合成卟啉化合物,采用Fmoc保護(hù)氨基酸(甘氨酸、纈氨酸、L-酪氨酸),將氨基酸引入卟啉體系,設(shè)計(jì)合成了系列新型卟啉-氨基酸化合物,并對其光譜性能進(jìn)行了研究。結(jié)果表明,在合成以酯鍵相連的卟啉-氨基酸化合物時(shí),甘氨酸、纈氨酸反應(yīng)生成含有2個(gè)氨基酸單元的化合物,L-酪氨酸生成含1個(gè)氨基酸單元的化合物。在合成以酰胺鍵相連的化合物時(shí),反應(yīng)得到含有1個(gè)氨基酸單元的化合物。卟啉的光譜性能不因不同F(xiàn)moc保護(hù)氨基酸單元的引入而改變。

    關(guān)鍵詞:Fmoc保護(hù);卟啉-氨基酸化合物;互變異構(gòu);光譜性能

    卟啉化合物是細(xì)胞色素、葉綠素及血紅蛋白等生物大分子的核心部分,在生物體系中有著十分重要的作用。氨基酸是蛋白質(zhì)的基本單元,引入氨基酸側(cè)鏈對卟啉環(huán)進(jìn)行修飾,可使人工合成的卟啉化合物在結(jié)構(gòu)和性能上更加接近天然卟啉,有利于模擬生物過程[1]。

    氨基酸含有1個(gè)堿性氨基和1個(gè)酸性羧基,可形成內(nèi)鹽。氨基活性比羧基高,當(dāng)以羧基為反應(yīng)基團(tuán)時(shí),需要易于脫去的基團(tuán)保護(hù)分子中的氨基。在眾多的氨基保護(hù)方法中, Boc(叔丁氧羰基)保護(hù)法和Fmoc(9-芴甲氧羰基)保護(hù)法最常用且互補(bǔ)。Boc保護(hù)法適用于堿性條件, Fmoc保護(hù)法適用于酸性條件[3-4]。作者采用Fmoc保護(hù)法對氨基酸中的氨基進(jìn)行保護(hù),再用SOCl2活化羧基,將氨基酸(甘氨酸、纈氨酸、L-酪氨酸)引入卟啉體系,設(shè)計(jì)合成了系列新型卟啉-氨基酸衍生物,對其光譜性能進(jìn)行了系統(tǒng)研究,并對其生成機(jī)理進(jìn)行了探討。

    1實(shí)驗(yàn)

    1.1 試劑與儀器

    所用試劑均為分析純。CH2Cl2用CaH2回流干燥;吡咯、SOCl2用前重餾;5-對羥基苯基-10,15,20-三萘基卟啉(TNPPOH)、5-對氨基苯基-10,15,20-三苯基卟啉(ATPP)的合成參照文獻(xiàn)[5-6]。

    VG ZAB-HS與Finnigan LCQ型質(zhì)譜儀;Bruker 400 MHz型核磁共振儀;Varian CARY ECLIPSE型熒光分光光度計(jì);Thermo Spectronic,Helios Gamma型紫外可見光譜儀; LP920型激光閃光光解光譜儀。

    1.2 方法

    1.2.1Fmoc保護(hù)氨基酸的合成(圖1)

    1)1a的合成

    向單口燒瓶中加入甘氨酸0.3 g(3.9 mmol)、K2CO3水溶液8.3 mL(10%質(zhì)量分?jǐn)?shù)),冰浴冷卻至5 ℃以下。將芴甲氧羰酰琥珀酰亞胺1.1 g(Fmoc-OSu,3.3 mmol)溶于7.5 mL 1,4-二氧六環(huán)中,快速倒入反應(yīng)液中,室溫?cái)嚢?0 min。加100 mL水稀釋,用乙醚萃取除去油溶性雜質(zhì)。在控制水相溫度不超過5 ℃的條件下,用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2, 乙酸乙酯萃取,有機(jī)相用30 mL水洗滌2次,再用30 mL 飽和食鹽水溶液洗滌1次,干燥,過濾,減壓蒸餾得1a 1.02 g,收率88.0%。熔點(diǎn)177~178 ℃(文獻(xiàn)[7]值:174~175 ℃)。

    圖1 Fmoc保護(hù)氨基酸的合成路線Fig.1 Synthetic routes of Fmoc-amino acid

    2)1b的合成

    以纈氨酸為原料,按上述方法合成,無水MgSO4干燥,過濾,蒸除溶劑,用100 mL石油醚和10 mL CH2Cl2重結(jié)晶得1b 0.97 g,收率82.3%。熔點(diǎn)142~143 ℃(文獻(xiàn)[8]值:142~144 ℃)。

    3)1c的合成

    將L-酪氨酸0.9 g(5 mmol)溶于15 mL四氫呋喃和10 mL水中,加入NaOH水溶液5 mL(1 mol·L-1),并在攪拌下加入Fmoc-OSu 1.69 g(5 mmol),反應(yīng)液用NaOH水溶液調(diào)節(jié)pH值至7,繼續(xù)攪拌6 h。向上述溶液中加入固體檸檬酸1.5 g,乙酸乙酯萃取,有機(jī)相用30 mL檸檬酸水溶液(10%質(zhì)量分?jǐn)?shù))洗滌2次,飽和食鹽水溶液洗滌1次,干燥,過濾,蒸除溶劑,用CH2Cl2重結(jié)晶得1c 1.74 g,收率89.4%。熔點(diǎn)126~130 ℃(文獻(xiàn)[9]值:120~124 ℃)。

    1.2.2以酰胺鍵相連的卟啉-氨基酸化合物的合成(圖2)

    稱取1a~1c 0.5 mmol溶于10 mL干燥CH2Cl2中,加入3 mL新蒸SOCl2,在55~60 ℃條件下反應(yīng)2 h。反應(yīng)完成后,多次加入干燥CH2Cl2,減壓蒸餾除去殘余的SOCl2。45 ℃真空干燥過夜,得到中間體2a~2c。

    將5-對氨基苯基-10,15,20-三苯基卟啉20 mg(0.03 mmol)溶于5 mL干燥CH2Cl2中,加入三乙胺0.1 mL,冰浴冷卻至5 ℃以下。向反應(yīng)液中緩慢滴入溶于10 mL干燥CH2Cl2的中間體2a~2c,薄層色譜跟蹤反應(yīng)至原料點(diǎn)消失,蒸除溶劑,柱色譜分離提純(CH2Cl2/乙酸乙酯),得藍(lán)紫色固體,3a:27 mg,收率93.7%;3b:28 mg,收率92.7%;3c:26 mg,收率80.7%。

    圖2 以酰胺鍵相連的卟啉-氨基酸化合物的合成路線Fig.2 Synthetic routes of the porphyrin-amino acid adducts connected by amide bond

    1.2.3以酯鍵相連的卟啉-氨基酸化合物的合成(圖3)

    將5-對羥基苯基-10,15,20-三萘基卟啉20 mg(0.025 mmol)溶于5 mL干燥CH2Cl2中,加入三乙胺0.1 mL,冰浴冷卻至5 ℃以下。向反應(yīng)液中緩慢滴加溶于10 mL干燥CH2Cl2的中間體2a~2c,冰浴反應(yīng)30 min后,室溫反應(yīng)24 h,蒸除溶劑,柱色譜分離提純(CH2Cl2/乙酸乙酯),得藍(lán)紫色固體,4a:5 mg,收率17.4%;4b:6 mg,收率19.4%;4c:12 mg,收率40.1%。

    2結(jié)果與討論

    2.1 卟啉-氨基酸化合物的合成

    當(dāng)羥基卟啉與Fmoc保護(hù)甘氨酸和纈氨酸縮合時(shí),得到了含有2個(gè)氨基酸單元的化合物f(4a,4b),而并未得到預(yù)期產(chǎn)物d??赡艿姆磻?yīng)過程如圖4所示。

    圖3以酯鍵相連的卟啉-氨基酸化合物的合成路線

    Fig.3Synthetic routes of the porphyrin-amino acid adducts connected by ester bond

    圖4 2個(gè)氨基酸單元化合物的可能的生成過程Fig.4 The process that may generate two amino acid units adducts

    在生成含有1個(gè)氨基酸單元的化合物d后,羰基氧與氨基氫發(fā)生氫鍵作用,形成五元環(huán)過渡態(tài)e,氨基的親核性增強(qiáng),與反應(yīng)液中過量的酰氯繼續(xù)反應(yīng),最終生成含有2個(gè)氨基酸單元的化合物f。f中*標(biāo)記的羰基氧與*標(biāo)記的氨基氫作用,無法活化**標(biāo)記的氨基,不再繼續(xù)反應(yīng)。為了驗(yàn)證上述推論,將含有2個(gè)氨基酸單元的化合物4a與過量的2b在常溫下反應(yīng)48 h,結(jié)果發(fā)現(xiàn)并未生成含有3個(gè)氨基酸單元的目標(biāo)產(chǎn)物。

    另外,含有2個(gè)氨基酸單元側(cè)鏈化合物的生成,是進(jìn)攻五元環(huán)背面的氮原子,空間位阻過大的取代基不再繼續(xù)發(fā)生反應(yīng)。L-酪氨酸具有較大的空間位阻,使反應(yīng)停留在1個(gè)氨基酸單元階段,生成化合物4c。

    當(dāng)Fmoc保護(hù)氨基酸與氨基卟啉縮合時(shí),首先生成含有1個(gè)氨基酸單元的酰胺結(jié)構(gòu),因存在酰胺與烯醇胺的互變異構(gòu)(圖5),無法形成五元環(huán)過渡態(tài),羰基氧不再對氨基進(jìn)行活化,因此不再進(jìn)一步發(fā)生反應(yīng)。

    圖5 酰胺鍵的異構(gòu)化Fig.5 Tautomerism of amide bond

    2.2 化合物穩(wěn)態(tài)光譜性能研究

    2.2.1紫外可見吸收光譜

    卟啉-氨基酸化合物的紫外可見吸收光譜數(shù)據(jù)如表1所示(溶劑為CH2Cl2,濃度為5×10-6mol·L-1)。

    表1 卟啉-氨基酸化合物的紫外可見吸收光譜數(shù)據(jù)/nmTab.1 UV-Vis Absorption spectral data of porphyrin-amino acid adducts/nm

    由表1可知,所有Fmoc保護(hù)氨基酸-卟啉化合物均具有自由堿卟啉的特征吸收光譜?;衔?a~3c、4a~4c的吸收峰位置相近,這表明卟啉的光譜性能不因不同F(xiàn)moc保護(hù)氨基酸的引入而改變。

    2.2.2熒光光譜

    以酰胺鍵相連得到的卟啉-氨基酸化合物的熒光光譜如圖6所示(溶劑為CH2Cl2,濃度為5×10-6mol·L-1)。

    由圖6可知,與紫外可見吸收光譜相對應(yīng),化合物3b、3c發(fā)射峰的位置、強(qiáng)度也幾乎一致,發(fā)射波長較母體卟啉發(fā)生藍(lán)移,這表明化合物3b、3c的激發(fā)態(tài)與基態(tài)之間的能級(jí)差增大。

    圖6 以酰胺鍵相連的卟啉-氨基酸化合物的熒光發(fā)射光譜Fig.6 Fluorescence emission spectra of porphyrin-amino acid adducts connected by amide bond

    以酯鍵相連的卟啉-氨基酸化合物的熒光光譜及在590 nm激發(fā)下的發(fā)射光譜數(shù)據(jù)如表2所示(溶劑為CH2Cl2,濃度為5×10-6mol·L-1)。

    表2 以酯鍵相連的卟啉-氨基酸化合物的熒光光譜數(shù)據(jù)/nmTab.2 Foluorescence spectral data of porphyrin-amino acid adducts connected by ester bond/nm

    由表2可知,以最大吸收波長的光為激發(fā)光時(shí),化合物的發(fā)射波長較相應(yīng)的母體卟啉發(fā)生不同程度藍(lán)移;在590 nm下激發(fā),化合物的發(fā)射光譜與最大吸收波長激發(fā)下的發(fā)射光譜一致。這是由于分子吸收不同能量的光量子后,無論被激發(fā)到哪一個(gè)激發(fā)態(tài)上,都會(huì)很快通過內(nèi)部轉(zhuǎn)換和振動(dòng)弛豫回到第一激發(fā)態(tài)的最低振動(dòng)能級(jí)上,并且這些非輻射去活化過程的速度遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于由較高激發(fā)態(tài)直接發(fā)射光子回到基態(tài)的速度,因此電子最終都從第一激發(fā)態(tài)最低振動(dòng)能級(jí)輻射躍遷回到基態(tài)的各振動(dòng)能級(jí)上,所以不同激發(fā)波長下的發(fā)射光譜是相同的。

    2.3 化合物瞬態(tài)光譜性能研究

    圖7為Fmoc保護(hù)氨基酸-卟啉化合物3a的瞬態(tài)吸收光譜,該化合物在540 nm、570 nm、615 nm、675 nm、780 nm處出現(xiàn)吸收峰。與母體卟啉的瞬態(tài)吸收光譜一致,歸屬為卟啉三重態(tài)特征吸收,卟啉陽離子自由基P+的特征吸收沒有出現(xiàn),說明體系中沒有發(fā)生分子內(nèi)的電子傳遞,F(xiàn)moc保護(hù)氨基酸的引入對卟啉化合物的光學(xué)性能沒有明顯的影響。由于氧氣對激發(fā)三重態(tài)有很強(qiáng)的猝滅作用,因此三重態(tài)壽命會(huì)因空氣的通入而明顯縮短,如圖8所示。

    圖7 化合物3a的瞬態(tài)吸收光譜Fig.7 Transient absorption spectrum of compound 3a

    圖8 化合物3a在570 nm處的動(dòng)力學(xué)衰減曲線Fig.8 Kinetic decay curves of compound 3a at 570 nm

    2.4 結(jié)構(gòu)表征

    3a:1HNMR (CDCl3),δ:-2.78(s,2H),4.16(s,2H),4.26~4.28(m,1H),4.53~4.55(d,J=5.2 Hz,2H),5.79(s,1H),7.24~7.30(m,2H),7.31~7.38(m,2H),7.62~7.70(m,2H),7.71~7.77(m,11H),7.87~7.89(d,J=6.4 Hz,2H),8.15~8.22(m,8H),8.59(s,1H),8.84(s,8H);ESI-MS(m/z):909.5(M++1),731.4,687.5。

    3b:1HNMR (CDCl3),δ:-2.77(s,2H),1.12(m,6H),2.20(s,1H),4.28~4.32(m,1H),4.47(s,1H),4.57~4.59(d,J=6.4 Hz,2H),5.47(s,1H),7.26~7.36(m,2H),7.39~7.43(m,2H),7.61~7.67(m,2H),7.71~7.79(m,11H),7.92~7.99(m,2H),8.17~8.23(m,8H),8.47(s,1H),8.86(s,8H);ESI-MS(m/z):951.5(M++1),773.3,729.5。

    3c:1HNMR (CDCl3),δ:-2.78(s,2H),3.21(s,2H),4.23~4.27(t,1H),4.51~4.53(m,2H),4.64(s,1H),5.61(s,1H),6.81~6.83(d,J=7.6 Hz,2H),7.19(s,2H),7.26~7.33(m,2H),7.38~7.41(m,2H),7.57~7.61(m,2H),7.71~7.77(m,13H),8.13~8.23(m,8H),8.58(s,1H),8.85(s,8H);ESI-MS(m/z):1 015.4(M++1),849.3,837.2,793.3。

    4a:1HNMR (CDCl3),δ:-2.38(s,2H),4.03(s,4H),4.26(s,1H),4.50(s,2H),5.43(s,1H),6.63(s,1H),7.58~7.67(m,13H),7.74~7.87(m,6H),8.12~8.29(m,14H),8.48(s,4H),8.58(s,2H),8.74(s,2H);FAB-MS(m/z):1 117.1(M+)。

    4b:1HNMR(CDCl3),δ:-2.38(s,2H),4.03(s,4H),4.26(s,1H),4.50(s,2H),5.55(m,1H),6.55(m,1H),7.46~7.55(m,13H),7.76~7.88(m,6H),8.09~8.31(m,14H),8.48(s,4H),8.59(s,2H),8.75(s,2H);FAB-MS(m/z):1 201.3(M+)。

    4c:1HNMR (CDCl3),δ:-2.39(s,2H),3.32~3.40(m,2H),4.26~4.44(m,1H),4.47~4.55(m,2H),5.01(s,1H),5.44~5.45(d,J=5.2 Hz,1H),6.83~6.85(d,J=8.0 Hz,2H),7.11(s,2H),7.33~7.57(m,11H),7.62~7.68(m,2H),7.77~7.87(m,6H),8.09~8.29(m,14H),8.47(s,4H),8.59(s,2H),8.75(s,2H),10.00(s,1H);ESI-MS(m/z):1 166.4(M+),988.4,944.2,781.3。

    3結(jié)論

    采用Fmoc保護(hù)氨基酸,SOCl2活化氨基酸中羧基,向卟啉體系中引入氨基酸側(cè)鏈,合成了6個(gè)未見文獻(xiàn)報(bào)道的新型卟啉-氨基酸化合物,并對其光譜性能進(jìn)行了研究。在合成以酯鍵相連的卟啉-氨基酸化合物時(shí),氨基酸中的氨基受鄰近羰基的活化,進(jìn)一步反應(yīng)生成含有2個(gè)氨基酸單元的化合物,因L-酪氨酸具有較大的空間位阻,反應(yīng)生成含1個(gè)氨基酸單元的化合物。在合成以酰胺鍵相連的化合物時(shí),由于存在酰胺與烯醇胺的互變異構(gòu),無法形成五元環(huán)過渡態(tài),羰基氧原子不再對氨基進(jìn)行活化,因此不發(fā)生進(jìn)一步反應(yīng),得到含1個(gè)氨基酸單元的化合物。卟啉-氨基酸化合物的光譜性能不因不同F(xiàn)moc保護(hù)氨基酸的引入而改變,這為設(shè)計(jì)合成含有氨基酸基團(tuán)的卟啉衍生物奠定了基礎(chǔ)。

    參考文獻(xiàn):

    [1]金曉敏,吳健.氨基酸卟啉衍生物的合成[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版),2003,30(2):183-187.

    [2]MAGNUSON A,BERGLUND H,KORALL P,et al.Mimicking electron transfer reactions in photosystem Ⅱ:Synthesis and photochemical characterization of a ruthenium(Ⅱ) tris(bipyridyl) complex with a covalently linked tyrosine[J].Journal of American Chemical Society,1997,119(44):10720-10725.

    [3]ADAMSON J G,BLASKOVICH M A,GROENEVALT H,et al.Simple and convenient synthesis of tert-buty ethers of Fmoc-serine,Fmoc-threonine and Fmoc-tyrosine[J].Journal of Organic Chemistry,1991,56(10):3447-3449.

    [4]CARPINO L A,HAN G Y.The 9-fluorenylmethoxycarbonyl amino-protecting group[J].Journal of Organic Chemistry,1972,37(22):3404-3409.

    [5]KRUPER W J,CHAMBERLIN T A,KOCHANNY M.Regiospecific aryl nitration ofmeso-substituted tetraarylporphyrins:A simple route to bifunctional porphyrins[J].Journal of Organic Chemistry,1989,54(11):2753-2756.

    [6]TAO M L,ZHOU X Q,JING M,et al.Fluorescence and electrochemical properties of naphthylporphyrins and porphyrin-anthraquinone dyads[J].Dyes and Pigments,2007,75(2):408-412.

    [7]NOWSHUDDI S,RAO M N A,REDDY A R.Efficient procedure for the preparation of oligomer-free N-Fmoc amino acids[J].Synthetic Communications,2009,39(11):2022-2031.

    [8]HENKLEIN P,HEYNE H U,HALATSCH W R,et al.5-Norbornene-2,3-dicarboximido carbonochloridate.A new stable reagent for the introduction of amino-protecting groups[J].Synthesis,1987,(2):166-167.

    [9]JENSEN K J,MELDAL M,BOCK K.Glycosylation of phenols:Preparation of 1,2-cisand 1,2-transglycosylated tyrosine derivatives to be used in solid-phase glycopeptide synthesis[J].Journal of the Chemical Society,Perkin Transactions 1,1993,(17):2119-2129.

    Synthesis and Spectral Property Study of Fmoc-Protected Porphyrin-Amino Acid Adducts

    LIU Xiao-xing1,2,ZHEN Ya-zhi1,2,XING Xiao-li1,2,TAO Min-li1,2

    (1.DepartmentofChemistry,SchoolofSciences,TianjinUniversity,Tianjin300072,China;

    2.CollaborativeInnovationCenterofChemicalScienceandEngineering(Tianjin),

    Tianjin300072,China)

    Abstract:To obtain the porphyrins similar to the natural ones in structure and properties,novel porphyrin-amino acid adduct protected by Fmoc were synthesized and their spectral properties were investigated.Results showed that,two amino acid units porphyrin adducts(with glycine,valine) and one amino acid unit prophyrine adduct(with L-tyrosin) were obtained when Fmoc-amino acid reacted with hydroxy porphyrins by ester bond.Porphyrin adducts containing one amino acid unit were formed when Fmoc-amino acid was condensed with aminoporphyrins by amide bond.The introduction of different Fmoc-amino acids had litttle influence on spectral properties of porphyrins.

    Keywords:Fmoc-protected;porphyrin-amino acid adduct;tautomerism;spectral property

    中圖分類號(hào):O 626.13

    文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A

    文章編號(hào):1672-5425(2015)05-0020-06

    doi:10.3969/j.issn.1672-5425.2015.05.005

    作者簡介:劉曉星(1990-),女,河北衡水人,碩士研究生,研究方向:卟啉衍生物的合成與研究,E-mail:lxx@tju.edu.cn;通訊作者:陶敏莉,副研究員,E-mail:mltao@tju.edu.cn。

    收稿日期:2015-02-06

    基金項(xiàng)目:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(21306133),天津市應(yīng)用基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計(jì)劃項(xiàng)目(14JCYBJC22600)

    在线观看免费视频网站a站| 免费观看a级毛片全部| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 99精品在免费线老司机午夜| 水蜜桃什么品种好| 国产野战对白在线观看| 美女高潮到喷水免费观看| a级毛片在线看网站| 日本一区二区免费在线视频| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 久久精品国产综合久久久| 日本黄色视频三级网站网址 | 午夜福利欧美成人| 叶爱在线成人免费视频播放| 中文字幕人妻熟女乱码| 搡老乐熟女国产| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 久久久久久免费高清国产稀缺| 2018国产大陆天天弄谢| 精品卡一卡二卡四卡免费| 亚洲男人天堂网一区| 一个人免费在线观看的高清视频| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 精品少妇久久久久久888优播| 黄色视频在线播放观看不卡| 99re在线观看精品视频| 高清黄色对白视频在线免费看| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 国产aⅴ精品一区二区三区波| 欧美性长视频在线观看| 国产深夜福利视频在线观看| 国产成人精品在线电影| 国产成人av教育| 黄色a级毛片大全视频| 国产精品99久久99久久久不卡| 极品少妇高潮喷水抽搐| 午夜福利在线免费观看网站| 午夜老司机福利片| 亚洲精品国产一区二区精华液| 99九九在线精品视频| 欧美亚洲日本最大视频资源| 一进一出好大好爽视频| av超薄肉色丝袜交足视频| 国产单亲对白刺激| 黑人操中国人逼视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 国产精品二区激情视频| 中国美女看黄片| 91麻豆av在线| 欧美国产精品va在线观看不卡| 韩国精品一区二区三区| 国产精品九九99| 一级,二级,三级黄色视频| 婷婷丁香在线五月| 亚洲一区中文字幕在线| 久久狼人影院| 久久亚洲真实| 中文字幕色久视频| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 十八禁高潮呻吟视频| 岛国毛片在线播放| 热99re8久久精品国产| 中文字幕最新亚洲高清| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产高清激情床上av| 国产精品av久久久久免费| 操出白浆在线播放| 亚洲av成人一区二区三| 三上悠亚av全集在线观看| 高清视频免费观看一区二区| 亚洲人成电影观看| 我的亚洲天堂| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 国产精品九九99| 久9热在线精品视频| 久久午夜综合久久蜜桃| 妹子高潮喷水视频| 日韩三级视频一区二区三区| 黄色片一级片一级黄色片| 久久青草综合色| 精品国产亚洲在线| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 久久精品亚洲av国产电影网| 日本av手机在线免费观看| 日韩中文字幕欧美一区二区| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 这个男人来自地球电影免费观看| av一本久久久久| 欧美日韩精品网址| 1024香蕉在线观看| 久久久久国内视频| 黄片播放在线免费| 亚洲三区欧美一区| 啦啦啦 在线观看视频| 日本av免费视频播放| 国产精品一区二区在线不卡| 亚洲三区欧美一区| 岛国毛片在线播放| 国产麻豆69| 久久 成人 亚洲| 欧美日韩亚洲高清精品| 91成年电影在线观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 美国免费a级毛片| 亚洲 国产 在线| 午夜福利,免费看| 桃红色精品国产亚洲av| av国产精品久久久久影院| 婷婷成人精品国产| 亚洲精品粉嫩美女一区| 中文字幕人妻熟女乱码| 大片免费播放器 马上看| 欧美+亚洲+日韩+国产| 日韩三级视频一区二区三区| 三级毛片av免费| 真人做人爱边吃奶动态| 在线观看人妻少妇| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 老司机福利观看| 热99国产精品久久久久久7| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| av超薄肉色丝袜交足视频| svipshipincom国产片| 亚洲专区国产一区二区| 99re6热这里在线精品视频| 久久久国产成人免费| 久久99热这里只频精品6学生| 久久婷婷成人综合色麻豆| 一二三四社区在线视频社区8| 国产av又大| 高潮久久久久久久久久久不卡| 亚洲中文字幕日韩| 日本黄色日本黄色录像| 操美女的视频在线观看| a级毛片黄视频| 国产主播在线观看一区二区| 十八禁人妻一区二区| 久久人妻av系列| 热re99久久精品国产66热6| 高清视频免费观看一区二区| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 91九色精品人成在线观看| 久久久国产欧美日韩av| 天堂中文最新版在线下载| 欧美成人免费av一区二区三区 | 免费在线观看日本一区| 男人舔女人的私密视频| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 国产91精品成人一区二区三区 | 美女视频免费永久观看网站| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲av美国av| 国产黄频视频在线观看| 国产精品亚洲av一区麻豆| 久久99热这里只频精品6学生| 欧美国产精品va在线观看不卡| 一区二区三区激情视频| 久久久国产欧美日韩av| 成人亚洲精品一区在线观看| 亚洲av国产av综合av卡| 亚洲avbb在线观看| 老司机亚洲免费影院| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 国产在线观看jvid| 十八禁网站免费在线| 男女下面插进去视频免费观看| 成人三级做爰电影| 色老头精品视频在线观看| 国产一区有黄有色的免费视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 久9热在线精品视频| √禁漫天堂资源中文www| 免费日韩欧美在线观看| 国产日韩欧美亚洲二区| 国产欧美亚洲国产| 电影成人av| 午夜久久久在线观看| 搡老熟女国产l中国老女人| 男人舔女人的私密视频| a级片在线免费高清观看视频| 久久久久久久精品吃奶| 中文字幕色久视频| netflix在线观看网站| 日本五十路高清| 叶爱在线成人免费视频播放| 国产成人欧美在线观看 | 成人永久免费在线观看视频 | av片东京热男人的天堂| 色综合婷婷激情| 日本五十路高清| 中文字幕另类日韩欧美亚洲嫩草| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 国产精品免费一区二区三区在线 | 亚洲av欧美aⅴ国产| 国产精品欧美亚洲77777| 亚洲精品成人av观看孕妇| 久久精品国产a三级三级三级| 一个人免费看片子| 亚洲九九香蕉| 91麻豆av在线| 欧美日韩精品网址| a级片在线免费高清观看视频| 久久性视频一级片| 亚洲精品av麻豆狂野| 99久久人妻综合| 国产伦人伦偷精品视频| 人妻久久中文字幕网| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 午夜福利一区二区在线看| 一级,二级,三级黄色视频| 国产精品一区二区在线不卡| 亚洲三区欧美一区| 老汉色av国产亚洲站长工具| 久久性视频一级片| 久久影院123| 久热爱精品视频在线9| 欧美黑人精品巨大| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 桃花免费在线播放| 在线观看舔阴道视频| 亚洲美女黄片视频| 51午夜福利影视在线观看| 亚洲精品乱久久久久久| 久久精品国产综合久久久| 精品人妻1区二区| 大香蕉久久网| 亚洲人成电影免费在线| 一级毛片精品| 飞空精品影院首页| 国产一区二区激情短视频| 国产极品粉嫩免费观看在线| 高潮久久久久久久久久久不卡| 国产一区二区三区视频了| 久久久久精品人妻al黑| 高清毛片免费观看视频网站 | 精品人妻在线不人妻| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 麻豆国产av国片精品| 久久久国产一区二区| 老司机深夜福利视频在线观看| 中文字幕制服av| 国产av一区二区精品久久| a级毛片在线看网站| √禁漫天堂资源中文www| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 日本欧美视频一区| 最近最新中文字幕大全免费视频| 成人三级做爰电影| 国产精品久久久久久精品电影小说| 精品人妻1区二区| 中文字幕人妻丝袜制服| 成年人黄色毛片网站| 亚洲精品国产一区二区精华液| 香蕉久久夜色| 999久久久国产精品视频| 亚洲欧美色中文字幕在线| 国产男女超爽视频在线观看| bbb黄色大片| 一级片'在线观看视频| 脱女人内裤的视频| 精品一区二区三区视频在线观看免费 | 中文字幕色久视频| 又黄又粗又硬又大视频| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 免费观看人在逋| 99久久精品国产亚洲精品| 99久久99久久久精品蜜桃| 99久久人妻综合| 成在线人永久免费视频| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 国产在线观看jvid| 国产精品二区激情视频| 国产精品 国内视频| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 精品久久久精品久久久| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 国产91精品成人一区二区三区 | 曰老女人黄片| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 国产亚洲精品久久久久5区| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 国产在线观看jvid| 精品国产乱码久久久久久男人| 99久久国产精品久久久| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 真人做人爱边吃奶动态| 国产成人欧美| 老汉色av国产亚洲站长工具| 亚洲天堂av无毛| 真人做人爱边吃奶动态| 99久久人妻综合| 香蕉丝袜av| 大码成人一级视频| 色老头精品视频在线观看| 久久久精品免费免费高清| 黄片大片在线免费观看| 黄片播放在线免费| 午夜视频精品福利| 在线天堂中文资源库| 视频区图区小说| 国产成+人综合+亚洲专区| 国产又色又爽无遮挡免费看| 一区二区av电影网| 久久久久久免费高清国产稀缺| 男女免费视频国产| 一区二区三区国产精品乱码| 精品乱码久久久久久99久播| 老司机福利观看| 欧美 日韩 精品 国产| 夜夜爽天天搞| 我要看黄色一级片免费的| 国产午夜精品久久久久久| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 免费不卡黄色视频| 亚洲全国av大片| 免费人妻精品一区二区三区视频| 免费日韩欧美在线观看| 亚洲人成77777在线视频| 午夜免费鲁丝| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 女性生殖器流出的白浆| 午夜免费鲁丝| 午夜福利,免费看| 国产男女内射视频| 天天影视国产精品| 在线av久久热| www.自偷自拍.com| 精品熟女少妇八av免费久了| 激情视频va一区二区三区| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 人妻 亚洲 视频| 夜夜夜夜夜久久久久| 婷婷成人精品国产| 欧美日韩成人在线一区二区| 国产精品99久久99久久久不卡| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 色播在线永久视频| 国产亚洲欧美在线一区二区| 一级毛片女人18水好多| 天堂动漫精品| 天堂8中文在线网| 一区二区日韩欧美中文字幕| 欧美另类亚洲清纯唯美| 丁香欧美五月| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 中文字幕制服av| 国产黄频视频在线观看| 国产亚洲av高清不卡| 在线看a的网站| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 国产一区二区三区综合在线观看| 久久热在线av| 另类亚洲欧美激情| 国产精品免费大片| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 18禁观看日本| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 亚洲精品国产区一区二| 成人手机av| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 1024视频免费在线观看| 97人妻天天添夜夜摸| 男女免费视频国产| www日本在线高清视频| 国产男女超爽视频在线观看| 亚洲午夜理论影院| 色94色欧美一区二区| 免费在线观看日本一区| 欧美日本中文国产一区发布| 精品一区二区三区av网在线观看 | 色综合欧美亚洲国产小说| 91成人精品电影| 免费在线观看黄色视频的| 欧美日韩黄片免| 日韩大码丰满熟妇| 麻豆乱淫一区二区| 这个男人来自地球电影免费观看| 亚洲欧美日韩另类电影网站| 麻豆av在线久日| 老熟妇乱子伦视频在线观看| 夜夜爽天天搞| 一二三四在线观看免费中文在| 纵有疾风起免费观看全集完整版| a级毛片黄视频| 亚洲av日韩在线播放| 一本综合久久免费| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 搡老熟女国产l中国老女人| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 精品少妇久久久久久888优播| 亚洲第一青青草原| 久久热在线av| 精品少妇黑人巨大在线播放| 黑人欧美特级aaaaaa片| www.999成人在线观看| 欧美一级毛片孕妇| 中文字幕制服av| 久久亚洲真实| 亚洲国产欧美网| 少妇精品久久久久久久| 香蕉丝袜av| 久久午夜综合久久蜜桃| 亚洲精品国产区一区二| 日韩大码丰满熟妇| 国产精品久久电影中文字幕 | 黄色 视频免费看| 天天操日日干夜夜撸| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲少妇的诱惑av| 欧美精品一区二区免费开放| 中文字幕高清在线视频| 久久久欧美国产精品| 母亲3免费完整高清在线观看| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 在线 av 中文字幕| 亚洲熟女毛片儿| 午夜视频精品福利| 无遮挡黄片免费观看| 精品人妻熟女毛片av久久网站| kizo精华| 国产av精品麻豆| 中文欧美无线码| 久久午夜综合久久蜜桃| 在线观看66精品国产| 91麻豆精品激情在线观看国产 | 99国产精品免费福利视频| 在线观看免费午夜福利视频| 99久久99久久久精品蜜桃| 啦啦啦免费观看视频1| 久久久久久久精品吃奶| 夫妻午夜视频| 不卡一级毛片| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 黄片大片在线免费观看| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 在线观看舔阴道视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 另类亚洲欧美激情| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 亚洲成人免费av在线播放| 老熟女久久久| 少妇粗大呻吟视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 亚洲avbb在线观看| 女性被躁到高潮视频| 老熟女久久久| 国产成人精品无人区| 人人妻人人澡人人看| 黑人操中国人逼视频| a级毛片黄视频| 久久久久精品人妻al黑| 看免费av毛片| 美女高潮到喷水免费观看| 青青草视频在线视频观看| 亚洲视频免费观看视频| 国产人伦9x9x在线观看| 他把我摸到了高潮在线观看 | 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 黑人欧美特级aaaaaa片| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 一级毛片女人18水好多| 99在线人妻在线中文字幕 | 妹子高潮喷水视频| 青草久久国产| 悠悠久久av| 中文字幕人妻熟女乱码| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 操美女的视频在线观看| 久久人人97超碰香蕉20202| av福利片在线| 91字幕亚洲| 一进一出抽搐动态| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 精品久久久久久电影网| 午夜福利视频在线观看免费| 欧美成人免费av一区二区三区 | 欧美老熟妇乱子伦牲交| 黄色a级毛片大全视频| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 精品国内亚洲2022精品成人 | 久久中文字幕一级| 热99国产精品久久久久久7| 一夜夜www| 欧美激情久久久久久爽电影 | 免费在线观看影片大全网站| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 久久久精品区二区三区| 最黄视频免费看| 女人被躁到高潮嗷嗷叫费观| 精品国产乱码久久久久久小说| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲成a人片在线一区二区| 啦啦啦免费观看视频1| 久久青草综合色| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 成人精品一区二区免费| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 欧美激情久久久久久爽电影 | www.自偷自拍.com| 十分钟在线观看高清视频www| 国产淫语在线视频| 91大片在线观看| 十八禁网站网址无遮挡| 精品高清国产在线一区| 51午夜福利影视在线观看| 9热在线视频观看99| 18在线观看网站| 欧美亚洲日本最大视频资源| 日本wwww免费看| 国产又爽黄色视频| 久久久久精品国产欧美久久久| 精品乱码久久久久久99久播| 久久热在线av| av有码第一页| 热99国产精品久久久久久7| 视频在线观看一区二区三区| 午夜视频精品福利| 国产97色在线日韩免费| 一区福利在线观看| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 大片免费播放器 马上看| 狠狠狠狠99中文字幕| 亚洲五月色婷婷综合| 亚洲熟女精品中文字幕| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产激情久久老熟女| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 制服人妻中文乱码| 亚洲久久久国产精品| 中文字幕高清在线视频| 51午夜福利影视在线观看| 欧美成人午夜精品| 免费在线观看黄色视频的| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 久久久久精品国产欧美久久久| 黄色视频不卡| 亚洲av片天天在线观看| 高清黄色对白视频在线免费看| 女同久久另类99精品国产91| 欧美日韩一级在线毛片| tube8黄色片| av一本久久久久| 久久久水蜜桃国产精品网| 香蕉久久夜色| 日韩人妻精品一区2区三区| 国产视频一区二区在线看| av福利片在线| 国产精品久久久av美女十八| 成人影院久久| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 女性被躁到高潮视频| 久久午夜亚洲精品久久| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 成人三级做爰电影| 亚洲男人天堂网一区| 男男h啪啪无遮挡| 亚洲七黄色美女视频| 妹子高潮喷水视频| 首页视频小说图片口味搜索| 欧美激情 高清一区二区三区| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 丝袜美腿诱惑在线| 亚洲成人免费电影在线观看| 免费在线观看黄色视频的| 妹子高潮喷水视频| 中亚洲国语对白在线视频| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 亚洲第一av免费看| 国产色视频综合| 欧美乱码精品一区二区三区| 中文字幕人妻丝袜一区二区| 在线av久久热| 婷婷成人精品国产| 国产黄色免费在线视频| 老司机深夜福利视频在线观看| 国产男女超爽视频在线观看| 国产成人av激情在线播放| 欧美变态另类bdsm刘玥| 欧美另类亚洲清纯唯美| 精品亚洲成国产av| 日本vs欧美在线观看视频| 老熟妇仑乱视频hdxx| 久久99一区二区三区| 香蕉久久夜色| 99国产综合亚洲精品| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 成年人免费黄色播放视频| 两个人看的免费小视频| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产单亲对白刺激| 丁香欧美五月| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 悠悠久久av| 午夜精品久久久久久毛片777| 久久国产精品男人的天堂亚洲| 久久热在线av| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 日本黄色视频三级网站网址 | 欧美乱码精品一区二区三区| 这个男人来自地球电影免费观看| 日韩欧美国产一区二区入口| 黑人猛操日本美女一级片| 日本精品一区二区三区蜜桃| 热99国产精品久久久久久7| 69精品国产乱码久久久| 精品视频人人做人人爽| 亚洲 欧美一区二区三区| 亚洲七黄色美女视频| 久久久久久人人人人人| svipshipincom国产片|