超高效液相色譜法測定生遠志及其炮制品中遠志皂苷B的含量

郭 健

（白城醫(yī)學高等?？茖W校，吉林 白城 137000）

在臨床上遠志藥品具有消腫安神的功效，成分主要是皂苷類、黃酮類等，其中遠志的皂苷包括多種原型皂苷，例如：遠志皂苷A、遠志皂苷B等。近代研究指出，皂苷成分是遠志發(fā)揮鎮(zhèn)靜安神等作用的主要原因，進過實驗室的不懈研究發(fā)現(xiàn)遠志藥材中遠志皂苷B能發(fā)揮出鎮(zhèn)靜催眠的作用。目前在對遠志皂苷成分的測定時，主要是依靠遠志皂苷的水解產(chǎn)物細葉遠志皂苷作為檢測指標，但使用這種方法并不能精確的測定出遠志藥材中遠志皂苷B的準確含量，所以本次試驗使用超高效液相色譜法測定生遠志及其炮制品中遠志皂苷B的含量，并對多種遠志藥材的炮制品進行實驗，完善遠志藥品和其炮制品的質量指標。

1 資料與方法

1.1 資料數(shù)據(jù)：本次試驗使用Agilent1100型超高效液相色譜儀對遠志藥品中遠志皂苷B的含量進行測定；使用梅特勒多利多公司所生產(chǎn)的電子天平和賽多利斯公司所生產(chǎn)的電子天平進行稱量；使用上海利導超聲儀公司生產(chǎn)的SK250SP超聲儀進行測定。本次試驗選用成都普斯生物科技公司所提供的98%純度的遠志皂苷B作為對照品進行實驗，使用不同產(chǎn)地所生產(chǎn)的遠志進行實驗。

1.2 方法：使用市面上常規(guī)炮制遠志的方法進行遠志的炮制。①炒遠志：將遠志在熱鍋中使用中火進行翻炒，將遠志的表面炒成金黃色后取出。②蜂蜜灸遠志：取少許煉蜜，加入一定量的開水進行稀釋，然后將其澆在遠志上，使用文火炒遠志，使遠志把煉蜜吸收，炒至遠志不粘手且顏色深黃有斑即可，比例為10 kg遠志2 kg煉蜜。③酒灸遠志：將遠志洗凈，把酒和遠志同時放入鍋內(nèi)進行燉煮，就被遠志吸收后就可以將遠志取出放置在陰涼干燥的地方風干，比例為10 kg遠志3 kg酒。④甘草汁炒遠志：洗凈甘草、遠志，同時置于鍋內(nèi)加水煮湯，使用文火煮湯，直至遠志將鍋內(nèi)湯汁全部吸收為止，?；鸷髮⑦h志取出放置在陰涼干燥的地方風干，比例為10 kg遠志6 kg甘草汁[1]。

1.2.1 溶液制備：首先制備對照的儲備溶液，將98%含量的遠志皂苷B進行測量稱定，加入70%的甲醇進行制備；然后制備實驗用的遠志溶液，使用60目的篩網(wǎng)篩取1 g遠志，將其放置在錐形瓶中加入50%的甲醇進行重量測定，使用超聲波進行處理后進行稱定，使用甲醇溶液補齊缺失的部分，使用微孔濾膜進行過濾皆可以得到。

1.2.2 進行溶液的重復性測試：選擇一個產(chǎn)地的遠志粉末進行分析研究，首先進行精密選取6份每份1 g的遠志粉末，使用“1.2”的項下方法進行制備，制成試驗品溶液后進行測定，對遠志皂苷的色譜峰值進行計算，如果實驗結果為2.26%就證明超高效液相色譜法測定的重復性良好。

1.2.3 進行穩(wěn)定性測試，使用儀器對實驗溶液進行取樣，在第0、2、4、6、8、10、12 h分別進行測定，如果測定結果中遠志皂苷的B峰面積的RSD都為1.64%證明試驗品中的遠志皂苷B溶液在12 h之內(nèi)是穩(wěn)定的[2]。

1.3 評價指標：根據(jù)對照的遠志及遠志炮制品的含量進行測定，實驗超高效液相色譜法測定生遠志及其炮制品中遠志皂苷B的含量的相關方法。

1.4 統(tǒng)計學方法：使用SPSS20.0的統(tǒng)計學方法對數(shù)據(jù)進行分析研究，進行t或卡方檢驗，P＜0.05，有統(tǒng)計學意義。

2 結果

對實驗組遠志樣品含量進行測定：將購買的遠志樣品和遠志的炮制品進行精密取樣，取樣1 g左右，使用“1.2.1”項下方法制備溶液，在“1.2”色譜條件下進行測定。計算所有樣品中遠志皂苷B的含量，見表1。

在遠志的炮制品中蜂蜜灸遠志中遠志皂苷B的含量較少，別的遠志種類的差別不大。蜂蜜灸遠志是現(xiàn)代臨床中常用的遠志藥物之一，蜂蜜灸遠志對患者的腸胃功能影響較小，其毒性也較小，這可能與蜂蜜灸遠志的遠志皂苷B含量較少的因素有關，通過本次實驗可得超高效液相色譜法可以測定生遠志及其炮制品中遠志皂苷B的含量。

表1 購買的生遠志以及炮制遠志的遠志皂苷B的含量

3 討論

在臨床中遠志一般起著安神益智的作用，但遠志存在著明顯的消化道毒性，會給患者的腸道系統(tǒng)造成破壞。通過本次試驗證明，遠志皂苷B既能起到安神益智、鎮(zhèn)咳祛痰的作用也會給患者的消化系統(tǒng)造成一定的破壞，所以對遠志藥物中遠志皂苷B的含量進行控制是很有必要的[3]。本次試驗選擇了4種來自不同地區(qū)的遠志，測定其遠志皂苷B的含量，通過使用超高效液相色譜法進行測定可得遠志中遠志皂苷含量在1.56%～2.12%，河北產(chǎn)的遠志皂苷B的含量最多。剩余產(chǎn)地的遠志中遠志皂苷含量的差異不大。通過本次試驗，發(fā)現(xiàn)在蜂蜜灸遠志的遠志皂苷B的含量最少，這與蜂蜜灸遠志的毒性較小有很大的相關性，別的炮制方法對遠志中遠志皂苷B含量的影響不大，但對遠志皂苷中別的成分還需要繼續(xù)研究，而經(jīng)過試驗可以看出超高效液相色譜法可以有效測定生遠志及其炮制品中遠志皂苷B的含量[4-5]。