近冰溫貯藏對杏果實(shí)冷害及活性氧代謝的影響

李亞玲，崔寬波，石 玲，祝兆帥，李 玲，劉 嚴(yán)，朱 璇,*

（1.新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)食品科學(xué)與藥學(xué)學(xué)院，新疆 烏魯木齊 830052；2.新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)機(jī)械化研究所，新疆 烏魯木齊 830091）

杏（Prunus armeniaca L.）為杏屬，在新疆林果業(yè)中占據(jù)重要的地位[1]。據(jù)2017年數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，全疆杏樹栽培總面積達(dá)12萬 公頃，產(chǎn)量為115萬 t，占新疆水果總產(chǎn)量的11.37%[2]。杏果實(shí)屬于呼吸躍變型果實(shí)，且采收季節(jié)較為集中，多為高溫季節(jié)，采后在常溫下放置會(huì)迅速后熟衰老，導(dǎo)致果實(shí)出現(xiàn)嚴(yán)重的腐爛[3]。低溫貯藏可有效抑制杏果實(shí)采后品質(zhì)下降和腐爛變質(zhì)，由于杏果實(shí)屬于冷敏性果實(shí)，在不適宜的低溫下貯藏，容易導(dǎo)致冷害的發(fā)生[4]。冷害癥狀一般是從低溫環(huán)境被轉(zhuǎn)移到溫暖的環(huán)境下才易被發(fā)現(xiàn)，果實(shí)受到冷害后又易被病原微生物所浸染，其貯藏品質(zhì)及商品價(jià)值將會(huì)受到嚴(yán)重的影響[5]。因此，控制杏果實(shí)采后貯藏冷害的發(fā)生，尋求簡單、高效的貯藏保鮮技術(shù)己成為杏貯運(yùn)產(chǎn)業(yè)中亟需解決的問題。

近冰溫貯藏是指將果蔬貯藏在其冰點(diǎn)以上、0 ℃以下溫度范圍內(nèi)的一種非凍結(jié)保鮮技術(shù)[6]。當(dāng)果蔬貯藏在其冰點(diǎn)附近時(shí)，果蔬內(nèi)部細(xì)胞組織不會(huì)被破壞，且呼吸代謝作用可被降至最低限度，能最大程度地抑制果蔬的生命活動(dòng)，從而維持其貯藏品質(zhì)，延長貯藏期，是一種安全、綠色的保鮮技術(shù)[7-8]。研究表明，近冰溫貯藏可最大程度地延緩藍(lán)莓[9-10]、冬棗[11]、油桃[12]營養(yǎng)成分的損失，抑制果實(shí)采后褐變的發(fā)生，較好地保持其品質(zhì)，延長貯藏期。近冰溫貯藏條件下的小白杏[13]、櫻桃[14]的腐爛率也明顯受到抑制。近冰溫貯藏還能有效提高吊干杏[15]、黃花梨[16]、西蘭花[17]、櫻桃[18]等果蔬的抗氧化能力和抗冷性，但抗冷性機(jī)理需要進(jìn)一步研究。本實(shí)驗(yàn)以新疆庫車小白杏為試材，研究近冰溫貯藏對采后杏果實(shí)冷害及活性氧的影響，為杏果實(shí)近冰溫貯藏保鮮技術(shù)提供理論參考和實(shí)踐依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

小白杏于2018年6月27日購自新疆烏魯木齊市九鼎農(nóng)貿(mào)市場，選取無損傷、色澤大小勻稱、成熟度（硬度為（8.3±0.1）kg/cm2、可溶性固形物質(zhì)量分?jǐn)?shù)為（13.3±0.2）%）相近的果實(shí)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

乙二胺四乙酸、聚乙烯吡咯烷酮、鹽酸羥胺、對氨基苯磺酸、α-萘胺、冰醋酸、濃氨水、硫酸、四氯化鈦、硫代巴比妥酸、鹽酸、丙酮、氮藍(lán)四唑、三氯乙酸、無水醋酸鈉、愈創(chuàng)木酚等試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器與設(shè)備

SHB-III循環(huán)水式多用真空泵 鄭州長城科工貿(mào)有限公司；DDS-307型電導(dǎo)率儀 上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司；RC-4溫度記錄儀 江蘇省精創(chuàng)電氣股份有限公司；FE22-Meter pH計(jì)、AL204-IC電子分析天平梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司；DZKW-S-6電熱恒溫水浴鍋 北京市永光明醫(yī)療儀器廠；3H16RI智能高速冷凍離心機(jī) 湖南赫西儀器裝備有限公司；UV-1700型紫外-可見分光光度計(jì) 上海美析儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 原料處理

分級挑選后的果實(shí)，放置在（5±1）℃的環(huán)境下預(yù)冷24 h。果實(shí)共分為3 組，每組重復(fù)3 次，每個(gè)重復(fù)4 kg，入庫之前用厚度為0.03 mm的聚乙烯袋進(jìn)行包裝。分別放入近冰溫（－1.5～－1.0 ℃）、冷藏（1～2、4～6 ℃）下進(jìn)行貯藏。以冷藏作為對照，冷藏期間每隔7 d取樣測定相關(guān)指標(biāo)。

1.3.2 指標(biāo)測定

1.3.2.1 杏果實(shí)冰點(diǎn)的測定

參照崔寬波等[13]的方法，使用RC-4溫度記錄儀，將記錄儀的金屬探頭完全刺入果實(shí)中心部位，將果實(shí)放入－18 ℃的冷凍庫中，記錄儀檢測果實(shí)內(nèi)溫度波動(dòng)，每10 s自動(dòng)記錄一次溫度變化，待果實(shí)完全凍結(jié)后將RC-4溫度記錄儀中的數(shù)據(jù)導(dǎo)入計(jì)算機(jī)中，根據(jù)溫度曲線確定果實(shí)冰點(diǎn)溫度。

1.3.2.2 冷害指數(shù)的測定

果實(shí)冷害主要表現(xiàn)為表面出現(xiàn)水浸狀斑、凹陷、皺縮等現(xiàn)象。因此，以水浸狀斑、表面皺縮來界定冷害程度。參照Dong Li等[19]的方法并稍加改進(jìn)，將冷害面積分為5級：0級，無冷害發(fā)生；1級，冷害發(fā)生面積5%～15%；2級，冷害發(fā)生面積在15%～25%之間；3級，冷害發(fā)生面積25%～50%；4 級，冷害面積50%～75%；5級，冷害面積不小于75%。按公式（1）計(jì)算冷害指數(shù)。

1.3.2.3 冷害發(fā)病率的測定

以單個(gè)果實(shí)表面出現(xiàn)冷害程度達(dá)1級以上記為發(fā)病果，統(tǒng)計(jì)發(fā)病果數(shù)占總果數(shù)的比例。按公式（2）計(jì)算冷害發(fā)病率。

1.3.2.4 過氧化氫酶活力的測定

過氧化氫酶（catalase，CAT）活力的測定參照曹建康等[20]的方法，采用比色法進(jìn)行測定，以每分鐘每克鮮質(zhì)量杏果實(shí)在240 nm波長處吸光度變化0.01為1 個(gè)CAT活力單位（U），結(jié)果以U/g表示。

1.3.2.5 H2O2含量的測定

H2O2含量參照Zhou Biyan等[21]的方法進(jìn)行測定。

1.3.2.6 超氧化物歧化酶活力的測定

超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活力的測定采用氮藍(lán)四唑法[22]，以每分鐘每克鮮質(zhì)量果蔬組織的反應(yīng)體系抑制氮藍(lán)四唑光化還原反應(yīng)50%時(shí)為一個(gè)SOD活力單位（U），結(jié)果以U/g表示。

1.3.2.7 超氧陰離子自由基產(chǎn)生速率的測定

超氧陰離子自由基（O2－·）產(chǎn)生速率參照Lin Yifen等[23]的方法測定。以每分鐘每克鮮質(zhì)量果蔬組織產(chǎn)生的O2－·物質(zhì)的量作為其產(chǎn)生速率，單位為nmol/（min·g）。

1.3.2.8 過氧化物酶活力的測定

過氧化物酶（peroxidase，POD）活力用愈創(chuàng)木酚氧化法[20]測定。以每克鮮質(zhì)量果蔬樣品在470 nm波長處吸光度每分鐘增加1時(shí)為1 個(gè)POD活力單位（U），POD活力記為U/g。

1.3.2.9 丙二醛含量的測定

丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量參照Kang Ruoyi等[24]的方法測定，單位為nmol/g，結(jié)果以鮮質(zhì)量計(jì)。

1.3.2.10 細(xì)胞膜透性的測定

細(xì)胞膜透性的測定參照曹建康等[20]的方法，采用電導(dǎo)率法，單位用%表示。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

采用SPSS 20.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，并用鄧肯氏多重比較進(jìn)行差異分析，P＜0.05表示差異顯著，作圖采用Origin 8.5軟件。

2 結(jié)果與分析

2.1 杏果實(shí)冰點(diǎn)

圖1 杏果實(shí)冰點(diǎn)曲線Fig. 1 Freezing curves of apricot fruit

果實(shí)中含有可溶性糖、礦物質(zhì)、有機(jī)酸等物質(zhì)，使果實(shí)實(shí)際冰點(diǎn)溫度低于0 ℃，確定果實(shí)冰點(diǎn)溫度是進(jìn)行近冰溫貯藏的重要基礎(chǔ)。由圖1可知，將果實(shí)放入冷凍庫后杏果實(shí)的溫度隨時(shí)間的延長迅速下降直至過冷點(diǎn)（－3.2 ℃）開始出現(xiàn)凍結(jié)現(xiàn)象，此時(shí)果實(shí)將會(huì)釋放出潛熱，使溫度迅速回升，一段時(shí)間內(nèi)溫度不發(fā)生變化，此溫度為杏果實(shí)生物結(jié)冰點(diǎn)（－2 ℃）。而庫體溫度不穩(wěn)定時(shí)，易造成果實(shí)凍害，本冷庫溫差波動(dòng)在0.3 ℃以內(nèi)，為防止凍害現(xiàn)象的發(fā)生，本實(shí)驗(yàn)以－1.5～－1.0 ℃為杏果實(shí)近冰溫貯藏溫度。

2.2 近冰溫貯藏對杏果實(shí)冷害發(fā)病率的影響

圖2 不同貯藏溫度對杏果實(shí)冷害發(fā)病率的影響Fig. 2 Effects of storage temperatures on chilling injury incidence of apricot fruit

由圖2可知，近冰溫貯藏組冷害發(fā)生時(shí)間分別比4～6 ℃和1～2 ℃貯藏組推遲了21 d和7 d，并且冷害發(fā)病率也顯著低于4～6 ℃和1～2 ℃貯藏組。在冷藏期間，冷害發(fā)病率隨貯藏時(shí)間的延長不斷上升，果實(shí)表面也出現(xiàn)不同程度大小的凹陷和水浸斑等現(xiàn)象。4～6 ℃貯藏組在冷藏前期發(fā)病并不明顯，而在21 d時(shí)冷害發(fā)病率迅速上升，在49 d時(shí)冷害發(fā)病率已達(dá)到40.70%。1～2 ℃貯藏組則在28 d發(fā)生冷害，比4～6 ℃貯藏組推遲了14 d發(fā)生。冷藏第49天時(shí)，1～2 ℃貯藏組冷害發(fā)病率為31.30%，而近冰溫貯藏的杏果實(shí)冷害發(fā)病率為16.50%。比4～6 ℃和1～2 ℃貯藏組分別低59.46%和47.28%（P＜0.05）。說明近冰溫貯藏可明顯抑制杏果實(shí)冷害發(fā)病率的升高并有效推遲冷害發(fā)病時(shí)間。

2.3 近冰溫貯藏對杏果實(shí)冷害指數(shù)的影響

圖3 不同貯藏溫度對杏果實(shí)冷害指數(shù)的影響Fig. 3 Effects of storage temperatures on chilling injury index of apricot fruit

冷害是造成果實(shí)采后冷藏品質(zhì)下降的重要原因之一。由圖3可知，4～6 ℃和1～2 ℃貯藏的杏果實(shí)分別在14 d和28 d時(shí)出現(xiàn)冷害癥狀，而近冰溫貯藏的杏果實(shí)推遲到35 d才發(fā)生冷害癥狀。冷藏期間，隨貯藏時(shí)間的延長，冷害指數(shù)不斷上升，但近冰溫貯藏下的杏果實(shí)冷害指數(shù)始終低于4～6 ℃和1～2 ℃貯藏組。冷藏第49天時(shí)，4～6 ℃和1～2 ℃貯藏的杏果實(shí)冷害指數(shù)分別為0.47和0.36，而近冰溫貯藏的杏果實(shí)為0.18，分別比4～6 ℃和1～2 ℃貯藏的果實(shí)冷害指數(shù)低61.70%和50.00%（P＜0.05）。說明近冰溫貯藏與普通冷藏相比可較好地控制杏果實(shí)冷害指數(shù)的上升。

2.4 近冰溫貯藏對杏果實(shí)冷藏期間H2O2含量的影響

圖4 不同貯藏溫度對杏果實(shí)HH2O2含量的影響Fig. 4 Effects of storage temperature on H2O2 content of apricot fruit

H2O2是植物體內(nèi)活性氧的一種，當(dāng)活性氧清除系統(tǒng)代謝不平衡時(shí)，H2O2將會(huì)大量累積攻擊膜系統(tǒng)使細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)受到破壞。由圖4可知，冷藏0～14 d時(shí)，近冰溫貯藏與1～2 ℃下冷藏的杏果實(shí)H2O2含量無顯著差異。冷藏21 d后，各組H2O2含量緩慢上升，但近冰溫貯藏的杏果實(shí)H2O2含量始終低于4～6 ℃和1～2 ℃貯藏組。在冷藏第49天時(shí)，4～6 ℃和1～2 ℃貯藏組杏果實(shí)的H2O2含量分別為20.62 μmol/g和15.93 μmol/g，比近冰溫貯藏組（12.86 μmol/g）分別高60.34%（P＜0.05）和23.87%（P＜0.05）。說明近冰溫貯藏可抑制H2O2含量的升高，從而降低對杏果實(shí)細(xì)胞組織的損傷。

2.5 近冰溫貯藏對杏果實(shí)冷藏期間CAT活力的影響

圖5 不同貯藏溫度對杏果實(shí)CAT活力的影響Fig. 5 Effects of storage temperature on CAT activity of apricot fruit

CAT是清除活性氧的主要酶類，可將果實(shí)體內(nèi)過多累積的H2O2分解，使H2O2含量維持在較低水平，進(jìn)而減輕對細(xì)胞組織的毒害。由圖5可知，在冷藏初期各組CAT活力均呈緩慢上升趨勢，但冷藏28 d后，4～6 ℃和1～2 ℃的CAT活力開始持續(xù)下降，且35 d時(shí)，4～6 ℃貯藏組比近冰溫貯藏的杏果實(shí)CAT活力低13.95%（P＜0.05），并且在整個(gè)冷藏期間近冰溫貯藏的杏果實(shí)CAT活力始終高于4～6 ℃和1～2 ℃貯藏組。冷藏第42天時(shí)，近冰溫貯藏的杏果實(shí)CAT活力分別比4～6 ℃和1～2 ℃貯藏組高1.0 倍和38.15%（P＜0.05），說明近冰溫貯藏能夠較好地延緩杏果實(shí)CAT活力的下降。

2.6 近冰溫貯藏對杏果實(shí)冷藏期間O2—·產(chǎn)生速率的影響

圖6 不同貯藏溫度對杏果實(shí)·產(chǎn)生速率的影響Fig. 6 Effects of storage temperature on · production rate of apricot fruit

2.7 近冰溫貯藏對杏果實(shí)冷藏期間SOD活力的影響

圖7 不同貯藏溫度對杏果實(shí)SOD活力的影響Fig. 7 Effects of storage temperature on SOD activity of apricot fruit

SOD是植物細(xì)胞組織中較為重要的抗氧化酶類，與POD、CAT、APX等相互協(xié)同清除活性氧，使果實(shí)采后耐貯性增強(qiáng)。由圖7可知，各組杏果實(shí)SOD活力均呈先上升后下降的趨勢，冷藏第28天時(shí)各組SOD活力均達(dá)到最高峰，此時(shí)近冰溫貯藏的杏果實(shí)為0.87 U/g，分別比4～6 ℃（0.74 U/g）和1～2 ℃（0.76 U/g）貯藏組杏果實(shí)的SOD活力高17.57%（P＜0.05）和14.47%（P＜0.05）。并且在冷藏期間近冰溫貯藏的杏果實(shí)SOD活力始終高于4～6 ℃和1～2 ℃貯藏組，且在冷藏結(jié)束時(shí)仍能保持較高活力。說明杏果實(shí)在近冰溫環(huán)境下貯藏可顯著提高SOD的活力。

2.8 近冰溫貯藏對杏果實(shí)冷藏期間POD活力的影響

圖8 不同貯藏溫度對杏果實(shí)POD活力的影響Fig. 8 Effects of storage temperature on POD activity of apricot fruit

POD是植物體內(nèi)存在的主要氧化還原酶類，其作用是清除H2O2，減輕對細(xì)胞組織的傷害，維持細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。由圖8可知，冷藏前期，各組杏果實(shí)POD活力逐漸上升，4～6 ℃和1～2 ℃均在14 d到達(dá)高峰，隨后緩慢下降；而近冰溫貯藏組則在21 d達(dá)到高峰，且POD的活力始終高于4～6 ℃和1～2 ℃貯藏組。在冷藏第49天時(shí)，近冰溫貯藏的杏果實(shí)POD活力為0.72 U/g，分別比4～6 ℃（0.56 U/g）和1～2 ℃（0.65 U/g）貯藏的杏果實(shí)POD活力高28.57%（P＜0.05）和10.77%%（P＜0.05）。說明近冰溫貯藏顯著延緩了POD活力的降低，使杏果實(shí)在冷藏結(jié)束時(shí)仍保持較高的POD活力。

2.9 近冰溫貯藏對杏果實(shí)冷藏期間MDA含量的影響

圖9 不同貯藏溫度對杏果實(shí)MDA含量的影響Fig. 9 Effects of storage temperature on MDA content of apricot fruit

MDA是膜脂過氧化的主要產(chǎn)物，影響膜的結(jié)構(gòu)和擾亂正常生理代謝。由圖9可知，杏果實(shí)MDA含量在貯藏過程中呈逐漸上升趨勢。冷藏前期，近冰溫貯藏的杏果實(shí)MDA含量上升較為緩慢，在冷藏21 d后才顯著增長，而4～6 ℃和1～2 ℃貯藏組則在14 d后就持續(xù)上升。在冷藏期間，近冰溫貯藏的杏果實(shí)MDA含量始終低于4～6 ℃和1～2 ℃貯藏組。冷藏第49天時(shí)，而近冰溫貯藏的杏果實(shí)MDA含量為0.93 nmol/g，分別比4～6 ℃（1.26 nmol/g）和1～2 ℃（1.13 nmol/g）貯藏的杏果實(shí)MDA含量低26.19%（P＜0.05）和17.70%（P＜0.05）。說明近冰溫貯藏能顯著抑制杏果實(shí)冷藏期間MDA含量的增加，從而減輕對細(xì)胞膜的傷害，減少了冷害的發(fā)生。

2.1 0 近冰溫貯藏對杏果實(shí)冷藏期間細(xì)胞膜透性的影響

圖10 不同貯藏溫度對杏果實(shí)細(xì)胞膜透性的影響Fig. 10 Effects of storage temperature on membrane permeability of apricot fruit

細(xì)胞膜對植物的正常代謝及微環(huán)境的穩(wěn)定有著重要的意義，細(xì)胞膜透性可反映植物遭受冷害的程度[25]。由圖10可知，在冷藏期間杏果實(shí)的細(xì)胞膜透性呈上升趨勢，但近冰溫貯藏的杏果實(shí)細(xì)胞膜透性始終低于4～6 ℃和1～2 ℃組。冷藏0～21 d期間，近冰溫貯藏和1～2 ℃貯藏的杏果實(shí)細(xì)胞膜透性增加并不明顯，21 d后，1～2 ℃貯藏的杏果實(shí)細(xì)胞膜透性緩慢上升，而近冰溫貯藏組則在28 d后細(xì)胞膜透性才呈逐漸升高，4～6 ℃冷藏的杏果實(shí)細(xì)胞膜透性在14 d后已迅速上升。在冷藏第35天和第49天時(shí)，4～6 ℃冷藏下的杏果實(shí)細(xì)胞膜透性分別為54.11%和65.00%，分別比近冰溫貯藏的杏果實(shí)細(xì)胞膜透性高26.86%（P＜0.05）和29.72%（P＜0.05）。說明近冰溫貯藏可明顯抑制膜脂過氧化對細(xì)胞膜造成的損傷，保持細(xì)胞膜的完整性，提高杏果實(shí)的耐冷性。

3 討 論

貯藏溫度是影響果實(shí)貯藏品質(zhì)的重要因素之一。研究發(fā)現(xiàn)某些果蔬在其生物結(jié)冰點(diǎn)附近貯藏的效果明顯優(yōu)于0 ℃以上的溫度[26]。果蔬細(xì)胞內(nèi)的糖、有機(jī)酸、礦物質(zhì)等溶質(zhì)分子使果實(shí)實(shí)際冰點(diǎn)低于0 ℃，而細(xì)胞內(nèi)的高分子物質(zhì)以空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)存在，水分子擴(kuò)散受到了極大的阻礙，使果蔬產(chǎn)生回避凍結(jié)現(xiàn)象[8]。因此，果蔬可在0 ℃以下的近冰溫范圍內(nèi)貯藏，使細(xì)胞處于既不凍結(jié)也能保持活體狀態(tài)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，4～6 ℃和1～2 ℃下貯藏的杏果實(shí)分別在14 d和28 d呈現(xiàn)出不同大小的水浸狀斑和凹陷癥狀，而近冰溫貯藏（－1.5～－1.0 ℃）的杏果實(shí)49 d后僅出現(xiàn)少許果梗處皺縮，比4～6 ℃和1～2 ℃組分別推遲了21 d和7 d才發(fā)生冷害癥狀，且冷害指數(shù)和冷害發(fā)病率也明顯低于4～6 ℃和1～2 ℃組，這與Liu Bangdi等[27]在杏梅上的研究結(jié)果相似。有研究也發(fā)現(xiàn)，蜜桃在3～4 ℃下貯藏30 d后褐變率達(dá)到47.45%，同時(shí)發(fā)生嚴(yán)重的絮化，（0.0±0.5）℃貯藏40 d褐變嚴(yán)重并出現(xiàn)絮化，而近冰溫（－0.8 ℃）貯藏40 d基本未發(fā)生褐變和絮化，較好地保持了貯藏品質(zhì)[28]。劉東杰[29]研究也發(fā)現(xiàn)近冰溫貯藏可有效降低番茄的冷害指數(shù)和減輕青椒的冷害發(fā)病率。

低溫引起植物細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)受損是造成冷害的根本原因。在低溫逆境條件下，膜脂由液晶態(tài)轉(zhuǎn)變?yōu)槟z態(tài)，膜的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變，進(jìn)而引起一系列次級反應(yīng)，導(dǎo)致冷害的發(fā)生[30]。研究表明，果蔬冷害的發(fā)生與活性氧的代謝有著密切關(guān)系[31]。O2－·、H2O2是主要的活性氧，在低溫脅迫的條件下過多累積會(huì)使膜脂過氧化進(jìn)程加快，破壞細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)及功能，從而使果蔬表現(xiàn)出代謝失衡及膜透性增加，引起冷害的發(fā)生[32]。而果蔬在長期的進(jìn)化過程中形成了活性氧清除系統(tǒng)，CAT、SOD、POD是清除自由基的主要抗氧化酶類[33]。SOD、CAT和POD相互協(xié)調(diào)使活性氧維持在較低水平，以減少其對細(xì)胞膜的損傷[34]。適宜的近冰溫貯藏不僅可以抑制乙烯的產(chǎn)生和呼吸速率，而且果蔬在近冰溫條件下自由基清除系統(tǒng)仍具有較高活力，能有效地防止膜脂過氧化和MDA的積累，保護(hù)膜結(jié)構(gòu)不受損傷[8,26]。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與普通冷藏相比，在穩(wěn)定的近冰溫環(huán)境下貯藏能有效地促進(jìn)抗氧化酶SOD活力的增加，延緩CAT、POD活力的降低，并抑制H2O2和·的產(chǎn)生，說明近冰溫貯藏可誘導(dǎo)抗氧化酶活力，有效抑制自由基的累積。近冰溫貯藏條件下較高的抗氧化酶活力對減輕膜脂過氧化有積極的作用，能有效減緩杏果實(shí)MDA含量和膜透性的增加，維持細(xì)胞膜的穩(wěn)定，從而抑制杏果實(shí)貯藏期間冷害的發(fā)生。Zhao Handong等[18]對櫻桃的研究表明近冰溫（（－0.3±0.1）℃）貯藏可顯著提高抗氧化酶SOD、CAT、POD活力，并抑制H2O2和·的產(chǎn)生，維持果實(shí)細(xì)胞膜的穩(wěn)定，認(rèn)為櫻桃的抗氧化能力與冷害癥狀的發(fā)生呈負(fù)相關(guān)。對吊干杏（－1.7～－2.5 ℃）[15]、杏梅（（－1.7±0.2） ℃）[27]、金冠蘋果（（－1.7±0.2）℃）[35]、黃花梨（－1 ℃）[16]、生菜（（－0.5±0.2）℃）[36]的研究均表明近冰溫貯藏可保持較高的抗氧化能力，抑制H2O2和·的產(chǎn)生，減緩細(xì)胞膜透性和MDA含量的增加。近冰溫條件下冷害的減輕是由于抗氧化酶活性的增加可有效清除過多累積的活性氧自由基，從而減輕冷脅迫下造成的損傷，基于其復(fù)雜性，后續(xù)實(shí)驗(yàn)還需更進(jìn)一步研究完善相關(guān)理論。

4 結(jié) 論

本研究表明，近冰溫（－1.5～－1.0 ℃）貯藏與冷藏（4～6、1～2 ℃）相比，能推遲杏果實(shí)冷害發(fā)病時(shí)間并降低冷害發(fā)病率及冷害指數(shù)，還可誘導(dǎo)抗氧化酶SOD、CAT、POD保持較高活力，抑制活性氧H2O2和·的生成，并顯著減緩杏果實(shí)冷藏期間膜透性和MDA含量的增加。