乳腺癌中分泌成分的表達(dá)及其臨床意義

鄭桂華，吳雅珣，何 松

乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤，WHO(2012)乳腺腫瘤分類提出無(wú)論是浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌(invasive ductal carcinoma, IDC)還是浸潤(rùn)性小葉癌(invasive lobular carcinoma, ILC)均起源于乳腺終末導(dǎo)管小葉單位(terminal duct lobular unit, TDLU)[1]。因此，WHO(2012)乳腺腫瘤分類中用非特殊型浸潤(rùn)性乳腺癌(invasive breast carcinoma of no special type, IBC-NST)取代了IDC。WHO(2012)乳腺腫瘤分類中僅強(qiáng)調(diào)IBC-NST和ILC形態(tài)學(xué)的不同，卻淡化了兩者的起源問(wèn)題。

多聚免疫球蛋白受體(polymeric immunoglobulin receptor, pIgR)由黏膜上皮細(xì)胞及外分泌腺上皮細(xì)胞合成。pIgR胞外段從細(xì)胞膜上切割、脫落形成的可溶性分泌片為分泌成分(secretory component, SC)。乳汁中的免疫球蛋白是通過(guò)乳腺腺泡pIgR跨過(guò)上皮膜進(jìn)入外分泌物中，pIgR在腺泡細(xì)胞頂端被蛋白酶水解釋放出分泌片段進(jìn)入分泌物中[2]。本文著重探討與乳腺腺泡功能有關(guān)的標(biāo)志物SC，旨在尋找與乳腺癌分型有關(guān)的標(biāo)志物。

1 材料與方法

1.1 材料收集2010～2012年江蘇省南通市腫瘤醫(yī)院病理科存檔的乳腺標(biāo)本247例，診斷參考WHO(2012)乳腺腫瘤分類，分子分型標(biāo)準(zhǔn)參考2013年St.Gallen專家共識(shí)。247例患者均為女性，年齡30～83歲；其中乳腺癌133例，良性乳腺腺泡組織114例。乳腺癌包括ILC 68例(經(jīng)典型 24例、腺泡型23 例、實(shí)性型9 例、多形性12例)，IBC-NST 50例(Ⅰ 級(jí)11例、Ⅱ級(jí)27例、Ⅲ級(jí)12例)，其它特殊類型癌合計(jì)15例(伴髓樣特征的癌5例、黏液癌6例、浸潤(rùn)性微乳頭狀癌2例、篩狀癌2例)。

1.2 免疫組化免疫組化染色采用SP法，一抗SC(H-300)購(gòu)自美國(guó) Santa Cruz公司，ER、PR購(gòu)自北京中杉金橋公司，二抗及DAB試劑盒購(gòu)自DAKO公司，具體操作步驟嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。用已知陽(yáng)性組織作陽(yáng)性對(duì)照，PBS代替一抗作陰性對(duì)照。

1.3 結(jié)果判定ER/PR陽(yáng)性定義：≥1%的腫瘤細(xì)胞核染色。SC蛋白陽(yáng)性信號(hào)呈棕黃色或棕褐色，定位于細(xì)胞質(zhì)中。每例均隨機(jī)觀察5個(gè)高倍鏡視野，用半定量法判定結(jié)果，按陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)計(jì)分：≤5%為0分，6%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，>75%為4分；按細(xì)胞陽(yáng)性著色強(qiáng)度計(jì)分：黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。兩項(xiàng)得分相乘，≥2分為陽(yáng)性，<2分為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析利用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用Pearson χ2檢驗(yàn)或Fisher精確概率檢驗(yàn)分析結(jié)果。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 SC在良性乳腺腺泡及乳腺癌中的表達(dá)114例正常乳腺組織良性腺泡細(xì)胞中，SC陽(yáng)性79例，陰性35例，陽(yáng)性率為69.3%；而正常乳腺導(dǎo)管上皮僅14例SC陽(yáng)性。133例乳腺癌組織中，SC陽(yáng)性30例，陰性103例，陽(yáng)性率為22.6%。SC在良性乳腺腺泡中的陽(yáng)性率顯著高于乳腺癌組織中的陽(yáng)性率(P<0.001，表1，圖1)。

2.2 SC在不同類型乳腺癌組織中的表達(dá)133例乳腺癌組織中ILC 68例，IBC-NST 50例，其它特殊類型的癌15例。SC在ILC、IBC-NST以及其它特殊類型癌中的陽(yáng)性率分別為27.9%(19/68)、14.0%(7/50)、26.7%(4/15)，SC的陽(yáng)性率與乳腺癌的類型無(wú)顯著相關(guān)性(P=0.173，表2)。

表1 良性乳腺腺泡及乳腺癌中SC的表達(dá)

a為Pearson χ2檢驗(yàn)

表2 不同類型乳腺癌中SC的表達(dá)

a為Fisher精確概率檢驗(yàn)

2.3 SC在IBC-NST中的表達(dá)50例IBC-NST中高分化(Ⅰ級(jí))11例，中分化(Ⅱ級(jí))27例，低分化(Ⅲ級(jí))12例；SC在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)中的陽(yáng)性率分別為9.1%(1/11)、11.1%(3/27)、25%(3/12)，SC陽(yáng)性率與腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分級(jí)、TNM分期以及分子分型均無(wú)顯著相關(guān)性(P均>0.05，表3，圖2～4)。

表3 IBC-NST中SC的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

a為Fisher精確概率檢驗(yàn)

2.4 SC在ILC中的表達(dá)SC在腺泡型ILC中的陽(yáng)性率為52.2%(12/23)，在多形性、經(jīng)典型、實(shí)性型中的陽(yáng)性率分別為25%(3/12)、12.5%(3/24)、11.1%(1/9)；SC的陽(yáng)性率與ILC的組織學(xué)類型(P=0.014)及TNM分期(P=0.004)相關(guān)，與腫瘤直徑(P=0.128)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.595)、分子分型(P=0.082)均無(wú)顯著相關(guān)性(表4，圖5～8)。

表4 ILC中SC的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

a為Pearson χ2檢驗(yàn)；b為Fisher 精確概率檢驗(yàn)；c為3例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況無(wú)法評(píng)估

2.5 SC與ER、PR表達(dá)的相關(guān)性50例IBC-NST中ER、PR的陽(yáng)性率分別為80.0%(40/50)、70.0%(35/50)，SC陽(yáng)性率與ER、PR的表達(dá)狀態(tài)無(wú)關(guān)(P均>0.05)；68例ILC中，ER、PR的陽(yáng)性率分別為64.7%(44/68)、63.2%(43/68)，SC陽(yáng)性率與ER的表達(dá)狀態(tài)無(wú)關(guān)(P=0.868)，但與PR的表達(dá)相關(guān)(P=0.024)，其在PR陽(yáng)性患者中的陽(yáng)性率(18.6%，8/43)低于PR陰性患者中的陽(yáng)性率(44.0%，11/25，表5)。

表5 SC與ER、PR表達(dá)的相關(guān)性

a為Fisher精確概率檢驗(yàn)；b為Pearson χ2檢驗(yàn)

3 討論

近年我國(guó)乳腺癌的發(fā)病率逐年增加，對(duì)女性的生命健康造成嚴(yán)重威脅[3-4]。SC作為pIgR的胞外段部分，其主要功能是介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)多聚免疫球蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)、參與SIgA形成等[5]。國(guó)內(nèi)外多年來(lái)對(duì)SC的研究主要集中在SC與腸道、呼吸道等。Liu等[6]發(fā)現(xiàn)SIgA、IgA及SC在缺氧早期表達(dá)增加，可能保護(hù)肺組織免受急性肺損傷的影響，但是在缺氧晚期SIgA、IgA及SC含量顯著下降，從而導(dǎo)致肺部免疫異常。SC在免疫相關(guān)疾病中的研究較多見，而在腫瘤中的報(bào)道較少，且在腫瘤中的表達(dá)趨勢(shì)不一。Papadopoulos等[7]研究發(fā)現(xiàn)在子宮內(nèi)膜增生至上皮內(nèi)病變的過(guò)程中SC表達(dá)逐漸增加。有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，肝癌組患者pIgR/SC水平明顯高于肝硬化、良性肝占位患者[8]。然而，Bartek等[9]發(fā)現(xiàn)SC在乳腺癌中陽(yáng)性率較低，僅有24%，明顯低于良性乳腺組織98.11%。本組發(fā)現(xiàn)SC在良性乳腺腺泡組織中陽(yáng)性率為69.3%，在乳腺癌中陽(yáng)性率為22.6%，提示SC在良性乳腺腺泡組織中的表達(dá)明顯高于乳腺癌組織。本組還發(fā)現(xiàn)，SC在ILC中的陽(yáng)性率為27.9%，在IBC-NST和其它少見特殊類型癌中的陽(yáng)性率分別為14.0%和26.7%，盡管統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示SC的表達(dá)與這三組類型并沒(méi)有明顯的相關(guān)性，但從結(jié)果中仍可以看出SC在ILC中的表達(dá)高于IBC-NST和其它特殊類型癌，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義可能與樣本量相對(duì)較小有關(guān)。進(jìn)一步分析SC與不同亞型ILC的相關(guān)性，結(jié)果顯示SC在腺泡型ILC中的陽(yáng)性率為52.2%，明顯高于其余三種亞型(多形性25%、經(jīng)典型12.5%及實(shí)性型11.1%)，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。研究已證實(shí)，乳腺腺泡發(fā)育與內(nèi)分泌水平密切相關(guān)[10-11]。因此，本組分析SC與ER、PR之間的相關(guān)性。結(jié)果顯示：SC與IBC-NST患者ER、PR表達(dá)狀態(tài)無(wú)關(guān)(P均>0.05)，且與ILC患者ER表達(dá)狀態(tài)無(wú)關(guān)(P=0.868)，但與ILC患者PR表達(dá)狀態(tài)相關(guān)(P=0.024)，其在PR陽(yáng)性患者中的陽(yáng)性率(18.6%)低于PR陰性患者中的陽(yáng)性率(44.0%)。

圖1 SC在良性乳腺腺泡細(xì)胞中高表達(dá)，而在正常乳腺導(dǎo)管上皮中不表達(dá)，SP法 圖2 SC在IBC-NST Ⅰ級(jí)中的表達(dá)，SP法 圖3 SC在IBC-NST Ⅱ級(jí)中的表達(dá)，SP法 圖4 SC在IBC-NST Ⅲ級(jí)中的表達(dá)，SP法 圖5 SC在腺泡型ILC中的表達(dá)，SP法 圖6 SC在多形性ILC中的表達(dá)，SP法 圖7 SC在經(jīng)典型ILC中的表達(dá)，SP法 圖8 SC在實(shí)性型ILC中的表達(dá)，SP法

綜上所述，本組結(jié)果顯示SC在正常乳腺組織良性腺泡細(xì)胞中高表達(dá)，而在正常乳腺導(dǎo)管上皮中偶見局灶表達(dá)，且SC在良性乳腺腺泡中的陽(yáng)性率顯著高于癌組織中的陽(yáng)性率。SC在腺泡型ILC中的陽(yáng)性率較高，而在多形性、經(jīng)典型、實(shí)性型ILC中的陽(yáng)性率相對(duì)較低。SC在ILC PR陽(yáng)性患者中的陽(yáng)性率低于PR陰性患者中的陽(yáng)性率。