不同病情進(jìn)展慢性HBV感染患者外周血乙肝病毒標(biāo)志物及HBV DNA定量水平的變化分析

薛峰，薛芬

（1.南陽市宛城區(qū)疾病控制中心體檢科，河南 南陽473000；2.南陽市第一人民醫(yī)院理療康復(fù)科，河南 南陽 473000）

乙型病毒肝炎是由乙肝病毒（HBV）引起的，以肝臟炎性病變?yōu)橹鞯膫魅静1]。臨床診斷主要依賴于血清特異性抗原抗體的定性檢測(cè)及HBVDNA的定量檢測(cè)[2,3]。慢性HBV感染臨床轉(zhuǎn)歸呈現(xiàn)多樣性，包括：慢性化及重癥化，慢性化表現(xiàn)為攜帶者、慢性乙型肝炎、肝纖維化、肝硬化、肝癌等[4,5]。重癥化表現(xiàn)為重癥肝炎、肝衰竭等。不同病情進(jìn)展的慢性HBV感染患者的臨床特點(diǎn)及實(shí)驗(yàn)室輔助檢查指標(biāo)不盡相同[6]。為探討不同病情進(jìn)展慢性HBV感染患者外周血乙肝病毒標(biāo)志物、HBV-DNA定量水平變化及其臨床意義，本研究選擇我院2017年1月-2018年12月收治的102例不同病情進(jìn)展的慢性HBV感染者為研究對(duì)象，比較乙肝病毒標(biāo)志物及HBV-DNA定量水平，以闡明慢性乙型肝炎病毒感染的臨床規(guī)律。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院2017年1月-2018年12月收治的102例不同病情進(jìn)展的慢性HBV感染者為研究對(duì)象，其中肝癌患者26例（A組），肝硬化24例（B組），慢性乙型肝炎 25例（C組），慢性HBV攜帶者27例（D組）。A組男16例，女10例；年齡 20~75歲，平均年齡（52.85±6.53）歲。 B 組男15例，女 9例；年齡 21~75歲，平均年齡（53.15±6.58）歲。C組男16例，女9例；年齡20~75歲，平均年齡（53.08±6.52）歲。 D組男17例，女12例；年齡 21~75歲，平均年齡（53.12±6.54）歲。 四組患者性別、年齡等基礎(chǔ)資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2 納入、排除標(biāo)準(zhǔn) 納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴符合肝硬化、慢性乙型肝炎、肝癌臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)；⑵HBV-DNA載量檢測(cè)陽性；⑶血清乙肝病毒標(biāo)志物檢測(cè)陽性；⑷對(duì)研究知情同意。

排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴存在心、腎、肺等其他臟器嚴(yán)重疾??；⑵無法同時(shí)接受乙肝病毒標(biāo)志物與HBVDNA檢測(cè)；⑶存在其他非HBV病毒感染；⑷妊娠及哺乳期女性。

1.3 研究方法 乙肝病毒標(biāo)志物檢測(cè)。采用免疫化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測(cè)HBV血清標(biāo)志物，包括：HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc。試劑購自北京萬泰生物藥業(yè)有限公司。采用美國BIO-TEKELX800全自動(dòng)酶標(biāo)儀檢測(cè)。嚴(yán)格按照試劑盒操作說明操作。

HBV-DNA檢測(cè)。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)，儀器型號(hào)為Roche LightCycle 480。試劑購自湖南圣湘生物科技有限公司。

生化指標(biāo)檢測(cè)。采用美國貝克曼AU-680型全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SAS9.3統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件,多組間計(jì)量資料的比較采用單因素方差分析。組間比較采用LSD-t檢驗(yàn)。計(jì)量資料的相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 四組患者外周血乙肝病毒標(biāo)志物水平比較四組 HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb 水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。A組HBsAg含量高于B、C、D組。C組HBeAg含量高于A、B、D組。A組HBeAb含量高于B、C、D組。C組HBcAb含量高于A、B、D 組（P<0.05）。 見表 1。

表1 四組患者外周血乙肝病毒標(biāo)志物水平比較

2.2 四組患者HBV-DNA定量水平比較 A組HB V-DNA含量均高于B、C、D組（P<0.05）。 A組HB V-DNA 含量高于 B、C、D 組 （P<0.05）。 B、C、D 組HB V-DNA含量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表2。

2.3 四組血清ALT、AST水平比較 四組ALT、AST水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。A組ALT、AST水平顯著高于 B、C、D 組（P<0.05）。 C 組 ALT、AST水平顯著高于B、D 組（P<0.05）。 B組ALT、AST水平顯著高于D組（P<0.05）。見表3。

表3 四組血清ALT、AST水平比較

2.4 慢性乙型肝炎患者HBV血清標(biāo)志物與HBVDNA的相關(guān)性 慢性乙型肝炎患者HBV-DNA水平與 HBsAg、HBeAg水平呈正相關(guān) （r=0.458，r=0.473，P<0.05）。 HBV-DNA水平與HBeAb水平呈負(fù)相關(guān) （r=-0.328，P<0.05）。 HBV-DNA 水平與HBcAb 水平無相關(guān)性（r=-0.068，P<0.05）。

3 討論

近年來，隨著檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，實(shí)驗(yàn)室對(duì)HBV感染的診斷技術(shù)逐漸增多[7]。目前臨床常用的檢測(cè)HBV感染的技術(shù)包括：血清標(biāo)志物檢測(cè)、核酸檢測(cè)、HBV基因型、顯微鏡檢查等[8-10]。多種指標(biāo)的聯(lián)合應(yīng)用,使HBV感染的敏感性、特異度顯著提升。HBV血清標(biāo)志物、HBV-DNA載量、肝功能指標(biāo)的聯(lián)合檢測(cè)為體內(nèi)HBV復(fù)制活躍程度、傳染性強(qiáng)弱的判斷依據(jù)之一[11]，對(duì)臨床診斷、治療HBV感染均具有重要的臨床意義。

本研究對(duì)不同病情進(jìn)展的HBV感染者分別進(jìn)行血清乙肝病毒標(biāo)志物、HBV-DNA載量及肝功能檢測(cè)。以期為乙型肝炎、肝硬化、肝癌的臨床特點(diǎn)提供理論依據(jù)。乙肝病毒標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果顯示，四組 HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb 水平存在顯著差異。肝癌組HBsAg含量高于肝硬化組、慢性乙型肝炎組、慢性HBV攜帶者組。慢性乙型肝炎組HBeAg含量高于肝癌組、肝硬化組、慢性HBV攜帶者組。肝癌組HBeAb含量高于肝硬化組、慢性乙型肝炎組、慢性HBV攜帶者組。慢性乙型肝炎組HBcAb含量高于肝癌、肝硬化、慢性HBV攜帶者組（P<0.05）。由于HBsAg陽性為HBV感染的標(biāo)志,但HBsAg不含病毒核酸成分,主要組成乙肝病毒的外殼部分。HBsAg濃度與肝內(nèi)共價(jià)閉合環(huán)狀DNA（cccDNA）及肝內(nèi)HBV-DNA水平明顯相關(guān)[12-14]。肝癌組中HBsAg水平最高，其次為肝硬化、乙型肝炎、慢性HBV攜帶者，提示隨著患者病情加重，病毒復(fù)制活躍程度明顯增加,而病毒活躍程度反過來促進(jìn)病情進(jìn)展。HBeAg為人體感染HBV后，跟隨HBsAg出現(xiàn)的第2個(gè)血清學(xué)抗原標(biāo)志物[15]，在乙肝活動(dòng)期檢出率升高,提示肝細(xì)胞存在明顯的損傷,患者有很強(qiáng)的傳染性[16]。慢性乙型肝炎組HBe Ag含量明顯高于其他組,與慢性乙型肝炎的傳染性強(qiáng)有著密切的關(guān)系。HBeAb為機(jī)體受HBeAg刺激產(chǎn)生的相應(yīng)抗體，既往的研究認(rèn)為[17]，抗-HBe陽性表示體內(nèi)無HBV存在，無傳染性，為預(yù)后良好的標(biāo)志，但有部分患者抗-HBe陰性，因HBV基因存在變異，病毒仍可復(fù)制，甚至可出現(xiàn)病情加重[18]。本研究中A組、D組抗-HBe水平均較高，具體原因還有待進(jìn)一步研究。HBcAb多在HBsAg出現(xiàn)后3～5周開始產(chǎn)生，此時(shí)HBsAg已經(jīng)消失，HBsAb尚未轉(zhuǎn)陽。HBcAb檢出提示乙肝病毒正在復(fù)制[19]。C組 HBcAb含量高于 A、B、D組，A組HBcAb含量較其他組低，說明隨著病情進(jìn)展HBV復(fù)制能力有所改變。肝癌組中ALT、AST水平明顯高于其他組，HBV-DNA載量也高于其他組,提示隨著病毒復(fù)制活躍程度的增加,肝損傷程度也逐漸增加[20]。

進(jìn)一步觀察慢性乙型肝炎患者血清乙肝病毒標(biāo)志物與HBV-DNA載量的相關(guān)性，結(jié)果顯示，慢性乙型肝炎患者HBV-DNA水平與HBsAg、HBeAg水平呈正相關(guān)，慢性乙型肝炎患者HBeAb水平與HBV-DNA載量呈負(fù)相關(guān)，HBV-DNA水平與HBcAb水平無相關(guān)性。說明將HBeAg與HBeAb定量水平與HBV-DNA載量結(jié)合起來，分析病毒活躍程度，可有效判斷病情進(jìn)展。

綜上所述，不同病情進(jìn)展的慢性HBV感染者外周血乙肝病毒標(biāo)志物水平與HBV-DNA水平存在相關(guān)性,兩者結(jié)合檢測(cè)可作為病情監(jiān)測(cè)的重要指標(biāo)。