血漿β-防御素-3聯(lián)合IL-6、PCT水平對下肢骨折患者手術(shù)部位感染的預(yù)測價值

朱梁豫，李興華，王雷鳴

（鄭州市骨科醫(yī)院，河南 鄭州 450000）

骨折手術(shù)后發(fā)生感染是常見并發(fā)癥之一，骨折手術(shù)通常時間較長且術(shù)中多伴隨輔助檢查，將增加患者手術(shù)發(fā)生感染風(fēng)險[1]。骨折手術(shù)患者術(shù)后臥床時間較長，骨折部位血液供給差，一旦出現(xiàn)感染輕則影響患者傷口愈合,嚴(yán)重者將造成骨髓炎等嚴(yán)重并發(fā)癥，甚至導(dǎo)致截肢[2,3]。白細(xì)胞介素-6（IL-6）是一種多肽，可參與刺激免疫反應(yīng)中細(xì)胞增殖、分化等[4]；降鈣素原（PCT）則是一種具有高特異性及敏感性的判斷感染的指標(biāo),當(dāng)患者受到細(xì)菌感染及全身炎癥時，其水平將異常升高[5]。防御素是具有免疫調(diào)節(jié)、促進(jìn)傷口愈合作用的多肽，可抗微生物活性,其中β-防御素-3是可誘導(dǎo)性防御素，可抵御入侵微生物并調(diào)節(jié)免疫作用[6]?；诖?，本文通過分析骨折術(shù)后感染患者的β-防御素-3、IL-6、PCT水平，探究其聯(lián)合預(yù)測價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2016年9月到2018年9月到醫(yī)院就診的下肢骨折患者155例,根據(jù)術(shù)后是否發(fā)生感染分為感染組（n=25）及未感染組（n=130）。感染組男性17例，女性8例；年齡25~65歲，平均（43.17±4.32）歲；手術(shù)時間 1~4h，平均（2.18±0.22）h；交通傷13例，跌倒傷8例，墜落傷4例。未感染組男性72例,女性58例;年齡23~63歲,平均（43.0 4±4.30）歲；手術(shù)時間 1~4h，平均（2.13±0.21）h；交通傷67例，跌倒傷48例，墜落傷15例。兩組患者一般資料可比（P＞0.05）。

納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴由影像學(xué)檢測確診為下肢骨折且進(jìn)行手術(shù)治療患者；⑵臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴妊娠期女性；⑵腦外傷患者；⑶自身免疫疾病患者；⑷血液系統(tǒng)疾病患者；⑸精神疾病者；⑹合并惡性腫瘤患者：⑺急慢性炎癥患者；⑻心、肝、腎等臟器功能嚴(yán)重不全者；⑼嚴(yán)重外傷史患者；⑽嚴(yán)重感染患者；(11)甲狀腺功能亢進(jìn)等疾病患者。

1.2 方法 所有患者均在術(shù)后1d檢測血漿β-防御素-3、IL-6、PCT水平。采用雙抗夾心免疫發(fā)光法檢測所有患者血清降鈣素原（procalcitonin，PCT）水平 （試劑盒購于北京華夏遠(yuǎn)洋科技有限公司），分離血清后加入試劑盒反應(yīng)孔中并在室溫下平衡30min，當(dāng)PCT超過0.5ng/ml可在觀察區(qū)觀察到淡紅色條帶,條帶顏色深淺度與血清中PCT濃度成正比，與參考卡片上提供測試濃度相關(guān)。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血漿β-防御素-3、IL-6水平 （試劑盒均購于武漢華美生物工程有限公司）：設(shè)立8孔標(biāo)準(zhǔn)孔，加入100μl樣品稀釋液，第1孔添加100μl標(biāo)準(zhǔn)品，混合均勻后吸出100μl加入第 2孔，重復(fù)操作至第7孔，第7孔吸出100μl溶液棄去，第8孔為空白對照；在8個孔中添加血清并混勻，在37℃環(huán)境下靜置120min；洗板5次后加1滴抗體并反應(yīng)60min，洗板5次后加2滴酶標(biāo)抗體反應(yīng)60min，洗板5次后加2滴底物反應(yīng)60min，加1滴終止液30min用酶標(biāo)儀檢測450nm處OD值，作出標(biāo)準(zhǔn)曲線檢測計算IL-6、β-防御素-3水平。

1.3 觀察指標(biāo) ⑴檢測兩組患者血漿β-防御素-3、PCT、IL-6 水平；⑵統(tǒng)計血漿 β-防御素-3、PCT、IL-6水平對術(shù)后感染患者的預(yù)測價值。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 本文數(shù)據(jù)采取統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS17.0進(jìn)行處理，計量資料采用t檢驗分析，β-防御素-3、合IL-6、PCT分別檢測及聯(lián)合預(yù)測價值使用受試者工作特征（ROC）曲線分析，計算ROC曲線下面積（AUC）；P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血漿β-防御素-3、PCT、IL-6水平比較 感染組患者血漿β-防御素-3低于非感染組，PCT、IL-6水平高于非感染組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；見表 1。

表1 兩組患者血漿β-防御素-3、PCT、IL-6水平比較

2.2 血漿β-防御素-3、PCT、IL-6水平對術(shù)后感染患者的預(yù)測價值比較 血漿β-防御素-3、PCT、IL-6檢測術(shù)后感染患者的AUC值分別為0.656、0.704、0.708，聯(lián)合檢測 AUC 值為 0.807；見圖 1。

圖 1 血漿 β-防御素 -3、PCT、IL-6水平對術(shù)后感染患者的預(yù)測價值比較

3 討論

隨著社會不斷發(fā)展,近年來我國發(fā)生意外事故比例不斷增加，導(dǎo)致下肢骨折發(fā)生率明顯上升。臨床中，部分患者對疼痛、發(fā)熱等不適癥狀敏感性較低，發(fā)生傷口感染后通常無明顯癥狀，直至病情發(fā)展到嚴(yán)重階段才表現(xiàn)出全身反應(yīng),此時感染已不再局限化，增加治療難度[7,8]。因此，對術(shù)后感染患者進(jìn)行早期診斷及治療十分關(guān)鍵。

防御素是一種單鏈的特殊抗菌肽,富含精氨酸殘基，具有穩(wěn)定分子結(jié)構(gòu)及光譜抗菌活性[9]。防御素可直接殺滅入侵機體的病原微生物,并在創(chuàng)傷修復(fù)、獲得性免疫反應(yīng)中有重要作用。防御素可分為α及β兩種,其中β-防御素在防御系統(tǒng)中作用十分重要，β-防御素-3可被多種炎癥細(xì)胞因子、細(xì)菌等所調(diào)控，呈誘導(dǎo)性表達(dá)。β-防御素-3基因是組成固有免疫應(yīng)答的重要部分,當(dāng)出現(xiàn)炎癥后將減弱固有免疫并加強適應(yīng)性免疫,從而降低患者防御能力并減少分泌β-防御素-3[10]。IL-6是多種細(xì)胞對白細(xì)胞介素-1及少量腫瘤壞死因子-α（TNF-α）反應(yīng)時合成的細(xì)胞因子，正常狀態(tài)時含量極低，但生物活性高，可通過自分泌及旁分泌產(chǎn)生作用[11]。IL-6具有強致炎活性,直接作用血管內(nèi)皮細(xì)胞并使其通透性增加，造成大量炎性滲出，同時可與TNF-α協(xié)同形成炎癥介質(zhì)網(wǎng)絡(luò)[12]。IL-6水平上升時一方面將激活防御反應(yīng)分化及低調(diào)前炎癥反應(yīng),并促使中性粒細(xì)胞凋亡，減輕炎癥反應(yīng)；另一方面還將造成免疫功能失調(diào)，促使巨噬細(xì)胞分泌轉(zhuǎn)化生長因子，導(dǎo)致免疫功能抑制。PCT是降鈣素的前肽物質(zhì)，無激素活性，源自甲狀腺C細(xì)胞，是由氨基酸組成的糖蛋白[13]。正常狀態(tài)下，極少量PCT將被釋放進(jìn)入血液循環(huán)，在健康人群中血液濃度為0.1~0.5μg/L，半衰期在10min左右,但當(dāng)受到毒素或細(xì)胞因子影響時將造成蛋白溶解,從而使血清中水平升高[14]。細(xì)菌感染后血清PCT水平將顯著升高,且將持續(xù)較長時間，而病毒感染、腫瘤、自身免疫疾病患者中僅輕度上升[15]。除微生物產(chǎn)物及細(xì)胞因子誘導(dǎo)釋放P CT外，IL-6也可調(diào)節(jié)血液循環(huán)中PCT水平。

本文中術(shù)后感染患者血漿β-防御素-3水平更低，IL-6、PCT水平更高，可能原因為患者感染后防御能力降低，減少分泌β-防御素-3；PCT受到致病細(xì)菌影響后致使蛋白溶解，向血液循環(huán)中釋放，故顯著增加血液中含量；患者感染后將產(chǎn)生炎癥反應(yīng)，促使分泌大量IL-6；朱忠等[16]研究發(fā)現(xiàn)術(shù)后感染患者PCT、IL-6水平明顯高于非感染組，姜慧等[17]研究發(fā)現(xiàn)牙周炎患者炎癥越嚴(yán)重則β-防御素-3更低，提示患者感染后體內(nèi)PCT、IL-6水平將明顯上升且β-防御素-3水平與 炎癥感染有一定聯(lián)系,與本文結(jié)果相符。本文中血漿β-防御素-3、IL-6、PCT聯(lián)合診斷術(shù)后感染患者AUC值更大，說明聯(lián)合診斷更有效。

綜上所述,本文發(fā)現(xiàn)骨折術(shù)后感染患者血漿β-防御素-3水平更低，IL-6、PCT水平更高，三者聯(lián)合檢測AUC值更大。