自身免疫性抗體檢測(cè)在臨床診斷自身免疫性肝病中的價(jià)值評(píng)估

楊月星

（臺(tái)山市人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，廣東 臺(tái)山529200）

自身免疫性肝病 （autoimmune liver disease，AILD）是指由于自身免疫系統(tǒng)功能紊亂而引發(fā)的肝細(xì)胞或膽管上皮細(xì)胞炎癥性病變，往往導(dǎo)致患者肝功能異常，并容易發(fā)展為肝硬化，主要包括自身免疫性肝炎 （AIH）、原發(fā)性肝硬化 （PBC）以及原發(fā)性硬化性膽管炎 （PSC）［1］。有研究［2-3］指出，AILD的發(fā)病機(jī)制與患者自身免疫機(jī)制存在較大的關(guān)聯(lián)，檢測(cè)血清自身免疫抗體的表達(dá)和肝功能指標(biāo)對(duì)鑒別診斷AILD和病毒性肝炎具有重要的作用。為此，本研究探討自身免疫性抗體檢測(cè)在臨床診斷AILD中的應(yīng)用效果，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2018年4月至2019年9月在我院就診的AILD患者69例 （AILD組）和病毒性肝炎患者77例 （病毒性肝炎組），并選取同期65例正常健康者作為健康對(duì)照組。AILD患者中男性39例，女性30例；年齡27～69歲，平均 （46.37±6.52）歲；AIH患者24例，PBC患者40例，PSC患者5例。病毒性肝炎患者中男性43例，女性34例；年齡24～72歲，平均 （47.44±7.13）歲；乙型肝炎患者55例，甲型肝炎患者16例，戊型肝炎患者6例。健康對(duì)照組中男性36例，女性29例；年齡25～68歲，平均 （45.61±6.34）歲。三組的一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0.05）。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn)納入標(biāo)準(zhǔn)：①AILD患者的臨床診斷及分型均符合 《自身免疫性肝病診斷和治療指南》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］；②病毒性肝炎患者的臨床診斷及分型均符合 《病毒性肝炎防治方案（試行）》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)［4］；③依從性高，對(duì)本研究知情且自愿參與。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有精神病或嚴(yán)重意識(shí)障礙癥的患者；②嚴(yán)重心理疾病的患者；③合并其他嚴(yán)重疾病或惡性腫瘤的患者。

1.3 方法

1.3.1自身免疫抗體檢測(cè) ①抗核抗體 （ANA）應(yīng)用間接免疫熒光法檢測(cè)，以HEP-2細(xì)胞及猴肝作為抗原，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，檢測(cè)結(jié)果以定性 （陽(yáng)性或陰性）表示。②抽取靜脈血5 mL，半小時(shí)后離心處理并分離血清置于冰箱中保存。應(yīng)用免疫印跡條帶法檢測(cè)抗線粒體抗體M2型 （AMAM2）、抗肝腎微?？贵wⅠ型抗體 （LKM-1）、可溶性酸性磷酸化核蛋白SP100抗體 （SP100）、抗可溶性肝抗原抗體 （SLA）、抗肝細(xì)胞溶質(zhì)抗原1型抗體 （LC-1）的含量，檢測(cè)時(shí)將血清混合稀釋100倍，結(jié)果以定性 （陽(yáng)性或陰性）表示，1項(xiàng)及1項(xiàng)以上指標(biāo)陽(yáng)性即判定該患者自身免疫抗體陽(yáng)性。

1.3.2肝功能指標(biāo)檢測(cè) 三組研究對(duì)象均在空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血5 mL，應(yīng)用全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶 （ALT）、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶 （GGT）和堿性磷酸酶（ALP）含量。檢測(cè)過(guò)程使用全自動(dòng)生化分析儀原裝試劑、校準(zhǔn)品以及質(zhì)控品。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理選用SPSS 21.0軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以率（%）描述，比較采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以±s描述，比較采用方差分析或非參數(shù)檢驗(yàn)；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清自身免疫抗體陽(yáng)性率AILD組患者的血清自身免疫抗體ANA、AMA-M2、LKM-1、SP100、SLA陽(yáng)性率以及總陽(yáng)性率均顯著高于病毒性肝炎組和健康對(duì)照組 （P＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 三組研究對(duì)象的血清自身免疫抗體陽(yáng)性率比較 ［n（%）］

2.2 肝功能指標(biāo)AILD組患者的ALT、AST、GGT、ALP含量均顯著高于病毒性肝炎組和健康對(duì)照組 （P＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 三組研究對(duì)象的肝功能指標(biāo)含量比較 （±s，U／L）

表2 三組研究對(duì)象的肝功能指標(biāo)含量比較 （±s，U／L）

組別 n A L T A S T G G T A L P A I L D 組 6 9 2 4 7.3 5±3 9.1 6 1 9 5.6 4±3 6.6 2 2 0 8.9 3±4 1.2 8 2 8 8.3 7±4 6.0 9病毒性肝炎組 7 7 7 8.3 3±2 1.5 2 6 2.7 6±1 8.4 9 5 9.8 7±1 6.2 3 1 2 4.6 7±3 1.5 5健康對(duì)照組 6 5 2 8.7 9±9.4 3 2 5.7 1±1 1.5 8 2 9.3 4±8.6 3 7 1.6 9±1 4.2 8 F值 1 2.5 6 5 8.3 0 4 8.5 9 4 1 4.4 7 9 P值 0.0 0 0 0.0 0 0 0.0 0 0 0.0 0 0

3 討論

AILD的發(fā)病機(jī)制目前國(guó)內(nèi)外尚無(wú)明確闡述，主要研究方向集中于AILD的鑒別診斷和臨床治療［5-6］。在發(fā)病初期，AILD患者并無(wú)明顯特異的臨床表現(xiàn)，在臨床診斷方面容易和病毒性肝炎以及其他肝臟病癥混淆，尤其是AILD可能會(huì)與病毒性肝炎合并發(fā)生［7］。另外，有研究［8］提出，機(jī)體在受到病毒感染后，可誘導(dǎo)自身抗原修飾而導(dǎo)致自身免疫系統(tǒng)異常，指出AILD和病毒性肝炎的發(fā)病機(jī)制有一定的共性存在。本研究中，病毒性肝炎患者有6例為ANA陽(yáng)性患者，2例為AMAM2陽(yáng)性患者。AILD的早期診治是提高臨床治療效果和改善患者預(yù)后的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，因此通過(guò)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)鑒別診斷AILD和病毒性肝炎對(duì)進(jìn)一步的臨床治療具有重要的意義。

本研究中，AILD組的自身免疫抗體總陽(yáng)性率為91.3%（63／69），顯著高于病毒性肝炎組和健康對(duì)照組 （P＜0.05），表明機(jī)體血清自身免疫抗體陽(yáng)性是AILD患者的特異表現(xiàn)，可以認(rèn)為自身免疫抗體對(duì)鑒別診斷AILD和病毒性肝炎以及健康人有重要作用。同時(shí)，本研究結(jié)果顯示，在AILD患者中，ANA陽(yáng)性率最高，達(dá)到85.5%，其次為AMA-M2和SP100，均顯著高于病毒性肝炎組和健康對(duì)照組 （P＜0.05），提示ANA可作為鑒別診斷AILD和病毒性肝炎的免疫指標(biāo)，具有較高的敏感度，但是ANA在不同的自身免疫性疾病中呈現(xiàn)不同程度的陽(yáng)性率表現(xiàn)，特異性不高，因此需要結(jié)合其他免疫指標(biāo)以及肝功能指標(biāo)綜合評(píng)價(jià)。AMA-M2抗體以線粒體內(nèi)膜上的2-酮酸脫氫酶復(fù)合物為靶抗原，是AILD患者高度特異性的自身免疫抗體，尤其是對(duì)于PBC患者而言，具有較高的敏感性和特異性［9］。張宏宇等［10］的研究指出，在AIH患者、PBC患者、病毒性肝炎患者以及健康人中，PBC患者的血清AMA-M2陽(yáng)性檢出率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他三組。但是，由于自身免疫抗體水平在AILD病情的發(fā)生發(fā)展中是一個(gè)動(dòng)態(tài)變化的過(guò)程，加之各項(xiàng)免疫指標(biāo)在其他不同免疫疾病中也存在一定的陽(yáng)性率，因此應(yīng)根據(jù)臨床特征、肝功能指標(biāo)等多項(xiàng)資料進(jìn)行綜合分析，避免誤診。本研究肝功能檢測(cè)結(jié)果顯示，AILD組和病毒性肝炎組的肝功能指標(biāo)顯著高于健康對(duì)照組，表明兩組患者的肝功能均受到損傷；同時(shí)AILD組的肝功能指標(biāo)均顯著高于病毒性肝炎組 （P＜0.05），表明肝功能指標(biāo)一定程度上有利于AILD和病毒性肝炎的鑒別，但是考慮到肝功能指標(biāo)和病情嚴(yán)重程度有較大的相關(guān)性，診斷特異性欠佳，因此需要聯(lián)合自身免疫抗體和肝功能指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果結(jié)合臨床表現(xiàn)對(duì)AILD和病毒性肝炎進(jìn)行鑒別診斷。

綜上所述，自身免疫抗體檢測(cè)對(duì)臨床診斷自身免疫性肝病具有重要的應(yīng)用價(jià)值，可用于自身免疫性肝病的早期診斷，聯(lián)合肝功能指標(biāo)檢測(cè)有利于提高診斷準(zhǔn)確性，值得臨床應(yīng)用推廣。