健兒粉水提工藝研究

李錦　王鑫媛　張璐　劉京　馬軍

摘 要

目的：優(yōu)化健兒粉中總皂苷的水提工藝。方法：以料液比、提取次數(shù)、提取時間為考察因素，以總皂苷含量為評價指標(biāo)，采用正交試驗法優(yōu)化提取工藝。結(jié)果：最佳水提工藝為料液比1∶8，提取次數(shù)3次，提取時間90min。結(jié)論：優(yōu)選的提取工藝操作簡單、成本低廉，易于工業(yè)化生產(chǎn)。

關(guān)鍵詞

健兒粉;總皂苷：水提工藝;正交試驗

中圖分類號： TQ461 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼： A

DOI：10.19694/j.cnki.issn2095-2457 . 2020 . 06 . 68

健兒粉是由山藥、茯苓、山楂、炒麥芽、白扁豆、蓮子、薏苡仁、雞內(nèi)金、陳皮九味藥食同源藥材組方經(jīng)水提取后通過噴霧干燥制得的提取物，具有補氣健脾，滲濕止瀉之功效，適宜兒童脾虛所致食積、腹脹、泄瀉等證。

皂苷（saponin）又稱皂素或皂甙，是苷元為三萜或螺旋甾烷類化合物的一類糖苷，具有抗氧化、抗菌、抗癌以及調(diào)節(jié)腸道菌群等有價值的生物活性[1-5]，主要分布于陸地高等植物中，也少量存在于海星和海參等海洋生物中，山藥、茯苓、白扁豆等均含有皂苷成分。為了更好地控制其質(zhì)量，為制備工藝提供科學(xué)性依據(jù)，本文以總皂苷含量為指標(biāo)，采用正交試驗法對水提工藝進行系統(tǒng)考察，以篩選出最佳提取工藝條件。

1 儀器與試藥

紫外可見分光光度計（PE Lambda 25）;賽多利斯224-1CN電子天平;泰斯特98-1-B調(diào)溫電熱套;DK-S26電熱恒溫水浴鍋;玻璃層析柱（200mm*30mm）;人參皂苷Re標(biāo)準(zhǔn)品（批號110754-201827，供含量測定用，購自中國食品藥品檢定研究院）;Amberlite-XAD-2大孔吸附樹脂D101（BR，上海伊卡生物技術(shù)有限公司）;無水乙醇（AR，天津歐博凱化工有限公司）;中性氧化鋁（AR，100-200目，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司）;Amberlite-XAD-2大孔樹脂（BR，上海伊卡生物技術(shù)有限公司）;香草醛（AR，天津市永大化學(xué)試劑有限公司）;冰乙酸（AR，天津市永大化學(xué)試劑有限公司）;高氯酸（AR，天津鑫源化工有限公司）;處方藥材（河北蘭氏盛泰藥業(yè)有限公司）

2 方法與結(jié)果

2.1 正交試驗設(shè)計

選取提取次數(shù)（A）、提取時間（B）、料液比（C）為考察因素，（D）設(shè)為空列，以總皂苷含量為指標(biāo)，選用L9 （34）正交試驗設(shè)計表，進行優(yōu)化試驗以確定最佳水提工藝條件。

2.2 試驗方法

2.2.1 試樣處理

按照健兒粉水提工藝正交試驗設(shè)計因素水平表對健兒藥粉處方內(nèi)的藥材進行水提，將提取好的溶液濃縮、過濾并定容至500mL，吸取定容搖勻后的試樣1.0mL（假如濃度高、或顏色深，需稀釋一定體積后再取1.0mL）進行柱層析[12]。

2.2.2 柱層析

玻璃層析柱內(nèi)裝Amberlite-XAD-2大孔樹脂，上加1cm中性氧化鋁。先用25mL70%乙醇洗柱，棄去洗脫液，再用25mL水洗柱，棄去洗脫液，精確加入1.0mL已處理好的試樣溶液（見2.2.1），用25mL水洗柱，棄去洗脫液，用25mL70%乙醇洗脫人參皂苷，收集洗脫液于稱量瓶中，置于60℃水浴揮干，以此作顯色用。

2.2.3 顯色

向上述已揮干的稱量瓶中準(zhǔn)確加入0.2mL 5%香草醛冰乙酸溶液，轉(zhuǎn)動稱量瓶，使殘渣都溶解，再加入0.8mL高氯酸，混勻后置于60℃水浴加熱10min，取出，冰浴冷卻后，準(zhǔn)確加入冰乙酸5.0mL，搖勻后，以1cm比色池于560nm波長處與標(biāo)準(zhǔn)管一起進行比色測定。

2.2.4 標(biāo)準(zhǔn)管

玻璃層析柱內(nèi)裝Amberlite-XAD-2大孔樹脂，上加1cm中性氧化鋁。先用25mL 70%乙醇洗柱，棄去洗脫液，再用25mL水洗柱，棄去洗脫液，精確加入100μL人參皂苷Re標(biāo)準(zhǔn)溶液，用25mL水洗柱，棄去洗脫液，用25mL 70%乙醇洗脫人參皂苷，收集洗脫液于稱量瓶中，與試樣一起置于60℃水浴揮干，以此作顯色用。

2.2.5 計算

2.3 結(jié)果

2.3.1 正交試驗結(jié)果

對總皂苷含量的影響結(jié)果見表2、表3。

由表2及表3可知，A因素（提取次數(shù)）對結(jié)果影響顯著（p<0.05），B因素（提取時間）、C因素（料液比）對結(jié)果影響不顯著（p>0.05），三個因素對總皂苷含量影響的主次順序為：A>B>C，即：提取次數(shù)>提取時間>料液比。由此得出的最佳水提工藝參數(shù)為：A3B3C2，即：提取次數(shù)3次，提取時間120min，料液比1∶8。為驗證工藝條件的穩(wěn)定性，結(jié)合實際生產(chǎn)成本及可能存在的試驗誤差，暫定水提工藝參數(shù)為A3B2C2，即：提取次數(shù)3次，提取時間90min，料液比1∶8。

2.3.2 驗證試驗

分別按照最佳工藝A3B3C2的組合條件和選定工藝A3B2C2的組合條件進行驗證試驗，重復(fù)三次，驗證試驗結(jié)果見表4。

由表4驗證試驗結(jié)果表明，最佳工藝和選定工藝的總皂苷含量差距較小，而選定的工藝提取時間較短，節(jié)約能源，有利于降低成本，減少損耗，故采用選定工藝。

3 討論

該組方是由山藥、茯苓、山楂、炒麥芽、白扁豆、蓮子、薏苡仁、雞內(nèi)金、陳皮九味藥食同源藥材組成。方中山藥甘平為君，益氣健脾[13]。茯苓、薏苡仁為臣，健脾補中，滲濕止瀉。白扁豆甘溫補脾有健脾養(yǎng)胃之功，蓮子可補益脾氣，澀腸止瀉[17]，兩者佐助君臣使脾氣健運，泄瀉得止。山楂擅長消肉食積滯所致的脘腹脹滿、噯氣吞酸、腹痛泄瀉;炒麥芽可行氣消食，健脾開胃，三者合用，可消各種飲食積滯，再以陳皮行氣化滯以配合，使全方補而不滯，改善腹脹癥狀。縱觀全方，以補氣健脾為主，消補兼施，補重于消，藥味多以甘平為主，藥量輕，藥性平和，適宜兒童脾虛所致食積、消化不良、腹脹腹瀉，或體力下降，具有健脾消食，滲濕止瀉之功效。本文通過試驗優(yōu)選出最佳提取工藝，本工藝中所用提取溶劑廉價易得，應(yīng)用廣泛，且工藝方法簡便，實用性強，以期為工業(yè)化生產(chǎn)提供理論依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1] Kim Wei Chan， Nicholas M H ， Khong， et al. Isolation and antioxidative properties of phenolics-saponins rich fraction from defatted rice bran[J].Journal of Cereal Science，2013，57（3）：480-485.

[2] Hassan S M ， Haq A U， Byrd J A， et al. Haemolytic and antimicrobial activities of saponin-rich extracts from guar meal[J].Food Chemistry，2009，119（2）：600-605.

[3] 王領(lǐng)，倪敏，江濱.人參皂苷抗結(jié)直腸癌作用機制的研究進展[J].中國腫瘤外科雜志，2019，11（05）：370-373.

[4] 劉艷艷，張凱，關(guān)家偉，等.人參皂苷對BALB/c小鼠腸道菌群的影響[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進展，2015，15（06）：1041-1045.

[5] 黃生輝，李妍怡，金華，等.中藥有效成分皂苷對腸道微生態(tài)免疫相關(guān)作用研究進展[J].中華中醫(yī)藥雜志，2017，32（08）：3606-3609.