紫外可見分光光度法測定小米中硒含量的干擾因素分析與研究

孫 燕

(四川省食品藥品檢驗(yàn)檢測院,四川成都,610000)

1 引言

中國是水稻生產(chǎn)和消費(fèi)大國，種植面積占世界第二，稻谷總產(chǎn)量占世界第一。近年來，隨著人民生活水平的提高，人們更加重視小米的營養(yǎng)價(jià)值和質(zhì)量。小米中含有豐富的維生素、淀粉、蛋白質(zhì)、脂肪、氨基酸、黃酮和多種礦物質(zhì)元素，具有較高的營養(yǎng)價(jià)值[1-2]。小米中硒的含量、形態(tài)和人體硒的營養(yǎng)狀況緊密相聯(lián)，小米中的硒形態(tài)以無機(jī)硒和有機(jī)硒兩個(gè)類別存在。微量元素中的硒被稱為“抗癌王”，可提高人體的防癌、抗癌和免疫能力，可抑制癌細(xì)胞的代謝與生長。中國營養(yǎng)學(xué)會(huì)建議正常人體每天硒的攝入量為20-200μg[3]，硒和維生素E一起使用可起到抗癌的作用[4]。硒缺乏會(huì)加速衰老，缺硒與心肌梗塞、冠心病、肝硬化及高血壓等心血管疾病密切相關(guān)；缺硒還會(huì)造成記憶力衰退、白內(nèi)障、老年性癡呆、智力障礙等疾病[5]。

當(dāng)今，硒的測定與分析方法有很多種[6-8]，但所使用的設(shè)備與紫外分光光度計(jì)相比較貴。本文采用萃取分光光度法研究小米中硒含量測定時(shí)，某種金屬離子對測定的干擾。這樣為食用小米的選擇和對小米資源的開發(fā)提供支撐。

2 干擾因素的分析及研究

2.1 干擾因素分析

在最優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下測定小米中的硒，小米中的某些離子會(huì)對測定造成一定干擾，主要為鉀、鈣、鎂、鈉、鐵、銅、錳、維生素和脂肪等，這些有機(jī)物可以通過炭化和灰化除去，由于實(shí)驗(yàn)所用的EDTA中含有鈉離子，因此小米中的鈉可以不予考慮，所以下面將對小米中的鉀、鈣、鎂、鐵、銅和錳離子進(jìn)行干擾測定。

2.2 干擾因素測定

在具塞錐形瓶中加入10μg/mL硒標(biāo)準(zhǔn)溶液2.00mL，不同體積10.0mg/mL硫酸銅溶液，加水20mL，用1moL/L的HCL調(diào)pH值至1.50，用20mL水沖洗電極，加0.2%鄰苯二胺6.00mL，混勻后在55℃水浴鍋內(nèi)放置40min，然后加入10mL甲苯，在振蕩器上振蕩6min，移入比色管中靜置5min，蒸餾水為參比，在334nm處測定其吸光度。以干擾離子加入量為基準(zhǔn)計(jì)算吸光度值的相對誤差。其他干擾離子的測定和銅離子的測定類似，結(jié)果見表1至表6。

表1 Cu2+干擾的測定

表2 Fe3+干擾的測定

表3 Mg2+干擾的測定

表4 Ca2+干擾的測定

表5 Mn2+干擾的測定

表6 K+干擾的測定

結(jié)果表明：當(dāng)測定硒的質(zhì)量為20μg時(shí)，加入的干擾離子對顯色測定影響較小，所測定的相對誤差<5%時(shí),可允許Cu2+(V=35)、Ca2+(V=1000)、Mg2+(V=1000)、Fe3+(V=11)、Mn2+(V=1000)、K+(V=1000)的存在，由以上試驗(yàn)吸光度數(shù)據(jù)可以得出Fe3+、Cu2+可能對小米中硒的測定有干擾，因此在測定小米樣品時(shí)需要加掩蔽劑，以掩蔽Fe3+、Cu2+。

2.3 掩蔽劑的測定

在實(shí)驗(yàn)室最優(yōu)條件下，在具塞錐形瓶中依次加入標(biāo)準(zhǔn)溶液，EDTA溶液，調(diào)節(jié)pH值為1.5，之后加入鄰苯二胺，搖勻后在55℃的水浴鍋中保溫40min后加入甲苯，表7是通過改變EDTA溶液的用量，蒸餾水做參比，在最大吸收波長334nm處測定其吸光度。從表中可以看出：EDTA用量≤2.0mL時(shí)并不會(huì)干擾測定，但由于本實(shí)驗(yàn)在酸性條件下進(jìn)行，會(huì)對EDTA有一定的影響，過量的EDTA會(huì)生成白色的懸浮物，在萃取時(shí)常浮于甲苯層與水層之間，影響分析測定的結(jié)果。選擇EDTA的用量為恰好不生成沉淀為宜。經(jīng)過多次反復(fù)的實(shí)驗(yàn)，確定EDTA的用量為2mL，對溶液的測定吸光度沒有影響(在允許的誤差范圍內(nèi))。

表7 EDTA用量的選擇

3 展望

國家規(guī)定谷物中硒的含量小于等于0.3μg/g。此實(shí)驗(yàn)采用的測定小米中硒含量的方法符合國家標(biāo)準(zhǔn)的要求，且與國家標(biāo)準(zhǔn)中的方法相比簡單易行，條件易于掌控，用到的儀器也較普遍，無需大型儀器，成本低，為今后快速測定小米中硒含量做了一個(gè)鋪墊。

如果有時(shí)間、條件，應(yīng)與氫化物原子熒光光譜法和熒光光譜法進(jìn)行對照實(shí)驗(yàn)，進(jìn)一步驗(yàn)證方法的準(zhǔn)確度。如果進(jìn)行更廣泛的干擾研究，方法的適用性將更強(qiáng)。