2017—2019年鎮(zhèn)遠(yuǎn)縣羊小反芻獸疫免疫抗體監(jiān)測(cè)分析

姚有志， 袁曉娟

(1. 貴州省鎮(zhèn)遠(yuǎn)縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 鎮(zhèn)遠(yuǎn) 557700； 2. 黔東南苗族侗族自治州動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，貴州 凱里 556000)

小反芻獸疫(PPR)是由小反芻獸疫病毒引起綿羊、山羊等小反芻獸的1種急性接觸性傳染病，以高稽留熱、眼鼻分泌物增加、口腔糜爛、腹瀉和肺炎為特征[1]。小反芻獸疫是我國(guó)強(qiáng)制免疫病種，疫苗免疫是預(yù)防本病的主要措施。近年來全國(guó)各地相繼發(fā)生數(shù)起小反芻獸疫疫情，其中就包括貴州省黔東南州的部分縣(市)，防疫形勢(shì)嚴(yán)峻。2017—2019年，鎮(zhèn)遠(yuǎn)縣年均存欄羊3.86萬只，面臨巨大的防控壓力。為提前做好防控風(fēng)險(xiǎn)分析及相關(guān)防控工作，保證扶貧產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展，特對(duì)我縣羊小反芻獸疫進(jìn)行免疫抗體水平監(jiān)測(cè)。

1 材料與方法

1.1 檢測(cè)血清采集鎮(zhèn)遠(yuǎn)縣4個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)規(guī)模羊場(chǎng)(存欄≥100只)及散養(yǎng)戶(存欄<100只)已免疫小反芻獸疫羊血清樣品311份，其中規(guī)模場(chǎng)181份，散養(yǎng)戶130份。

1.2 主要試劑與儀器羊小反芻獸疫抗體檢測(cè)試劑盒(批號(hào)：20171109、20180507、20191021)，購(gòu)自深圳市康百得生物科技有限公司。主要儀器：酶標(biāo)儀、生化培養(yǎng)箱、臺(tái)式高速離心機(jī)等。

1.3 方法及判定所有試劑使用前恢復(fù)至室溫，具體操作按小反芻獸疫抗體檢測(cè)試劑盒方法(競(jìng)爭(zhēng)ELISA)進(jìn)行。先將待檢血清按1∶100稀釋(陰性、陽性對(duì)照不稀釋)。在酶標(biāo)板上依次加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照各2孔，每孔100 μL，樣品孔加入稀釋好的待檢血清100 μL，蓋好封板膜，37 ℃避光反應(yīng)30 min；10倍洗滌液300 μL 洗滌3次后拍干，每孔加酶標(biāo)結(jié)合物100 μL，蓋好封板膜，37 ℃避光反應(yīng)30 min；洗滌3次后拍干，每孔加入等體積底物液和顯色液混合液100 μL，蓋好封板膜，37 ℃避光反應(yīng)15 min；加入終止液50 μL，用酶標(biāo)儀測(cè)定D450 nm值，計(jì)算S/P值。結(jié)果判定：(1)有效性判定：在陰性對(duì)照孔D450 nm≤0.20，陽性對(duì)照孔D450 nm≥0.30時(shí)實(shí)驗(yàn)有效。(2)檢驗(yàn)結(jié)果的判定：S/P=樣品D450 nm值/陽性對(duì)照平均值。樣品S/P≥0.2判為小反芻獸疫抗體陽性；樣品S/P<0.2判為小反芻獸疫抗體陰性。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同養(yǎng)殖規(guī)模羊小反芻獸疫抗體檢測(cè)結(jié)果從表1可見：小反芻獸疫3年總體免疫合格率為82%，其中規(guī)模場(chǎng)免疫合格率(87%)高于散養(yǎng)戶(75%)。

表1 不同養(yǎng)殖規(guī)模羊小反芻獸疫免疫抗體合格率

2.2 不同區(qū)域羊小反芻獸疫抗體檢測(cè)結(jié)果從表2可見：4個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)3年羊小反芻獸疫免疫抗體合格率相差較大，青溪鎮(zhèn)最高為91%，都坪鎮(zhèn)最低為77%。2018年都坪鎮(zhèn)(60%)、江古鎮(zhèn)(60%)均未達(dá)到國(guó)家農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定≥70%的標(biāo)準(zhǔn)要求。

表2 4個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)羊小反芻獸疫免疫抗體合格率

2.3 不同時(shí)間羊小反芻獸疫免疫抗體檢測(cè)結(jié)果從表3可見：我縣3年來小反芻獸疫免疫抗體平均合格率均在70%以上，2019年上下半年相差不大，2017—2018上下半年相差較大。

表3 不同時(shí)間羊小反芻獸疫免疫抗體合格率

3 討論

3.1通過對(duì)鎮(zhèn)遠(yuǎn)縣4個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)2017—2019年羊小反芻獸疫抗體持續(xù)監(jiān)測(cè)，總體抗體合格率達(dá)82%，高于國(guó)家農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定≥70%的標(biāo)準(zhǔn)要求，群體保護(hù)率效果較好，其中規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)小反芻獸疫的免疫效果要高于散養(yǎng)戶。本次由于劃分規(guī)模場(chǎng)(≥100只)起點(diǎn)較高，為了更科學(xué)地評(píng)估免疫效果，今后調(diào)查工作中應(yīng)該更加細(xì)化(將30只以上100只以下的小型養(yǎng)殖場(chǎng)劃為一檔)，另外要增加散養(yǎng)戶的采樣量，使免疫效果評(píng)估更加規(guī)范。

3.2全縣4個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)小反芻獸疫的抗體合格率相差較大，經(jīng)調(diào)查發(fā)現(xiàn)：都坪鎮(zhèn)和江古鎮(zhèn)樣品主要來自散養(yǎng)戶，羊坪鎮(zhèn)和青溪鎮(zhèn)樣品主要來自規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)。分析散養(yǎng)戶免疫效果較差的原因：一是疫苗質(zhì)量方面，我縣大多數(shù)村級(jí)動(dòng)物防疫員無冷藏設(shè)備，運(yùn)輸、儲(chǔ)藏對(duì)疫苗質(zhì)量和效價(jià)影響較大；二是防疫員責(zé)任心不強(qiáng)、技術(shù)落后影響免疫效果；三是養(yǎng)殖環(huán)境和飼養(yǎng)管理差。此外，2017—2018上下半年相差較大的原因也與此有關(guān)。說明農(nóng)村散養(yǎng)戶的免疫接種仍然是薄弱環(huán)節(jié)，甚至一些散養(yǎng)戶認(rèn)為接種疫苗會(huì)影響羊的生產(chǎn)，對(duì)此較排斥。

4 加強(qiáng)防控建議

4.1 加強(qiáng)免疫對(duì)區(qū)域內(nèi)所有適齡羊進(jìn)行免疫，杜絕免疫空白。對(duì)抗體監(jiān)測(cè)不合格的養(yǎng)殖場(chǎng)(戶)應(yīng)及時(shí)進(jìn)行補(bǔ)免工作。

4.2 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理科學(xué)飼養(yǎng)管理，定期對(duì)圈舍及周邊環(huán)境進(jìn)行消毒，加強(qiáng)羊群的營(yíng)養(yǎng)，定期驅(qū)蟲，以提高羊群抵抗力。

4.3 加強(qiáng)宣傳教育和培訓(xùn)通過發(fā)放宣傳單、掛圖、小冊(cè)子等方式對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)特別是散養(yǎng)戶進(jìn)行防疫宣傳，使其了解疫病的危害性和防疫的重要性，提高養(yǎng)殖從業(yè)人員的生物安全意識(shí)。此外，還要加強(qiáng)對(duì)基層獸醫(yī)人員在疫苗接種、采樣、疫病診治及自身防護(hù)方面的技術(shù)培訓(xùn)，提高疫病防控水平和專業(yè)技能。