桶裝飲用水微生物污染檢測的探討

武永春

（太原市疾病預(yù)防控制中心 山西太原 030012）

1 前言

本文對某地區(qū)城市消費者的飲用桶裝水和飲水機各個部位的微生物污染情況進行了抽樣調(diào)查，通過調(diào)查得到了一些具有指導(dǎo)意義的數(shù)據(jù)，以供參考。

2 材料與方法

2.1 材料

研究對象為某地區(qū)飲用桶裝水生產(chǎn)企業(yè)生產(chǎn)的18.9 L 的桶裝飲用水。對這些飲用水出廠的狀態(tài)進行抽樣檢測可知，其微生物指標(biāo)等各個方面都符合GB 8538—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)飲用天然礦泉水檢驗方法》[1]。為了有效分析二次污染問題，對本次研究的飲用水進行了跟蹤調(diào)查，隨機抽取并分析了當(dāng)?shù)啬承┫M者的桶裝飲用水的二次微生物污染問題。

2.2 方法

2.2.1 流經(jīng)飲水機桶裝飲用水的調(diào)查方法

使用無菌法采集飲水機內(nèi)部的冷水樣本，然后通過GB 8538—2016 規(guī)定的食品微生物檢測方法對飲用水內(nèi)部的微生物進行統(tǒng)計。

2.2.2 飲水機內(nèi)膽微生物污染調(diào)查

為了更為精準(zhǔn)地調(diào)查桶裝飲用水的飲水機內(nèi)部的微生物污染情況，在結(jié)束冷水采集后，需要采用相應(yīng)的方法（棉拭子法）對飲水機內(nèi)膽及跟其接觸部分的水樣進行采集。然后使用同樣的方法采集多種水樣，使用GB 8538—2016 規(guī)定的方法對其中的微生物進行檢測和評價。

2.2.3 桶口、桶頸處微生物污染調(diào)查

在飲水機使用過程中，所有的水流都會與桶裝水的桶口進行接觸，因此，在對飲水機微生物二次污染情況進行研究的過程中，檢測桶裝水桶口部位的微生物污染情況很有必要，可進一步明確微生物污染范圍。棉拭子法同樣適用于對水桶的桶口和桶頸的部位進行采樣。

3 結(jié)果

通過本次調(diào)查可知，從桶裝水內(nèi)部流出的水中，主要不合格的各類霉菌為大腸桿菌和酵母菌等。具體結(jié)果詳見表1、表2。

表1 調(diào)查結(jié)果

表2 微生物檢驗結(jié)果

4 討論

4.1 冷水端飲用水污染情況分析

對調(diào)查的所有用戶中飲用水的污染情況進行分析可知，家庭用戶、機關(guān)單位用戶、旅館及飯店用戶冷水端的大腸桿菌陽性率達到了43%、48%、57%，均嚴(yán)重超標(biāo)。甚至在飲水機接觸底部、內(nèi)膽壁等部位還存在一些肉眼可見霉斑。冷水端是大部分飲水機用戶的常用水端，直接引用冷水端的出水，導(dǎo)致胃腸道疾病，例如，腹痛、腹瀉等。一些用戶在出現(xiàn)胃腸道不適后，往往首先懷疑是出廠的飲用水不潔，甚至存在污染，但在進行研究之前，對所有內(nèi)部水源的調(diào)查發(fā)現(xiàn)，出廠時桶裝水的質(zhì)量都合乎國家的相關(guān)生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)[2]。

4.2 熱水端飲用水污染情況分析

與冷水端相比，熱水端的平均菌落總數(shù)較少，但相比之下，家庭用戶熱水端的菌落數(shù)量超遠機關(guān)單位用戶和旅館及飯店用戶。這可能與家庭用戶對熱水端的使用頻率有關(guān)，長期不使用也會造成菌落的聚集[3]。且家庭用戶、機關(guān)單位用戶和旅館及飯店用戶飲水機熱水端的腸桿菌陽性率分別為38%、27%、35%，均未達到國家標(biāo)準(zhǔn)。

4.3 飲水機內(nèi)膽長時間不清洗導(dǎo)致的污染嚴(yán)重

本文研究的桶裝飲用水在出廠時都是經(jīng)過嚴(yán)格檢測的，都符合國家衛(wèi)生的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。飲用水存在微生物超標(biāo)的情況，并不是由于飲用水生產(chǎn)廠家在飲用水生產(chǎn)過程中引入的，其最根本原因是因為二次污染?；诖耍疚碾S機抽取了90 桶桶裝飲用水進行調(diào)查研究，結(jié)果顯示，這些用戶當(dāng)中，56%的用戶飲水機的使用年限長達3 年，使用時間最短的也超過了3 個月（3%）。另外，城市居民對于飲水機方面的知識了解不多，會定期對飲水機進行清潔的用戶不到3%，而偶爾會對飲水機進行清理的用戶也不到5%。大多數(shù)用戶只有首次使用飲水機前對其進行清洗，之后未曾清洗。之所以會出現(xiàn)這種情況，主要由以下3 個因素造成：（1）由于日常的工作生活過于繁忙，用戶在飲水機的使用過程當(dāng)中，沒有時間對飲水機進行清洗；（2）部分用戶并不太清楚飲水機的正常使用要求；（3）部分用戶沒有關(guān)注過飲水機的使用情況。

4.4 桶裝飲用水搬運過程存在著一定的污染

城市居民用戶的桶裝飲用水通常都是由相關(guān)的廠商派遣送水人員送至用戶處所[3-5]，運輸過程中可能會有一部分桶裝水被污染，還需進一步進行分析調(diào)查。

5 控制措施

5.1 制定合理的控制措施

為了有效降低城市居民在桶裝水使用過程中的二次污染，應(yīng)該采取一定的控制措施：

（1）桶裝水的生產(chǎn)廠家要嚴(yán)格控制出廠檢驗，嚴(yán)格把控桶裝水的生產(chǎn)環(huán)節(jié)，保障桶裝水的出廠質(zhì)量達到國家質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，從源頭上避免污染。

（2）絕大部分飲水機飲用水污染都是由于飲水機使用不當(dāng)造成的，而在調(diào)查中也發(fā)現(xiàn)，很多用戶并不清楚飲水機的正常使用要求，也沒有足夠關(guān)注飲水機的清洗問題。這就要求飲水機生產(chǎn)廠家做好相應(yīng)的提醒工作，在飲水機的顯眼部位張貼相關(guān)的標(biāo)簽和標(biāo)語，保證用戶意識到對飲水機進行清理的重要性，以及不定期清理飲水機可能造成的危害，提高用戶的飲水機清理意識。與此同時，飲水機廠家及售賣方也應(yīng)加強對該方面常識的宣傳和普及，可以通過飲水機使用手冊、播放小視頻等方式，將飲水機清理知識插入售賣廣告中，提高飲水機清理知識的普及度。另外，飲水機生產(chǎn)廠家也可以將飲水機清理作為一項售后服務(wù)，為用戶提供更為專業(yè)和便捷的清理。消費者購買飲水機時，銷售人員應(yīng)當(dāng)明確告知其長期不清理飲水機的危害，可以定期通過微信、短信等方式提醒用戶清理飲水機。

（3）由于飲用水搬運過程中可能存在一定的污染，因此，桶裝水廠商應(yīng)該加強對搬運人員的培訓(xùn)與管理，要求其掌握基本的衛(wèi)生知識，在搬運和安裝的過程中保持手部衛(wèi)生，必要時佩戴一次性手套，避免用手直接接觸桶口、桶機接口和內(nèi)膽等部位。

5.2 采用正確的檢測方法

5.2.1 LAMP 檢測

環(huán)介導(dǎo)等溫擴增技術(shù)（LAMP）是利用鏈置換脫氧核糖核酸（DNA）聚合酶在等溫條件下進行反應(yīng)的[6]，40 min 內(nèi)可完成核酸擴增，檢測過程不需昂貴的儀器設(shè)備，使用簡單的水浴鍋即可，且擴增產(chǎn)物無需煩瑣的電泳過程，快速靈敏、特異性強、成本低，尤其適用于大量、即時的病原微生物的初篩，易于在基層推廣應(yīng)用[7，8]。

5.2.2 PCR 法

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）技術(shù)是在體外合適條件下，以DNA 為模板，以一對人工合成的寡核苷酸為引物，在耐熱DNA 聚合酶作用下特異性擴增目的DNA片段的技術(shù)[9]。應(yīng)用PCR 技術(shù)檢測食源性致病菌分為常規(guī)PCR、實時熒光定量PCR、多重PCR 等，為了提高檢測靈敏度，可采用一定的增菌方式提高目標(biāo)DNA片段的濃度。曾曉琮等[10]建立了常規(guī)PCR技術(shù)檢測桶裝水銅綠假單胞菌的方法，該方法包括過濾、增菌、過濾、提取DNA、電泳等步驟，整個操作過程僅約需22 h，然而無法區(qū)分活細(xì)菌和死細(xì)菌，容易造成假陽性[11]。為了克服這個缺點，可添加10 μg/mL 疊氮溴乙錠（EMA），這樣既能有效抑制死菌PCR 又不影響活菌PCR，可進一步實現(xiàn)對水中活菌的檢測。相比常規(guī)PCR 法，熒光定量PCR 技術(shù)在反應(yīng)體系中加入熒光基團或染料，通過熒光信號的強弱反映擴增過程中模板濃度的變化，具有更強的檢測靈敏度和特異性。

6 結(jié)語

綜上所述，飲水機配套桶裝飲用水微生物污染檢測不容忽視，這就需要用戶從自身做起，加強對飲用水污染檢測的認(rèn)識，并采用合適的檢測方法，減少飲用水中微生物的污染。