乳腺癌患者血清、腫瘤組織中VEGF、IL-17的表達(dá)及與臨床預(yù)后的相關(guān)性探討*

劉俊驥

湖南省邵陽(yáng)市中心醫(yī)院 422000

乳腺癌屬于臨床常見(jiàn)的惡性腫瘤，根據(jù)病理類型可分為浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌、導(dǎo)管內(nèi)癌、黏液腺癌等。手術(shù)是目前治療乳腺癌的首選方案，并輔以放療、化療、免疫治療等[1]。因此，如何早期對(duì)乳腺癌作出診斷是提升患者生存率的關(guān)鍵。白介素-17(IL-17)是由Th17細(xì)胞分泌，其即可對(duì)機(jī)體起到保護(hù)作用，又可在多種腫瘤發(fā)病中發(fā)揮作用[2]。血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)在乳腺癌細(xì)胞的表達(dá)及促血管細(xì)胞活性中發(fā)揮重要作用[3]?；诖吮疚闹饕接懭橄侔┗颊哐?、腫瘤組織中VEGF、IL-17表達(dá)及與臨床預(yù)后相關(guān)性?，F(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2016年9月—2017年9月期間收治的60例乳腺癌患者作為乳腺癌組，年齡28～67歲，平均年齡(46.94±5.12)歲；選取40例乳腺良性腫瘤患者作為乳腺良性腫瘤組，年齡26～69歲，平均年齡(47.39±5.26)歲；選取同期于我院體檢的20例健康女性作為對(duì)照組，年齡23～72歲，平均年齡(47.62±5.47)歲。三組年齡對(duì)比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，有可比性。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn) (1)納入標(biāo)準(zhǔn)：①乳腺癌患者均經(jīng)病理學(xué)檢查確診；②就診前均未行放療、化療等治療；③均簽署知情同意書(shū)。(2)排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并自身免疫性疾??；②合并哮喘、肺炎及其他心肺疾??；③合并其他惡性腫瘤者；④無(wú)法接受長(zhǎng)期隨訪者。

1.3 方法 乳腺癌組患者均行手術(shù)治療或化療，有手術(shù)指征的患者根據(jù)不同臨床分期選取適宜的術(shù)式，無(wú)手術(shù)指征患者行化療。

1.3.1 血清檢測(cè)：乳腺癌組患者治療前及術(shù)后7d抽取患者3ml靜脈血測(cè)定VEGF、IL-17，乳腺良性腫瘤組患者與對(duì)照組均抽取3ml靜脈血，測(cè)定VEGF、IL-17水平，所有樣本均不抗凝，于室溫下靜置2h，以3 000r/min的速度離心10min，分離上清，置于-70℃下保存待測(cè)，均采取酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定。

1.3.2 免疫組織化學(xué)方法 采用Envision二步法，IL-17兔抗人多克隆抗體、兔抗人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子由北京中杉金橋公司提供；CD34鼠抗人單克隆抗體及二抗均由丹麥Dako公司提供；陰性對(duì)照以PBS代替一抗；標(biāo)本于乳腺癌術(shù)后取材，利用10%的甲醛固定，利用石蠟包埋，切片厚度5μm，保存于-80℃下。病理切片由2名病理醫(yī)師觀察、判定，選擇10個(gè)高倍鏡(×400)視野，每個(gè)視野計(jì)數(shù)20個(gè)細(xì)胞，根據(jù)細(xì)胞染色情況判定。

1.4 觀察指標(biāo) (1)對(duì)比三組VEGF、IL-17水平；(2)對(duì)比乳腺癌組手術(shù)前后VEGF、IL-17水平；(3)對(duì)比腫瘤組織及癌旁組織VEGF、IL-17水平；(4)隨訪3年，統(tǒng)計(jì)乳腺癌復(fù)發(fā)與未復(fù)發(fā)患者VEGF、IL-17表達(dá)水平，分析其與預(yù)后的關(guān)系。

2 結(jié)果

2.1 三組血清VEGF、IL-17水平對(duì)比 乳腺癌組VEGF、IL-17水平>乳腺良性腫瘤組>對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 三組VEGF、IL-17水平對(duì)比

2.2 乳腺癌組腫瘤組織與癌旁組織VEGF、IL-17水平對(duì)比 腫瘤組織VEGF、IL-17水平較癌旁組織高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 乳腺癌組腫瘤組織與癌旁組織VEGF、IL-17水平對(duì)比

2.3 乳腺癌組手術(shù)前后血清VEGF、IL-17水平對(duì)比 術(shù)后，乳腺癌組血清VEGF、IL-17水平均較術(shù)前低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 乳腺癌組治療前后VEGF、IL-17水平對(duì)比

2.4 復(fù)發(fā)與未復(fù)發(fā)患者血清VEGF、IL-17表達(dá)水平對(duì)比 隨訪3年，乳腺癌患者復(fù)發(fā)34例，未復(fù)發(fā)26例；復(fù)發(fā)患者血清VEGF、IL-17表達(dá)水平較未復(fù)發(fā)患者高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表4。

表4 復(fù)發(fā)與未復(fù)發(fā)患者血清VEGF、IL-17表達(dá)水平對(duì)比

2.5 相關(guān)性分析 血清VEGF、IL-17表達(dá)水平與乳腺癌術(shù)后預(yù)后均呈負(fù)相關(guān)(r=-0.412、-0.787，P=0.000、0.000)，即隨著VEGF、IL-17表達(dá)水平的升高，患者預(yù)后越差，復(fù)發(fā)率越高。

3 討論

乳腺癌多發(fā)于女性，具有發(fā)病率高、死亡率高等特點(diǎn)，臨床上對(duì)其發(fā)病機(jī)制尚不明確，多認(rèn)為與遺傳、雌激素分泌等因素相關(guān)，若不及時(shí)做好早期篩查，并采取有效的治療措施，癌細(xì)胞將發(fā)生轉(zhuǎn)移，并侵入多個(gè)器官，甚至危及患者生命[4]。因此，早期對(duì)乳腺癌作出診斷及治療具有重要意義。乳腺癌的發(fā)生發(fā)展與新生血管形成密切相關(guān)，其中VEGF是內(nèi)皮細(xì)胞特異性有絲分裂原，其屬于促脈管形成調(diào)節(jié)細(xì)胞，參與多種腫瘤的惡變過(guò)程[5]。劉志春等[6]研究指出，VEGF過(guò)度表達(dá)可能在三陰性乳腺癌的惡變及進(jìn)展中發(fā)揮重要作用，其表法與三陰性乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、侵襲性強(qiáng)等密切相關(guān)。Gao S[7]等研究指出，VEGF被認(rèn)為是淋巴管生成的主要介質(zhì)，與腫瘤發(fā)生及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。IL-17是由T輔助細(xì)胞亞群Th17細(xì)胞分泌，其促炎作用較強(qiáng)，在多種炎癥、自身免疫性疾病及腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用[8]。趙嚴(yán)冬等[9]研究指出，IL-17可促進(jìn)人乳腺癌細(xì)胞的侵襲；Alinejad V等[10]研究也指出，炎癥是引發(fā)乳腺癌的重要因素，Th17細(xì)胞通過(guò)產(chǎn)生促炎性細(xì)胞因子(IL-17)在乳腺癌等多種疾病中發(fā)揮作用。本研究結(jié)果顯示，乳腺癌組VEGF、IL-17水平>乳腺良性腫瘤組>對(duì)照組，腫瘤組織VEGF、IL-17水平較癌旁組織高，乳腺癌組術(shù)后血清VEGF、IL-17水平均較術(shù)前低，充分證明VEGF、IL-17的促瘤作用，其可有效促進(jìn)乳腺癌組織中新生血管形成，使血管通透性不斷增加，抑制腫瘤細(xì)胞凋亡，為乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)提供良好環(huán)境，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤發(fā)生及發(fā)展；而腫瘤切除后，VEGF、IL-17來(lái)源消失，使其表達(dá)水平恢復(fù)至正常水平。本研究結(jié)果顯示，復(fù)發(fā)患者血清VEGF、IL-17表達(dá)水平較未復(fù)發(fā)患者高，血清VEGF、IL-17表達(dá)水平與乳腺癌術(shù)后預(yù)后均呈負(fù)相關(guān)，表明乳腺癌患者VEGF、IL-17表達(dá)水平與患者臨床預(yù)后密切相關(guān)。

綜上所述，VEGF、IL-17在乳腺癌中呈高表達(dá)，且其水平與患者臨床預(yù)后相關(guān)性較高，可將VEGF、IL-17作為乳腺癌治療的實(shí)驗(yàn)及理論依據(jù)。