大黃素甲醚對刺梨白粉病的防治效果研究

張志敏　侯發(fā)民　吳琴芳

摘 要：采用室內(nèi)抑菌試驗(yàn)和田間防效試驗(yàn)相結(jié)合的方法，研究了大黃素甲醚AS對刺梨白粉病的防治效果。結(jié)果表明，大黃素甲醚AS對刺梨白粉病病菌的生長均具有顯著的抑制作用，田間防效明顯，增產(chǎn)顯著。其中，濃度為12.5～25.0mg·L-1的0.5%大黃素甲醚AS與濃度為166.7mg·L-1的25%嘧菌酯SC，對刺梨白粉病的抑菌作用和防治效果相當(dāng)，且產(chǎn)量與增產(chǎn)率均顯著高于25%嘧菌酯SC。因此，0.5%大黃素甲醚AS對刺梨白粉病具有很好的防治效果，增產(chǎn)顯著，可代替化學(xué)農(nóng)藥實(shí)現(xiàn)綠色生產(chǎn)，在生產(chǎn)上可推廣使用，12.5～25.0mg·L-1為推薦使用濃度。

關(guān)鍵詞：刺梨;大黃素甲醚;白粉病;防治效果

中圖分類號(hào) S665.9文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A文章編號(hào) 1007-7731（2020）08-0087-04

Abstract： The control effect of physcion AS on powdery mildew of Rosa roxburghii was studied in this research， the indoor antibacterial test and field control effect test were used. The results showed that physcion AS had significant inhibitory effect on powdery mildew growth， application of physcion AS had obvious field control effect and significant increase in yield. Among treatments， the antibacterial effect and field control effect of physcion 0.5% AS at a concentration of 12.5～25.0mg·L-1 were similar to those of 166.7 mg·L-1 azoxystrobin 25% SC， and the yield was significantly higher than group of azoxystrobin 25% SC. Therefore， physcion 0.5% AS had better control effect on powdery mildew of Rosa roxburghii， and could increase obviously in yield. It could replace chemical pesticides to realize the green production. and it was used in production， and recommended concentration was 12.5～25.0mg·L-1.

Key words： Rosa roxburghii Tratt.; Physcion; Powdery mildew; Control effect

刺梨（Rosa roxburghii Tratt.）屬薔薇科、薔薇屬多年生落葉灌木，其果實(shí)是我國特有的第三代新興水果，營養(yǎng)豐富，抗氧化能力強(qiáng)[1-2]，主要分布于貴州、云南、廣西、四川、西藏、陜西、湖北等地，其中貴州省的栽培面積最大。近年來，在刺梨主栽區(qū)，白粉病的發(fā)病情況較為嚴(yán)重，尤其在濕度較大、溫度較高的地區(qū)發(fā)病速度快，危害嚴(yán)重。刺梨白粉病主要危害植株的嫩葉、花蕾、花瓣及幼果等器官，影響植株的呼吸作用及光合作用，降低產(chǎn)量和品質(zhì)，阻礙了刺梨產(chǎn)業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展[3-4]。

目前，生產(chǎn)上主要是施用化學(xué)藥劑來防治刺梨白粉病，如嘧菌酯、三唑酮、苯醚甲環(huán)唑、甲基硫菌靈、腈菌唑等[4-5]，但長期使用化學(xué)農(nóng)藥會(huì)造成環(huán)境污染、生態(tài)破壞、農(nóng)藥殘留等問題，且對人畜造成危害[6]。因此，生產(chǎn)中提倡生物農(nóng)藥代替化學(xué)農(nóng)藥。

植物源農(nóng)藥具有不污染環(huán)境、易于降解、不易產(chǎn)生抗藥性、對人畜安全等優(yōu)點(diǎn)，是代替化學(xué)農(nóng)藥的最佳選擇，對于保證農(nóng)業(yè)綠色可持續(xù)發(fā)展發(fā)揮著重要作用。大黃素甲醚屬是從廖科植物的根或莖中提取出的一種蒽酮類化合物，具有殺菌功效[7]。研究表明，大黃素甲醚對黃瓜白粉病、水稻稻瘟病具有良好的保護(hù)和治療效果[8-10]，但目前尚未見大黃素甲醚在刺梨白粉病防治中的研究文獻(xiàn)。為此，筆者根據(jù)刺梨生產(chǎn)中面臨的主要問題，開展了大黃素甲醚對刺梨白粉病的防治效果研究，旨在為防治刺梨白粉病提供一定的理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況 田間試驗(yàn)于2018年在貴州省龍里縣谷腳鎮(zhèn)茶香村刺梨園進(jìn)行，海拔1400m左右，年平均氣溫14.8℃，年日照時(shí)數(shù)1160h，年降水量1100mm，無霜期280d以上，濕度較大，刺梨白粉病發(fā)病較重。試驗(yàn)地為5年樹齡的刺梨園，株行距為1.5m×2m，果園肥力中等，常規(guī)管理。

1.2 供試材料

1.2.1 品種 供試品種為易感白粉病的貴農(nóng)5號(hào)。

1.2.2 藥劑 0.5%大黃素甲醚AS，購于內(nèi)蒙古清源保生物科技有限公司，稀釋藥劑濃度如表1。25%嘧菌酯SC購于先正達(dá)生物科技有限公司，施用濃度為166.67mg·L-1，施用濃度參考嚴(yán)凱的研究[11]。

1.2.3 白粉病病原菌 白粉病病原菌材料采自刺梨園自然發(fā)病的植株葉片。2018年3月下旬，于刺梨白粉病發(fā)病初期收集自然發(fā)病的葉片，白粉病菌單菌落于PDA培養(yǎng)基中培養(yǎng)，經(jīng)6次分離純化后用于后續(xù)試驗(yàn)。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 制備含藥培養(yǎng)基 將藥劑用無菌水配制成如表1所示有效濃度的藥液，將不同濃度的藥液按1∶100的體積比加入到滅菌后冷卻到40℃的PDA培養(yǎng)基中[12]，充分混合后倒入培養(yǎng)皿，以加無菌水的培養(yǎng)基為對照（CK）。

1.3.2 大黃素甲醚對病原菌菌絲生長的影響 試驗(yàn)用打孔器（d=5mm）截取純化后的病原菌菌餅，接種到含藥和空白對照培養(yǎng)皿中央，菌絲朝上，放置于28℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每處理重復(fù)3次，待對照菌落直徑大于培養(yǎng)皿直徑2/3時(shí)，采用十字交叉法測定菌落直徑（mm），取平均值，計(jì)算生長抑制率。計(jì)算公式如下：

[生長抑制率（%）=對照菌落直徑-處理菌落直徑對照菌落直徑-0.5×100]

1.3.3 大黃素甲醚對刺梨白粉病田間防治效果的試驗(yàn) 田間試驗(yàn)將大黃素甲醚設(shè)置6個(gè)濃度（如表1），25%嘧菌酯SC作為對照藥劑，以施無菌水作為空白對照（CK），每處理重復(fù)3次，采用隨機(jī)區(qū)組排列，選取植株生長一致的刺梨地塊作為試驗(yàn)小區(qū)，每小區(qū)面積為66.7m2。用手動(dòng)噴霧器于2018年4月10日進(jìn)行第1次施藥，共施2次，間隔7d，施藥時(shí)葉片的正反面要均勻噴藥，以葉片不滴水為宜。于施藥前及藥后7、14d調(diào)查發(fā)病情況，每小區(qū)采取對角線5點(diǎn)取樣法進(jìn)行調(diào)查，重復(fù)3次。刺梨白粉病葉片病害分級標(biāo)準(zhǔn)參照參考文獻(xiàn)[13]，計(jì)算病情指數(shù)和防治效果。計(jì)算公式如下：

1.3.4 產(chǎn)量統(tǒng)計(jì) 果實(shí)采收時(shí)，統(tǒng)計(jì)每個(gè)小區(qū)的產(chǎn)量，并換算每hm2的產(chǎn)量。

1.4 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS軟件ANOVA過程進(jìn)行方差分析，Duncan′s新復(fù)極差法比較各處理間的差異顯著性。

2 結(jié)果與分析

2.1 大黃素甲醚對刺梨白粉病菌菌絲生長的影響 利用培養(yǎng)基法測定不同濃度的0.5%大黃素甲醚AS對刺梨白粉病菌菌絲生長的影響，結(jié)果表明，0.5%大黃素甲醚AS（濃度為7.5～25.0mg·L-1）對刺梨白粉病病菌菌絲生長具有顯著的抑制作用（P<0.05）（表2），病原菌菌落直徑，大小隨濃度的增大而變小，抑制率提高，但增加到一定程度時(shí)抑菌效果無明顯的差異。其中，經(jīng)濃度為12.5～25.0mg·L-1的0.5%大黃素甲醚AS處理后，各處理間刺梨白粉病病原菌菌落大小、抑菌率無明顯的變化（P>0.05），且與25%嘧菌酯SC化學(xué)農(nóng)藥之間也無顯著差異。表明0.5%大黃素甲醚AS有效濃度為12.5～25.0mg·L-1時(shí)，對刺梨白粉病病菌菌絲的生長抑制效果與濃度為166.7mg·L-125%嘧菌酯SC抑菌效果相當(dāng)。

2.2 大黃素甲醚對刺梨白粉病的田間防治效果 連續(xù)2次施用0.5%大黃素甲醚AS后，刺梨白粉病的病情指受到了明顯抑制（表3），隨著濃度的增加，病情指數(shù)逐漸降低，防治效果提高，但當(dāng)0.5%大黃素甲醚AS濃度增加到12.5mg·L-1時(shí)，病情指數(shù)、防治效果與濃度為166.7mg·L-1的25%的嘧菌酯SC無顯著差異（P<0.01），并且濃度大于12.5mg·L-1時(shí)，刺梨白粉病的防治效果并未得到明顯的提高，反而濃度增加到25.0mg·L-1時(shí)防效指標(biāo)略有降低。這可能由于外在環(huán)境條件造成的（有待進(jìn)一步研究），但與化學(xué)試劑防效之間無明顯差異。因此，濃度為12.5～25.0mg·L-1的大黃素甲醚AS對刺梨白粉病的田間防治效果與166.7mg·L-1的25%嘧菌酯SC防效相當(dāng)。

2.3 大黃素甲醚對刺梨產(chǎn)量的影響 施用0.5%大黃素甲醚AS后，刺梨產(chǎn)量得到了顯著提高，不同濃度處理組產(chǎn)量、增產(chǎn)率明顯高于CK組（表4），隨著0.5%大黃素甲醚AS施用濃度增加，刺梨產(chǎn)量、增產(chǎn)率均相應(yīng)提高，增產(chǎn)幅度較大的是濃度為12.5～25.0mg·L-1處理組，增產(chǎn)率達(dá)到了172.98%、175.17%、171.61%，這3組處理的產(chǎn)量和增產(chǎn)率明顯高于25%嘧菌酯SC化學(xué)藥劑處理組，分別高出24.63%、26.83%、23.26%，且3種濃度處理間產(chǎn)量和增產(chǎn)率無顯著差異，濃度為7.1～10.0mg·L-1的處理組產(chǎn)量、增產(chǎn)率均顯著低于25%嘧菌酯SC化學(xué)藥劑處理組。因此，施用濃度為12.5～25.0mg·L-1的0.5%大黃素甲醚AS能顯著提高刺梨的產(chǎn)量，增產(chǎn)效果顯著，且優(yōu)于25%嘧菌酯SC化學(xué)藥劑。

3 結(jié)論與討論

0.5%大黃素甲醚AS對刺梨白粉病菌菌絲生長具有顯著的抑制作用，抑制效果隨濃度增加而提高，有效濃度為12.5～25.0mg·L-1時(shí)，對刺梨白粉病病菌菌絲的生長抑制效果與濃度為166.7mg·L-1的25%嘧菌酯SC抑菌效果相當(dāng)。連續(xù)2次大田施藥后，0.5%大黃素甲醚AS對刺梨白粉病具有顯著的防治效果，濃度為12.5～25.0mg·L-1的大黃素甲醚AS，施藥后防治效果達(dá)77%以上，與166.7mg·L-1的25%嘧菌酯SC防效無顯著差異，產(chǎn)量和增產(chǎn)率均顯著高于化學(xué)藥劑處理組，增產(chǎn)明顯。

由室內(nèi)抑菌試驗(yàn)和大田防效結(jié)果分析知，0.5%大黃素甲醚AS對刺梨白粉病病菌具有很好的抑菌和防治效果，濃度為12.5～25.0mg·L-1的大黃素甲醚AS與濃度為166.7mg·L-1的25%嘧菌酯SC化學(xué)藥劑對刺梨白粉病的抑菌作用和防治效果相當(dāng)，且增產(chǎn)明顯。因此，濃度為12.5～25.0mg·L-1的0.5%大黃素甲醚AS可以作為防治刺梨白粉病的有效植物源農(nóng)藥，在生產(chǎn)中推廣使用。施用方法為，在刺梨白粉病未發(fā)病前噴施，采用噴霧法，每隔7d噴1次，至少施用2次。根據(jù)不同的氣候和植株發(fā)病情況，酌情調(diào)整濃度和施用次數(shù)。

前人研究表明，大黃素甲醚對大麥和黃瓜白粉病的控制效果良好[14]。任紅敏[15]在研究10%大黃素甲醚對黃瓜白粉病的抑菌活性影響中表明，大黃素甲醚對黃瓜白粉病病菌活性有顯著的抑制作用，這與本試驗(yàn)的結(jié)論相似。植物源農(nóng)藥的藥效不穩(wěn)定是使用過程中面臨的主要問題，而大黃的化學(xué)穩(wěn)定性非常好，試驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)，0.5%大黃素甲醚AS對刺梨生長期間的光、溫等條件具有良好的穩(wěn)定性。田間試驗(yàn)也證明12.5～25.0mg·L-1的0.5%大黃素甲醚AS能有效控制刺梨白粉病的發(fā)生，提高產(chǎn)量。本試驗(yàn)僅開展不同濃度大黃素甲醚AS對刺梨白粉的防效研究，而諸如大黃素甲醚與化學(xué)藥劑交替或混合使用對刺梨白粉病的防效如何、大黃素甲醚對植株生理活性及果實(shí)品質(zhì)的影響等問題，今后有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

[1]Yang Q Q，Zhang D，F(xiàn)arha A K et al. Phytochemicals，essential oils，and bioactivities of an underutilized wild fruit Cili （Rosa roxburghii）[J]. Industrial Crops & Products，2020，143：1-8.

[2]Liu M H，Zhang Q，Zhang Y He，et al. Chemical analysis of dietary Constituents in Rosa roxburghii and Rosa sterilis fruits.[J]. Molecules，2016，21（9）：1-21.

[3]嚴(yán)凱，羅澤麗，胡芳麗，等.刺梨白粉病的發(fā)生規(guī)律及生物學(xué)特性[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，45（21）：119-122.

[4]張艷杰，王斐，歐春青，等.梨樹白粉病研究進(jìn)展[J].中國植保導(dǎo)刊，2019，39（7）：23-27.

[5]冉繼平，閆巖，王明力，等.刺梨白粉病拮抗菌的篩選及其抑菌機(jī)制初探[J].食品工業(yè)科技，2018，39（23）：146-154.

[6]聶繼云.我國果品農(nóng)藥殘留限量新變化[J].中國果樹，2017（3）：96-100.

[7]張弘，姬蘭柱，李淼，等.大黃素甲基化衍生物的生物活性[J].農(nóng)藥，2008，47 （7）：537-539.

[8]Yang X J，Yang L J，Wang S N，et al.Synergistic interaction of physcion and chrysophanol on plant powdery mildew[J].Pest Manag Science，2007，63（5）：511-515.

[9]楊立軍，龔雙軍，楊小軍，等.大黃素甲醚對幾種植物病原真菌的活性[J].農(nóng)藥，2010，49（2）：133-135.

[10]薛敏峰，向禮波，龔雙軍，等.0.5%大黃素甲醚水劑等藥劑對水稻稻瘟病防治效果評價(jià)[J].湖北植保，2017（01）：14-15.

[11]嚴(yán)凱，王金利，周園，等.5種殺菌劑對刺梨白粉病的防治效果[J].農(nóng)藥，2018，57（8）：609-610.

[12]畢江濤，馬萍，楊志偉，等.藥用植物檉柳內(nèi)生真菌分離及其抑菌活性初步研究[J].草業(yè)學(xué)報(bào)，2013，22（3）：132-138.

[13]張凱，曹凱歌，劉偉中，等.4種藥劑對小麥赤霉病和白粉病的田間防治效果[J].農(nóng)藥，2019，58（09）：694-696.

[14]Choi G J，Lee S W，Jang K S，et al. Effects of Chrysophanol，Parietin，and Nepodin of Rumexcrispus on Barley and Cucumber Powdery Mildews[J]. Crop Protection，2004，23：1215-1221.

[15]任紅敏，王樹桐，胡同樂，等.大黃酚對黃瓜白粉病菌的抑制作用研究[J].植物病理學(xué)報(bào)，2008，38（5）：526-531.

（責(zé)編：張宏民）