血清IgE、EOS、LTB-4、硫化氫水平變化與小兒哮喘患兒病情的關(guān)系

秦小菀，惠曉霞，高偉霞

（1.南陽市中心醫(yī)院兒科急診，河南 南陽 473000；2.南陽市中心醫(yī)院PICU，河南 南陽 473000）

小兒哮喘是兒童常見的肺部疾病，是一種可逆性和阻塞性呼吸系統(tǒng)疾病，表現(xiàn)為復(fù)發(fā)性咳嗽、喘鳴和呼吸困難以及氣道高反應(yīng)性等現(xiàn)象[1]。該病起病或急或緩，年齡不同表現(xiàn)也會存在一定差異，嬰幼兒在哮喘癥狀出現(xiàn)前1～2天可能會出現(xiàn)鼻癢、打噴嚏、流鼻涕、擦鼻等表現(xiàn)，逐漸咳嗽，年齡較大的兒童通常會呈現(xiàn)突發(fā)性，通常從咳嗽開始，接著是喘鳴和呼吸困難[2]?，F(xiàn)今越來越多的學(xué)者認為細胞因子在哮喘的發(fā)病中具有十分重要的作用,同時硫化氫在慢性呼吸系統(tǒng)疾病中也具有重要的意義[3]。本文選取我院收治的哮喘患兒（哮喘組）及健康兒童（對照組），檢測并分析血清免疫球蛋白E（IgE）、白三烯B4（LTB4）、血漿內(nèi)源性硫化氫（H2S）、嗜酸性粒細胞計數(shù)（EOS）與患兒呼吸功能變化的關(guān)系，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取我院2015年1月至2017年12月收治的90例哮喘患兒(哮喘組)、60例健康兒童（對照組）。哮喘組，年齡 1～12 歲，平均（6.2±3.4）歲,男 50 例、女 40 例，體質(zhì)量（22.8±3.2）kg；其中急性發(fā)作期患兒55例、緩解期患兒35例。對照組，年齡 1～12 歲，平均（6.0±3.6）歲，男 33 例、女 27例，體質(zhì)量（23.0±2.5）kg。 兩組兒童年齡、性別、體重比較，差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

納入標(biāo)準：⑴哮喘患兒的診斷、分期標(biāo)準參考1998年全國兒科哮喘防治協(xié)作組 《兒科哮喘防治常規(guī)（試行）》版本中的標(biāo)準；⑵患兒年齡1～12歲；⑶對照組為健康體檢對象；⑷本研究獲得醫(yī)學(xué)倫理委員會的批準、患兒家長知情同意。

排除標(biāo)準：⑴肺部發(fā)育異常；⑵支氣管異物；⑶精神、認知功能障礙患者；⑷先心病患兒；⑸近2周使用抗生素、免疫調(diào)節(jié)劑、糖皮質(zhì)激素；⑹免疫系統(tǒng)疾病患兒。

1.2 血清IgE、LTB4、血漿H2S、EOS檢測方法 所有患兒在入院后第二天、急性期、緩解期（均為晨起空腹?fàn)顟B(tài)下）采集靜脈取血3ml，盛于離心管中，靜置促其凝固,離心，將所得的血清分別置于EP管中，取適量血清測定IgE、LTB4，均采用 ELISA法檢測，IgE抗體檢測試劑盒來自于深圳博卡生物科技有限公司，LTB4 ELISA檢測試劑盒廠家為上海仁捷生物科技有限公司,所有操作嚴格按照說明書進行。H2S測定取適量血漿（晨起空腹?fàn)顟B(tài)下靜脈取血3ml，置于專用抗凝管中，離心所得），然后加入反應(yīng)液SAOBII，兩者比例為1：1，最后用紫外分光光度計檢測混合物上清液中的的吸光度 （λ=420nm），標(biāo)準曲線采用不同濃度NaHS繪制，根據(jù)標(biāo)準曲線計算H2S含量。取少許血液制作血涂片2張，選一張染色，另一張用于復(fù)查比對，將血涂片自然晾干，然后用劉氏染液染色1min（生產(chǎn)廠家：BASO公司），然后用流水慢慢沖洗，用暖風(fēng)吹干，最后用顯微鏡的進行鏡檢。

1.3 MMEF、FEF50測定 MMEF、FEF50測定采用意大利COSMED PFT4型肺功能檢測儀，檢測前對患兒進行測試步驟指導(dǎo)，以方便后續(xù)操作，重復(fù)檢測三次，取MMEF、FEF50的三次平均值。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 統(tǒng)計學(xué)分析采用SPSS16.0，采用pp圖和qq圖分析數(shù)據(jù)的正態(tài)性，符合正態(tài)分布的計量數(shù)據(jù)表述采用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料采用χ2檢驗；相關(guān)性分析采用Pearson線性相關(guān)分析法；P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對象的血清IgE、LTB4、血漿H2S、EO S水平比較 哮喘組的血清IgE、LTB4、EOS高于對照組（P<0.05），哮喘組的血漿H2S低于對照組（P<0.05）；見表 1。

表1 兩組研究對象的血清IgE、LTB4、血漿H2S、EOS 水平比較（x±s）

2.2 哮喘患兒急性期與緩解期的血清IgE、LTB4、血漿H2S、EOS水平比較 急性發(fā)作期哮喘患兒的血清 IgE、LTB4、EOS 高于緩解期（P<0.05），急性發(fā)作期哮喘患兒的血漿H2S低于緩解期患兒 （P<0.05）；見表 2。

表2 哮喘患兒急性期與緩解期的血清IgE、LTB4、血漿 H2S、EOS 水平比較（x±s）

2.3 哮喘組和對照組的MMEF、FEF50測定值比較哮喘組的MMEF、FEF50測定值低于對照組（P<0.0 5）；見表 3。

2.4 相關(guān)性分析 哮喘組的MMEF、FEF50測定值與 IgE、LTB4、EOS 呈負相關(guān)關(guān)系 （P<0.05）, 血漿H2S與MMEF、FEF50測定值呈正相關(guān)關(guān)系 （P<0.05）；見表 4。

表3 哮喘組和對照組的MMEF、FEF50測定值比較（x±s）

表4 相關(guān)性分析

3 討論

哮喘是一種常見的慢性呼吸道疾病,嚴重危害兒童健康。該病發(fā)病率高，常呈周期性發(fā)作，嚴重影響兒童的學(xué)習(xí)、生活和活動，影響兒童的正常生長發(fā)育[4]。許多患有哮喘的兒童因為不及時的治療或不恰當(dāng)?shù)闹委煻^續(xù)發(fā)展為成人哮喘,產(chǎn)生肺功能受損的現(xiàn)象,一些兒童甚至完全失去活動能力[5]。如果不及時有效地治療,嚴重的哮喘發(fā)作可能是致命的。全球范圍內(nèi)哮喘的發(fā)病率在0.1%～32%之間，其原因可能與基因、年齡、地理位置、氣候、環(huán)境、種族、工業(yè)化、城市化、室內(nèi)裝飾、生活水平、飲食習(xí)慣等有關(guān)[6]。該病急性發(fā)作時的主要癥狀有咳嗽、喘息、呼吸困難、胸悶等，緩解期的癥狀則不太明顯[7]。小兒哮喘的西醫(yī)治療主要包括免疫療法和脫敏療法（適用于外源性哮喘），在治療同時進行適當(dāng)鍛煉，該方法可促進血液循環(huán)及新陳代謝，改善呼吸功能，有利于提高患兒的身體機能[8]。

哮喘作為I型變態(tài)反應(yīng)性疾病,主要由IgE、LT B4、EOS等細胞因子共同作用。IgE是一種分泌型免疫球蛋白,是引起I型變態(tài)反應(yīng)的主要抗體，在哮喘患者中其含量呈現(xiàn)上升趨勢,其合成和分泌失衡是導(dǎo)致哮喘的主要原因[9]。LTB4由白細胞產(chǎn)生，它也是一種強效化學(xué)誘導(dǎo)物,與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)[10]。EOS是免疫反應(yīng)和過敏反應(yīng)過程中極為重要的細胞，其聚集狀態(tài)在臨床哮喘診斷中極為重要[11]。目前，H2S已被證明參與了機體的多種反應(yīng)，如炎癥反應(yīng)、高血壓等，當(dāng)內(nèi)源性H2S減少時，會加劇炎癥損傷和氣道高反應(yīng)性[12]。

由結(jié)果可知，哮喘組的血清IgE、LTB4、EOS顯著高于對照組,哮喘組的血漿H2S顯著低于對照組,該結(jié)果與以往研究相符，證實了IgE、LTB4、EOS在哮喘發(fā)病中的促進作用及H2S減輕氣道炎癥損傷的效果。緩解期患者的癥狀、體征消失，而且肺功能恢復(fù)到急性發(fā)作前的水平,因此本研究中急性發(fā)作期哮喘患兒的血清IgE、LTB4、EOS顯著高于緩解期，急性發(fā)作期哮喘患兒的血漿H2S顯著低于緩解期患兒，證明了IgE、LTB4、EOS及H2S在哮喘患兒病情判斷中的應(yīng)用價值。

MMEF、FEF50均是反映小氣道功能的指標(biāo)，在急性發(fā)作期會呈現(xiàn)下降趨勢，與哮喘患兒中、小氣道的阻塞性病變呈現(xiàn)一致現(xiàn)象[13-15]。哮喘組的MMEF、FEF50測定值顯著低于對照組，該結(jié)果與以往研究一致,可通過其數(shù)值變化對小氣道功能進行判斷。由研究結(jié)果可知,哮喘組的MMEF、FEF50測定值與IgE、LTB4、EOS呈顯著的負相關(guān)關(guān)系,血漿H2S與MMEF、FEF50測定值呈顯著的正相關(guān)關(guān)系，即IgE、LTB4、EOS及H2S與代表小氣道功能的MMEF、FEF50測定值之間存在密切聯(lián)系,可以通過測定IgE、LTB4、EOS及H2S來預(yù)判患兒的小氣道功能。

綜上所述，研究發(fā)現(xiàn)，在哮喘患兒的血清中，其IgE、LTB4、EOS水平升高，而血漿H2S水平降低，以上指標(biāo)可能與患兒小氣道功能降低有關(guān)。